P-body及其与mRNA的转录后调节之间的关系

mRNA在真核生物基因表达的转录后调控中发挥着重要作用.然而最新研究发现,一种被命名为P-body胞浆复合体是mRNA转录后调控过程中的一个重要场所,在基因表达过程中起到了至关重要的调控作用.该复合体富含多种功能的蛋白,同时还有细胞因子与RNA等成分组成,其功能特征为参与mRNA降解、翻译抑制、mRNA监视以及RNA介导基因沉默等重要生命活动过程.研究发现,P-body是特化的细胞成分.本文详细阐述P-body的发现、结构特征以及与mRNA转录后调控的关系,使人们对P-body的生物学功能有更深入地了解和认识,另一方面将有助于更进一步深入探讨基因的表达调节机制..     

溶瘤腺病毒ZD55对类肝癌干细胞的抑制效应

溶瘤腺病毒能够靶向和杀死癌症干细胞,被认为是一种很有前景的抗癌药物.已有研究表明,溶瘤腺病毒ZD55能够靶向肝癌,并且表现出明显的细胞毒性效应.然而,其对肝癌干细胞是否具有同样地杀伤效力仍需进一步探讨.利用悬浮培养富集类肝癌干细胞,并验证其肝癌干细胞的特征.进一步通过MTT、结晶紫染色、Hoechst染色、Western blot和流式细胞术等检测ZD55对类肝癌干细胞的细胞存活率、凋亡诱导和病理效应等.结果发现,悬浮培养的类肝癌干细胞具有自我更新和分化能力、高表达干细胞相关转录因子(如NANOG和OCT4)、处于静息状态和具有耐药性等特性,溶瘤腺病毒处理后表现出明显的细胞毒性效应和杀伤特性,类肝癌干细胞的最低生存率仅为26.7%.ZD55能够非常明显地诱导类肝癌干细胞凋亡,其凋亡率最高达到60%.因此,ZD55可能会成为靶向肝癌干细胞的一种很有前景的治疗药物,对肝癌的临床治疗具有一定的应用价值.     

癌症靶向基因-病毒ZD55-XAF1抗肝癌移植瘤的生长及其安全性研究

目的:探讨溶瘤腺病毒(ZD55-gene)作为载体携带外源抗癌基因(XAF1)抗肝癌移植瘤的生长及其安全性。方法:抽提溶瘤腺病毒ZD55-XAF1的基因组DNA,PCR扩增鉴定病毒;细菌平板培养和支原体检测试剂盒检测细胞有无细菌、支原体污染;通过荷瘤小鼠动物实验,观察溶瘤腺病毒ZD55-XAF1对肝癌移植瘤生长的抑制、小鼠的临床反应指标、血清肝毒性指标、各脏器组织中的病毒残留分布及病理切片观察。结果:细胞培养过程无细菌和支原体污染;较对照组,受试小鼠血清肝酶AST活性上升(P0.05),而ALT和ALP活性基本无变化(P0.05);PCR检测各脏器均有病毒基因组DNA存在;HE染色显示受试小鼠各脏器具有不同程度的损伤,病毒处理对肿瘤细胞具有明显的杀伤效果,而受试小鼠的临床反应并无明显异常。结论:溶瘤腺病毒ZD55-XAF1能够抑制肿瘤生长,杀死肿瘤细胞,对小鼠血清肝酶活性影响较小而对各脏器有不同程度的轻微损伤,作为癌症基因治疗载体有潜在的应用价值但其安全性还有待提高。     

TRAIL耐药产生的机制及逆转耐药的最新策略

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor-related apoptosis inducing li-gand,TRAIL）是唯一能诱导癌细胞凋亡而对机体正常组织无明显损伤的内源性细胞因子,因而被认为是一种极具前景的抗癌药物。然而目前研究发现,许多恶性肿瘤细胞对TRAIL具有耐药性,使TRAIL在临床应用中遭遇瓶颈。越来越多的证据表明,一些关键信号通路可能与TRAIL耐药有关,且利用靶向基因治疗策略以及借助某些天然药物或小分子抑制剂能够部分恢复癌细胞对TRAIL的敏感性。该文主要描述了肿瘤细胞对TRAIL的耐药机制,并对如何有效克服和逆转TRAIL耐药的策略作了简要概括。     

