二硝基氟苯修饰的黑色素瘤细胞激活树突状细胞诱导特异性T细胞反应

目的:探索半抗原二硝基氟苯(DNP)修饰的恶性黑色素瘤细胞(恶黑)激活树突状细胞(DC)后,在体外诱导特异性T细胞反应的抗肿瘤效应。方法:采用DNP修饰恶黑细胞M3(H-2d),然后在体外激活BALB/c小鼠(H-2d)外周血来源的DC,用于激发自体的T细胞,观察对T细胞的增殖和特异性T细胞的杀伤功能。结果:经DNP修饰的M3细胞激活的DC,其诱发的T细胞增殖能力和对M3细胞的特异性杀伤效应均明显高于未修饰的M3细胞组和DC组。结论:DNP修饰M3所激活的DC可以诱导更强的恶黑特异性T细胞效应。     

人p53启动子萤光素酶报告基因的构建及其活性测定

目的：克隆p53基因的启动子,插入萤光素酶报告基因载体,并检测启动子活性。方法：采用PCR技术从人肝癌细胞系HepG2基因组中扩增人p53启动子,插入萤光素酶报告基因载体pGL4．0-empty,将重组质粒转染293T、ZR75-1、HepG2、A549细胞,测定p53启动子的转录活性。结果：构建了p53启动子的萤光素酶报告基因;通过测序及质粒酶切鉴定,所构建的p53启动子正确;活性实验表明,报告基因在多种细胞中显示构建的p53启动子活性,并呈现一定的剂量效应;转录因子USF能以剂量效应方式提高p53报告基因的转录活性。结论：克隆了人p53启动子,为进一步研究调控p53的转录因子奠定了基础。     

Neurobiological mechanisms of the meridian and the propagation of needle feeling along the meridian pathway

The present experiments attempt to find the meridian phenomenon and how the needle feeling propagates along the given meridian channels. The neurobiological mechanisms of the meridian were studied with neuroelectrical recording from the motor neurons and CB-HRP retrograde histochemistry technique in both rats and cats. The results demonstrated that most, but not all, of alpha motor neurons supplying a muscle group of a given meridian were selectively activated by afferent inputs originating not only from homonymous or heterogeneous, but synergistic muscle, but also from the skin nerve overlying the muscle group of the homonymous meridian. However, the afferent inputs from the heterogeneous meridian have very weak or no effect. On the other hand, the labeled motor neurons supplying a given meridian muscles form a discrete longitudinal column with a definite bound in the lateral ventral horn. There are oriented dendro-dendristes projections between the labeled motor neurons.The characteristics of both sel     

癌基因及癌相关基因的甲基化研究进展

正常细胞基因具有相对稳定的甲基化类型。由于内外环境因素的影响,这种类型常常发生改变,继而影响基因的表达。在致癌物的作用下,细胞ＤＮＡ普遍呈低甲基化现象,癌基因特异位点的低甲基化将使其异常表达而参与细胞的癌变过程。此外,ＤＮＡ的低甲基化使染色质凝聚发生率碍,在细胞分裂过程中易致染色体易位和丢失。     

饲喂黄曲霉毒素B_1大鼠肝中AFB_1-DNA加合物的免疫组织化学研究

应用免疫组织化学ＳＰ法对４例饲喂黄曲霉毒素Ｂ１的Ｗｉｓｔａｒ大鼠肝组织中ＡＦＢ１－ＤＮＡ加合物的染色及常规ＨＥ染色发现,４例肝细胞核均出现异型性,但未见肝细胞坏死、增生灶及肝细胞癌;免疫组化揭示部分肝细胞核出现棕黄色、不均质状的ＡＦＢ１－ＤＮＡ加合物,阳性细胞数占１０～８５％。结果提示免疫组织化学方法可作为一种ＡＦＢ１的定位方法,ＡＦＢ１在动物致癌过程中ＡＦＢ１－ＤＮＡ加合物可能具有启动作用     

慢病毒介导的mTOR敲低肝癌细胞株HepG2的构建及初步功能检测

目的:建立高效稳定的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)小干扰RNA(siRNA)细胞导入方法,并对mTOR敲低的HepG2肝癌细胞株的功能进行初步检测。方法:构建了2条不同的人mTOR慢病毒siRNA载体pLenti-H1/mTOR siRNA,与3个包装质粒共转染293T细胞,包装成慢病毒后感染HepG2细胞;经嘌呤霉素筛选2周后,收集细胞进行Western印迹,检测mTOR敲减效果及其下游基因c-myc、周期蛋白D1(cyclinD1)表达水平及4E-BP1、S6K1磷酸化水平的变化。结果:RT-PCR和Western印迹结果显示,构建的pLenti-H1/mTOR siRNA能有效抑制mTOR基因的表达,敲低了mTOR蛋白水平,且沉默mTOR后其下游基因c-myc、CyclinD1的表达水平及4E-BP1、S6K1磷酸化水平降低。结论:构建了慢病毒介导RNA干扰mTOR表达载体,为进一步研究mTOR通路奠定了实验基础。     

外体（exosome）在肿瘤免疫治疗中的应用

外体（exosome）是由细胞分泌至细胞外的膜性小囊泡。研究发现,来源于树突状细胞和来源于肿瘤细胞的外体富集MHCⅠ/Ⅱ类分子、协同刺激分子、热激蛋白70和90等多种活性分子和肿瘤抗原,在体内外免疫调节中起关键作用,以外体为基础的肿瘤免疫治疗已成为热点。我们简要介绍外体的特征、分离制备和临床应用研究。