微创经椎间孔入路与传统后路手术治疗单节段腰椎结核的疗效比较

目的：对比微创经椎间孔入路与传统后路手术治疗腰椎结核的临床疗效,评价微创经椎间孔入路治疗腰椎结核的安全性及 有效性。方法：回顾性分析本院2012 年10 月-2013 年3 月收治的单节段腰椎结核患者73 例,所有患者均为单节段病变,以腰痛 为主,无神经压迫症状,死骨和脓肿范围不大。其中43 例采用传统开放手术,30 例采用微创手术,于围术期分别记录两组患者的 手术时间、术中出血量及术后引流量,术后1、3、6 和12 月时采用疼痛视觉模拟评分(VAS)和Oswestry 功能障碍指数(ODI)进行疗 效评估,末次随访时记录并比较两组患者的融合率。结果：所有患者术后腰痛明显减轻,发热患者体温在2 周内恢复正常。微创手 术组的手术时间、术中出血量及术后引流量分别为240± 30 min、520± 50 mL 和630± 110 mL,均明显少于传统手术组的180± 35 min、350± 50 mL和320± 80 mL (P<0.05)。在术前、术后1 月、3 月、6 月、12 月和末次随访时,微创手术组腰痛VAS评分分别 为8.7± 1.2 分、4.5± 1.1 分、3.5± 1.1 分、2.0± 1.4 分、1.3± 0.5 分和1.2± 0.5 分,ODI 评分分别为（77± 6）%、（31± 5）%、（23± 8）%、（14± 6）%、（8± 4）%和（7± 3）%;传统手术组VAS评分分别为8.5± 1.1 分、2.7± 0.7 分、2.1± 0.6 分、1.9± 0.7 分、1.1± 0.4 分 和1.1± 0.4 分,ODI 评分分别为（78± 5）%、（23± 6）%、（14± 7）%、（12± 5）%、（7± 2）%和（7± 2）%。其中,术后1 个月和3个月, 微创组腰痛VAS 评分和ODI评分均明显低于开放组(P<0.05)。术后6 个月、12 个月和末次随访时,两组患者腰痛VAS 评分和 ODI评分差异无统计学意义(P>0.05)。末次随访时所有病例均获得骨性融合。结论：微创经椎间孔入路手术治疗单节段腰骶椎结 核,可获得与传统后路手术相同的临床疗效,且手术时间短,术中出血量及术后引流量较少,具有较高的安全性。     

三疣梭子蟹C型溶菌酶在毕赤酵母中的表达及其抑菌活性

C型溶菌酶是存在于各种生物组织中的重要的先天性免疫蛋白,是开发天然抑菌剂的良好候选者。以甲壳类动物三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)C型溶菌酶成熟肽为研究对象,首先通过RT-PCR克隆其编码基因"ptlyC";以pPICZαA为表达载体,构建重组表达载体pPICZαA-ptlyC,电转至毕赤酵母(Pichia pastoris)X-33后,通过高浓度的博来霉素筛选到高拷贝酵母转化子;在28℃、250 r/min和pH6.0的条件下,经1%的甲醇诱导表达72 h,得到含重组ptlyC的培养液上清;经固化金属离子亲和层析(IMAC)纯化,得到分子量约为25.3 kD的纯化产物。通过菌落计数法证明含重组ptlyC的培养液上清具有抑制革兰氏阳性的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的活性;通过琼脂糖凝胶扩散法证明纯化的重组ptlyC具有抑制革兰氏阴性的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和沙门氏菌(Salmonella lignieres)的活性。     

注射羊外周血淋巴细胞mRNA的爪蟾卵母细胞M型乙酰胆碱电流基本特性

将着外周血淋巴细胞ｍＲＮＡ注入非洲爪蟾卵母细胞胞乐内,借助卵母细胞折翻译系统,表达羊外周血淋巴细胞的Ｍ型乙酰胆碱受体并移植到卵母细胞膜上,用电压钳位仪检测表达受体电源。结果发现Ａｃｈ可诱发卵母细胞产生电流反应,该反应能被Ｍ型Ａｃｈ受体阻断剂硫酸阿托品阻断,但不能被Ｎ型受体阻断剂氯化筒箭毒阻断。     

银杏胚珠贮粉室的早期发育

对银杏(Ginkgo biloba L.)胚珠贮粉室的早期发育过程以及珠心细胞死亡的细胞学机制进行了研究.DNA电泳出现DNA ladder和TUNEL标记说明参与形成贮粉室的珠心细胞死亡是程序性死亡(PCD)过程,并且显示出在贮粉室形成中,PCD的发生有一定的空间分布式样.结合扫描电镜观察,贮粉室的早期发育可分为4个阶段:起始事件是位于珠孔端的3至4层珠心细胞纵向伸长;接着,位于珠心组织最上部(珠孔端)的珠心细胞启始死亡;然后,这些已经纵向伸长的珠心细胞向基地和侧向地逐渐死亡,形成一个空腔;最后,珠孔端珠心表皮细胞以开裂的方式与其余表皮细胞脱离而形成贮粉室的开口.大孢子母细胞时期,贮粉室尚未发生;四分体阶段,贮粉室已经开始形成;到雌配子体发育时期,贮粉室已经完全产生.反映大孢子发育和贮粉室发生的同步性.     

