哺乳动物精子中精蛋白mRNA的分析

哺乳动物精子中精蛋白mRNA的分析@费仁仁$中国医学科学院药物研究所!　中国 北京100050 @吴小芳$中国医学科学院药物研究所!　中国 北京100050 @陈晖$中国医学科学院药物研究所!　中国 北京100050 @陈松$北京协和医院!　中国 北京100730 @曹坚$北京协和医院!　中国 北京100730     

~(14)C-醋酸棉酚在大鼠体内的药物动力学研究——Ⅱ.在大鼠体内分布、排泄和代谢的动态的定量分析

1.大鼠口服标记棉酚后迅速通过粪、尿和呼气排出。粪排出量最多,占口服总剂量的83.5%;其次为呼气中的~(14)CO_2,占11.73%;尿中的含量最少,只占2.51%。经粪排出率最高,表明通过肝脏—胆汁—粪的代谢和排泄是排除体棉酚的主要途径和解毒过程。呼气中的CO_2是棉酚代谢过程中脱羰基作用的产物,这一过程也是体内棉酚解毒过程的一种方式。尿中排泄量低,可能与棉酚的非离子化态大分子结构不易通透肾小球而有利于肾小管的重吸收有关。2.大鼠一次口服标记棉酚20微居里/7.5毫克后,从体内排出总剂量的半量的时间(t(1/2))为2.5天,按排泄半量规律推算,从体内清除所需的时间约为服药后的第23天左右,与我们在第19天实测的体内残留率比例大体相符。3.分布于脏器组织中的标记棉酚的定量测定结果表明:胃、肠道内容物,胃、肠道组织和肝脏中的比活性最高,在服药后1天即到达它们的高峰强度水平。血液的活性在1天内亦到达高峰。但其比活性较上述脏器组织为低。心、肾、脾、肺、胰、膈肌和睾丸等主要脏器组织的比活性在服药后的初期较低。到第4天才达到它们各自的高峰水平。其中脾、肾、心的比活性较其他脏器为高,内分泌腺中的肾上腺、垂体和甲状腺的比活性亦较高。而神经系统中的丘脑下部、延脑和脊髓的比活性则均较低。各脏器的比活性随时间而递减下降,到第19天后均下降至微量水平。4.连续给药组脏器组织中的标记棉酚分布动态与上述一次给药组基本相同。连续每日服药2周后,所有组织均出现放射活性,其中脑组织的比活性最低,胃、肠道壁及其内容物以及肝的比活性最高。其次为脾、肺、心、肾、胰、膈肌和睾丸。这些主要脏器在连续服药3周后达到各自的比活性高峰水平。以后即逐渐下降。停药2周后均下降至微量水平。上述结果表明两个给药组的棉酚分布的变化动态基本一致,定质和定位的结果亦基本相符。5.棉酚的代谢:两个服药剂量组的胃、肠道组织,肝组织,胃、肠道内容物和粪中的游离棉酚(F)和结合棉酚(B)的比值,在服药后的初期均较小。以后随时间而逐渐递增。反映了棉酚在体内的早期代谢形式以结合棉酚为主,以后在脏器组织中通过氧化、分解或转化,游离棉酚及其代谢产物的比例增加,通过粪、尿和呼气(脱羰基后的CO_2)排出。     

哺乳动物睾丸长形精子细胞及精子中泛素化蛋白的研究

哺乳动物睾丸长形精子细胞及精子中泛素化蛋白的研究@费江枫$北京师范大学生命科学院!　中国 北京100875 @肖雪媛$北京师范大学生命科学院!　中国 北京100875 @于晖$北京师范大学生命科学院!　中国 北京100875 @何大澄$北京师范大学生命科学院!　中国 北京100875 @王永潮$北京师范大学生命科学院!　中国 北京100875 @陈晖$中国医学科学院药物研究所!　中国 北京100050 @费仁仁$中国医学科学院药物研究所!　中国 北京100050…     

HR6B cDNA克隆、基因表达及其与精子生育力相关的研究

HR6B cDNA克隆、基因表达及其与精子生育力相关的研究@费江枫$北京师范大学生命科学院!　中国北京100875 @梁前进$北京师范大学生命科学院!　中国北京100875 @彭安$北京师范大学生命科学院!　中国北京100875 @何大澄$北京师范大学生命科学院!　中国北京100875 @王永潮$北京师范大学生命科学院!　中国北京100875 @陈宇$中国医学科学院药物研究所!　中国北京100050 @吴小芳$中国医学科学院药物研究所!　中国北京100050 @费仁仁$中国医学科学院药物研究所!　中国北京100050…     

大鼠精核蛋白的纯化

用大鼠睾丸制备长形精子细胞核及用附睾制备的附睾精子核,用盐酸胍法提取总碱性蛋白。通过ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００分子筛层析,其第三峰用５％ＴＣＡ沉淀,得到纯大鼠精核蛋白。ＲＰ也可用ＴＢＰ通过ＨＰＬＣ反相柱得到纯化,ＲＰ位于２６％－２８％乙腈梯度。     

大鼠精核蛋白的纯化

用大鼠睾丸制备长形精子细胞核及用附睾制备的附睾精子核,用盐酸胍法提取总碱性蛋白（Ｔｏｔａｌ　ｂａｓｉｃ　ｐｒｏｔｅｉｎ,ＴＢＰ）。通过Ｓｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ－１００分子筛层析,其第三峰用５％ＴＣＡ沉淀,得到纯大鼠精核蛋白（Ｒａｔ　ｐｒｏｔａｍｉｎｅ,ＲＰ）。ＲＰ也可用ＴＢＰ通过ＨＰＬＣ反相柱得到纯化,ＲＰ位于２６％－２８％乙腈梯度。     

红细胞分化因子诱导HL-60细胞排核过程中酪氨酸蛋白质磷酸化的改变

红细胞分化因子是从兔子网织红细胞中提出的一个蛋白因子,它可以使多种癌细胞株的生长受到抑制[1]．以早幼粒白血病细胞（HL-60）为材料,研究其被EDDF诱导过程中细胞内PTK,PTPP及它们底物磷酸化水平的变化．实验发现：部分纯化的EDDF对HL-60细胞生长有明显的抑制作用,经NBT还原和Giemsa染色,可见HL-60细胞被诱导出现排核．同时,细胞的PTK,PTPP酶活性有明显的变化,PTPP和PTK的底物蛋白在胞浆中酪氨酸蛋白磷酸化水平亦出现改变（但颗粒部分变化不明显）．