可诱导慢病毒载体的优化策略及应用

以1型人免疫缺陷病毒(HIV-1)为基础构建的慢病毒载体具有可感染非分裂细胞、免疫反应小、携带的基因片段容量大和可整合进宿主基因组而长期表达等优点,因而成为最理想的基因转移载体之一。可诱导慢病毒载体介导的可诱导基因表达系统能够有效控制目的基因表达,扩大了慢病毒载体的临床应用潜能,成为很有前景的基因治疗载体。主要介绍带有四环素和其他几种诱导系统的可调控性慢病毒载体及其改进,以及可诱导慢病毒载体在RNA干扰中的应用。     

RNAa:一种新型的反标准ncRNA调控基因表达模式

RNA激活(RNA activation, RNAa)是目前最新发现的一种反标准非编码RNA(non-coding 牋RNA, ncRNA)调控模式, 它由双链RNA(double-stranded RNA, dsRNA)分子介导, 在转录水平激活目的基因表达.有别于传统的RNA调控方式, RNAa调控中既存在dsRNA与靶基因间的空间偶合作用, 又具有RNA干扰(RNA interference, RNAi)样的序列互补依赖性, 在保持较高特异性的前提下, 能够人为地选择多个靶位点实现目的基因激活.RNAa靶向于基因启动子的非CpG岛及 Alu区, 并受组蛋白H3的甲基化及乙酰化状态影响, 和RNAi的沉默效果相比, RNAa的激活作用更为持久, 为肿瘤、代谢及遗传性疾病的治疗提供了一个新的方法.现就RNAa的发现、作用机制以及应用前景进行了综述, 并比较了RNAa与传统ncRNA调控的联系与区别.     

人喉癌干细胞的培养鉴定及其增殖的抑制研究

喉癌发病率逐年上升,常规化疗药物如顺铂(cisplatin, DDP)和盐酸阿霉素(doxorubicin hydrochloride, DOX)在杀伤喉癌细胞、减少远处转移和提高患者生存率方面至关重要,但对肿瘤干细胞的杀伤效果欠佳。靶向性或选择性杀伤肿瘤干细胞,有望提高化放疗敏感性,减少癌症转移及复发。该文主要通过体外悬浮培养人喉癌干细胞(Hep2 sphere),运用qRT-PCR、Western blot等实验方法检测Hep2 sphere相关因子的表达、细胞周期和耐药性等数据。结果显示,其在一定程度上具备肿瘤干细胞样特征。克隆形成实验和细胞计数法检测得到的人喉癌干细胞增殖能力弱,多处于静息状态G0/G1期。q RT-PCR结果显示,在Hep2 sphere中CD44、ALDH、p-AKT、bcl2和p21表达显著上调, bax和AKT表达下调。Western blot也证实,在Hep2 sphere中bax和AKT蛋白表达下调, bcl2、p21蛋白表达显著上调。MTT实验检测表明,在不同化疗药物处理下, Hep2 sphere的细胞存活率明显高于Hep2;在腺病毒ZD55-Trail处理下, Hep2的细胞存活率则明显高于Hep2 sphere。研究证明,悬浮培养的人喉癌干细胞具有喉癌干细胞特性;腺病毒ZD55-Trail对人喉癌干细胞具有较强杀伤效果,对分化的喉癌细胞影响较弱, DDP、Dox和5-Fu则相反。     

基于溶瘤腺病毒抗肿瘤免疫治疗的前景与展望

机体免疫系统在抗肿瘤过程中有着巨大的潜力,但肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)的免疫抑制状态可引发一系列的肿瘤免疫逃逸反应,这将使得癌症进一步恶化。溶瘤腺病毒(oncolytic adenovirus,OAds)可通过选择性复制及其溶瘤作用杀伤肿瘤细胞,暴露肿瘤相关抗原,活化免疫细胞,逆转TME,最终可引发一系列抗肿瘤免疫反应。OAds存在靶向性低、免疫原性强等缺陷,其免疫治疗效果不佳,若对其改造则能提高肿瘤靶向性,降低免疫原性,同时携带免疫治疗基因,显著提高抑癌活性。该文综述了肿瘤免疫治疗的相关机制及OAds抗肿瘤免疫治疗的研究进展。