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人p53启动子萤光素酶报告基因的构建及其活性测定
引用本文:刘家宏,徐小洁,符静,范忠义,吕朝晖,陆菊明,肖文华,叶棋浓,朱建华.人p53启动子萤光素酶报告基因的构建及其活性测定[J].生物技术通讯,2013(1):41-44.
作者姓名:刘家宏  徐小洁  符静  范忠义  吕朝晖  陆菊明  肖文华  叶棋浓  朱建华
作者单位:1. 解放军总医院 第一附属医院肿瘤科,北京 100037
2. 解放军总医院 内分泌科,北京 100853
3. 军事医学科学院 生物工程研究所,北京 100850
基金项目:国家自然科学基金(30872939,31100604)
摘    要:目的:克隆p53基因的启动子,插入萤光素酶报告基因载体,并检测启动子活性。方法:采用PCR技术从人肝癌细胞系HepG2基因组中扩增人p53启动子,插入萤光素酶报告基因载体pGL4.0-empty,将重组质粒转染293T、ZR75-1、HepG2、A549细胞,测定p53启动子的转录活性。结果:构建了p53启动子的萤光素酶报告基因;通过测序及质粒酶切鉴定,所构建的p53启动子正确;活性实验表明,报告基因在多种细胞中显示构建的p53启动子活性,并呈现一定的剂量效应;转录因子USF能以剂量效应方式提高p53报告基因的转录活性。结论:克隆了人p53启动子,为进一步研究调控p53的转录因子奠定了基础。

关 键 词:p53启动子  萤光素酶报告基因  转录活性

Construction of a Luciferase Reporter Gene Vector Directed by p53 Promoter and Characterization of its Promoter Activity
LIU Jia-Hong,a,XU Xiao-Jie,FU Jing,b,FAN Zhong-Yi,a,LYU Chao-Hui,b,LU Ju-Ming,b,XIAO Wen-Hua,a,YE Qi-Nong,ZHU Jian-Hua.Construction of a Luciferase Reporter Gene Vector Directed by p53 Promoter and Characterization of its Promoter Activity[J].Letters in Biotechnology,2013(1):41-44.
Authors:LIU Jia-Hong  a  XU Xiao-Jie  FU Jing  b  FAN Zhong-Yi  a  LYU Chao-Hui  b  LU Ju-Ming  b  XIAO Wen-Hua  a  YE Qi-Nong  ZHU Jian-Hua
Institution:1a 1.a.Department of Oncology,First Affiliated Hospital,Beijing 100037;b.Department of Endocrine,Beijing 100853;General Hospital of PLA;2.Beijing Institute of Biotechnology,Beijing 100850;China
Abstract:
Keywords:
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