破色期番茄果实均一化cDNA沉默文库的构建和功能基因筛选模型的初步建立

番茄果实的成熟是由多基因精细调控的一个过程．利用破色期番茄果实,根据复性动力学原理在mRNA水平进行均一化操作使高丰度和低丰度的mRNA丰度接近．然后把均一化之后mRNA反转录得到cDNA,再与基因沉默载体pTRV重组,最后把构建好的载体通过电转化的方法转入到GV3101农杆菌中,从而建立起破色期番茄果实均一化cDNA沉默文库．通过番茄果实中病毒诱导基因沉默技术,对cDNA沉默文库进行初步筛选,从而确定功能基因筛选模型．在模型建立阶段,以番茄红素合成途径相关的PDS基因作为内标基因,在100个混合农杆菌样中,成功筛选到了PDS基因．     

番茄中microRNAs研究进展

MicroRNAs(miRNAs)是一类特殊的、具有沉默作用的小分子RNA,它能够调控真核生物的基因表达.在植物中,miRNAs通过与靶mRNA互补配对、引起靶mRNA的降解或翻译阻遏的方式来起调控作用.作为一种研究果实成熟衰老的模式植物,近年来,番茄miRNAs的研究取得了很大进展.在番茄中,miRNAs几乎参与了所...     

微创经椎间孔入路与传统后路手术治疗单节段腰椎结核的疗效比较

目的：对比微创经椎间孔入路与传统后路手术治疗腰椎结核的临床疗效,评价微创经椎间孔入路治疗腰椎结核的安全性及 有效性。方法：回顾性分析本院2012 年10 月-2013 年3 月收治的单节段腰椎结核患者73 例,所有患者均为单节段病变,以腰痛 为主,无神经压迫症状,死骨和脓肿范围不大。其中43 例采用传统开放手术,30 例采用微创手术,于围术期分别记录两组患者的 手术时间、术中出血量及术后引流量,术后1、3、6 和12 月时采用疼痛视觉模拟评分(VAS)和Oswestry 功能障碍指数(ODI)进行疗 效评估,末次随访时记录并比较两组患者的融合率。结果：所有患者术后腰痛明显减轻,发热患者体温在2 周内恢复正常。微创手 术组的手术时间、术中出血量及术后引流量分别为240± 30 min、520± 50 mL 和630± 110 mL,均明显少于传统手术组的180± 35 min、350± 50 mL和320± 80 mL (P<0.05)。在术前、术后1 月、3 月、6 月、12 月和末次随访时,微创手术组腰痛VAS评分分别 为8.7± 1.2 分、4.5± 1.1 分、3.5± 1.1 分、2.0± 1.4 分、1.3± 0.5 分和1.2± 0.5 分,ODI 评分分别为（77± 6）%、（31± 5）%、（23± 8）%、（14± 6）%、（8± 4）%和（7± 3）%;传统手术组VAS评分分别为8.5± 1.1 分、2.7± 0.7 分、2.1± 0.6 分、1.9± 0.7 分、1.1± 0.4 分 和1.1± 0.4 分,ODI 评分分别为（78± 5）%、（23± 6）%、（14± 7）%、（12± 5）%、（7± 2）%和（7± 2）%。其中,术后1 个月和3个月, 微创组腰痛VAS 评分和ODI评分均明显低于开放组(P<0.05)。术后6 个月、12 个月和末次随访时,两组患者腰痛VAS 评分和 ODI评分差异无统计学意义(P>0.05)。末次随访时所有病例均获得骨性融合。结论：微创经椎间孔入路手术治疗单节段腰骶椎结 核,可获得与传统后路手术相同的临床疗效,且手术时间短,术中出血量及术后引流量较少,具有较高的安全性。     