太平洋牡蛎防御素在毕赤酵母中的重组表达及其抑菌活性

防御素是一类富含精氨酸和半胱氨酸的内源性阳离子抗菌肽,是软体动物抵御各种病原微生物侵染的重要免疫因子。太平洋牡蛎防御素(Crassostrea gigas defensin,CgD)近羧基端的43个氨基酸残基构成了其成熟肽区域,决定了CgD的生物学活性。首先通过逆转录PCR和设计特异性引物从太平洋牡蛎外套膜中分离并扩增到3?端添加和不添加6×His标签的两种目的基因CgDH~+和CgDH–;与pPICZαA连接后构建的重组表达载体(pPICZαA-CgDH~+和pPICZαA-CgDH–)电转至毕赤酵母Pichia pastoris X-33中,使用1.0%甲醇诱导表达目的蛋白CgDH~+和CgDH–,最适培养条件为29℃、250 r/min、72 h;通过固化金属离子亲和层析(IMAC)获得分子量为5.78 kDa的纯化的重组蛋白CgDH~+,根据其蛋白质浓度推算表达量为2.32 mg/L。经MALDI-TOF-TOF质谱分析证明纯化产物即为预期的目的蛋白。抑菌试验结果显示分别含重组蛋白CgDH~+和重组蛋白CgDH–的培养液上清对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus和铜绿假单孢菌Pseudomonas aeruginosa都具有抑菌活性,表明重组蛋白中6×His标签的存在与否并不影响其生物学活性。     

手术时机对活动型胸椎结核伴截瘫临床疗效的影响

目的:探讨手术时机对活动型胸椎结核伴截瘫患者临床疗效的影响。方法:回顾性分析2009年至2013年我院收治的572例脊柱结核患者的临床资料,根据纳入标准选择活动型胸椎结核伴截瘫患者29例。依据截瘫症状发生至入院接受手术治疗时间进行分组,活动型结核伴截瘫分为发生截瘫后2周内(第Ⅰ组)、2周至4周(第Ⅱ组)、4周至7周(第Ⅲ组)手术组,评价和比较其手术前后的VAS评分、Cobb角以及最终Frankel分级的情况。结果:所有患者的切口均Ⅰ期愈合,平均骨性融合时间5.3个月。术后及末次随访各组VAS评分、Cobb角明显改善。活动型结核伴截瘫2周内、2至4周手术的患者神经功能恢复良好,24例(96%)神经功能恢复至Frankel分级D级或E级。截瘫发生后4周至7周(第Ⅲ组)手术亦有效。结论:以规范抗结核药物治疗为基础的胸椎结核伴截瘫,原则上应早期手术。病情复杂的活动型结核伴截瘫患者在合并症处理后手术的个体化治疗,亦可有效解除脊髓压迫,促进截瘫恢复,无须急诊手术。     

D—半乳糖对神经元和成纤维细胞拟老化作用的实验研究

实验用体内、外相结合的方法,观察了Ｄ－半乳糖（Ｄ－ｇａｌａｃｔｏｓｅ,Ｄ－ｇａｌ．）对细胞的促老化作用。结果表明,Ｄ－ｇａｌ使培养大鼠胎脑神经元出现生长发育缓慢、突起脱落、死亡率增高等退行性变;大鼠肺成纤维细胞的体外分裂代数减少;人胎儿肺二倍体成纤维细胞（ＨＢＳ）分裂周期中Ｇ２－Ｍ期细胞减少、Ｇ－Ｇ１期细胞增加、ＤＮＡ含量下降,细胞增殖速度减慢;大鼠胎脑神经细胞和ＨＢＳ中ＳＯＤ含量降低,丙二醛（ＭＤＡ）水平升高,这些结果与次黄瞟呤（ＨＰＸ）－黄瞟呤氧化酶（ＸＯＤ）系统产生的超氧阴离子自由基（Ｏ－２·）作用一致。提示,Ｄ－ｇａｌ抑制细胞生长发育和分裂繁殖,加速细胞老化,其机理可能与Ｏ－２·等活性氧（ＲＯＳ）过荷引起的脂质过氧化有关。