TNF-alpha，IFN-r，TGF-beta及IL-10 在骨关节结核中的表达及意义

目的:探讨转化生长因子(TGF-β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)及白介素-10(IL-10)在骨关节结核组织中的表达及其对骨质骨量的影响。方法:选择2012年6月-2014年6月我院收治的骨关节结核患者50例,应用免疫组化法检测患者结核中心病灶TGF-β、TNF-α、IFN-γ及IL-10的表达水平。结果:TNF-α、IFN-γ、TGF-β及IL-10在结核组织中呈不同程度的阳性表达(P<0.05)。TNF-α和IFN-γ在增生性病变中的表达高于干酪性病变,TGF-β和IL-10在干酪性病变中的表达高于增生性病变(P<0.05)。增生性病变中,IFN-γ在坏死性结核肉芽肿中的表达低于非坏死性肉芽肿(P<0.05),TNF-α、TGF-β及IL-10表达无明显差异(P>0.05)。干酪性病变中,TNF-α在非坏死性结核肉芽肿中的表达高于坏死性肉芽肿,TGF-β在坏死性结核肉芽肿中的表达高于非坏死性肉芽肿(P<0.05),IFN-γ和IL-10表达无明显差异(P>0.05)。与正常骨组织细胞数相比,增生性病变与干酪性病变组织的成骨细胞数低,破骨细胞数高(P<0.05)。结论:TGF-β、TNF-α、IFN-γ及IL-10在骨关节结核组织中存在不同程度的表达,对病情的发生发展及骨质骨量具有重要影响。     

IL-33在强直性脊柱炎患者外周血中的表达及意义

目的:探讨IL-33在强直性脊柱炎(AS)患者外周血中的表达水平及临床意义。方法:选择我院2013年12月至2014年8月收治的80例AS患者作为研究组,另选取同期在我院进行健康体检的80例作为对照组。检测两组患者外周血中IL-33的表达情况,记录研究组患者病情活动指数(BASDAI)、红细胞沉降率(ESR)及C-反应蛋白(CRP)水平,分析IL-33表达水平与BASDAI、ESR及CRP的相关性。结果:研究组患者血浆IL-33水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(t=6.15,P=0.025)。AS患者外周血IL-33水平与BASDAI和CRP具有显著正相关关系(r=0.432,0.525,P=0.034,0.029),而与ESR无显著相关性(r=0.175,P=0.214)。结论:AS患者外周血中IL-33呈高表达,说明其可能参与AS的发生及发展。     

手术时机对活动型胸椎结核伴截瘫临床疗效的影响

目的:探讨手术时机对活动型胸椎结核伴截瘫患者临床疗效的影响。方法:回顾性分析2009年至2013年我院收治的572例脊柱结核患者的临床资料,根据纳入标准选择活动型胸椎结核伴截瘫患者29例。依据截瘫症状发生至入院接受手术治疗时间进行分组,活动型结核伴截瘫分为发生截瘫后2周内(第Ⅰ组)、2周至4周(第Ⅱ组)、4周至7周(第Ⅲ组)手术组,评价和比较其手术前后的VAS评分、Cobb角以及最终Frankel分级的情况。结果:所有患者的切口均Ⅰ期愈合,平均骨性融合时间5.3个月。术后及末次随访各组VAS评分、Cobb角明显改善。活动型结核伴截瘫2周内、2至4周手术的患者神经功能恢复良好,24例(96%)神经功能恢复至Frankel分级D级或E级。截瘫发生后4周至7周(第Ⅲ组)手术亦有效。结论:以规范抗结核药物治疗为基础的胸椎结核伴截瘫,原则上应早期手术。病情复杂的活动型结核伴截瘫患者在合并症处理后手术的个体化治疗,亦可有效解除脊髓压迫,促进截瘫恢复,无须急诊手术。     

椎弓根内固定联合椎体间植骨融合术治疗退行性腰椎滑脱症的临床探讨

目的:探讨椎弓根内固定联合椎体间植骨融合术治疗退行性腰椎滑脱症的临床效果。方法:回顾性分析我院2012年3月至2014年3月收治的30例采用椎弓根内固定联合椎体间植骨融合术治疗的退行性腰椎滑脱症患者临床资料,观察患者对手术效果的满意度,并对症状进行JOA评分。比较患者术前术后的腰椎X线的影像学变化,观察术后临近节段的退变发生率与影像的融合率。结果:术后随访1-3年发现患者JOA评分的平均改善率为(73.81±16.12)%,术后滑脱率与椎间高度均有明显改善,与术前比较差异具有统计学意义(P0.05)。术后影像学显示植骨融合A级15例,B级12例,C级3例,融合优良率为90%。结论:椎弓根内固定联合椎体间植骨融合术对退行性腰椎滑脱症具有显著的临床效果,不仅可以缓解疼痛,改善功能评分,而且使患者影像学变化恢复正常生理形态,是理想的手术方法之一。