癌症靶向基因-病毒ZD55-XAF1抗肝癌移植瘤的生长及其安全性研究

目的:探讨溶瘤腺病毒(ZD55-gene)作为载体携带外源抗癌基因(XAF1)抗肝癌移植瘤的生长及其安全性。方法:抽提溶瘤腺病毒ZD55-XAF1的基因组DNA,PCR扩增鉴定病毒;细菌平板培养和支原体检测试剂盒检测细胞有无细菌、支原体污染;通过荷瘤小鼠动物实验,观察溶瘤腺病毒ZD55-XAF1对肝癌移植瘤生长的抑制、小鼠的临床反应指标、血清肝毒性指标、各脏器组织中的病毒残留分布及病理切片观察。结果:细胞培养过程无细菌和支原体污染;较对照组,受试小鼠血清肝酶AST活性上升(P0.05),而ALT和ALP活性基本无变化(P0.05);PCR检测各脏器均有病毒基因组DNA存在;HE染色显示受试小鼠各脏器具有不同程度的损伤,病毒处理对肿瘤细胞具有明显的杀伤效果,而受试小鼠的临床反应并无明显异常。结论:溶瘤腺病毒ZD55-XAF1能够抑制肿瘤生长,杀死肿瘤细胞,对小鼠血清肝酶活性影响较小而对各脏器有不同程度的轻微损伤,作为癌症基因治疗载体有潜在的应用价值但其安全性还有待提高。     

甲状腺乳头状癌合并桥本氏甲状腺炎的BRAF基因表达及侵袭性

目的:比较甲状腺乳头状癌合并桥本氏甲状腺炎与不合并桥本氏甲状腺炎的BRAFV600E基因表达以及侵袭性的区别。方法:2011年9月到2013年9月四川大学华西医院手术治疗并有BRAFV600E基因测定的甲状腺乳头状癌患者226名,均有病理证实。其中合并桥本氏甲状腺炎者50例为研究组,同期随机抽取50例不合并桥本氏甲状腺炎者作为对照组。比较两组性别、年龄、肿瘤大小、数量、BRAFV600E基因表达以及甲状腺外侵犯和淋巴结转移与侵袭性相关的因素的区别。结果:甲状腺乳头状癌合并桥本氏甲状腺炎在男女性别,发病年龄、肿瘤大小上和对照组相比无差异(P0.05);BRAFV600E突变率、甲状腺外侵犯和淋巴结转移都较对照组更低(P0.05)。BRAF基因突变阳性组甲状腺外侵犯和淋巴结转移率较BRAFV600E基因突变阴性组更高(P0.05)。结论:BRAFV600E基因突变的甲状腺乳头状癌患者有更高的甲状腺腺外侵犯和淋巴结转移。甲状腺乳头状癌合并桥本氏甲状腺炎较不合并桥本氏甲状腺炎有着更低的BRAFV600E突变率,更低的甲状腺外侵犯和淋巴结转移。     

颈部血管超声检查粥样斑块对预防缺血性脑梗死的意义

目的:探讨颈部血管超声检查粥样斑块对预防缺血性脑梗死的意义。方法:对我院2012年1月-2014年1月收治的40例缺血性脑梗死患者(观察组)进行回顾性分析,并同期选择来我院进行体检的正常志愿者40例(对照组),对两组患者实施颈部血管超声检查,并对比分析血清同型半胱氨酸(Hcy)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。结果:观察组颈部动脉软斑、扁平斑、溃疡斑检出率显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);两组硬斑检出率比较无统计学差异(P0.05)。观察组颈总动脉内径和颈内动脉颅外段内径显著窄于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。研究组治疗后恢复良好24例,恢复不良16例,恢复良好组治疗前颈动脉中层内膜厚度(IMT)显著低于恢复不良组(P0.05),且两组血清Hcy和hs-CRP比较无统计学差异(P0.05)。恢复良好组治疗后IMT、血清Hcy和hs-CRP显著低于恢复不良组(P0.05)。结论:颈部血管内的粥样斑块与缺血性脑梗死的发生有密切关系,定期对患者颈部血管的粥样斑块进行超声检查对预防缺血性脑梗死具有重要的意义。     

硫利达嗪对肝癌干细胞的杀伤作用研究

硫利达嗪(Thioridazine,THO)在临床上通常用于治疗精神类疾病;近年来,研究发现THO对肿瘤细胞具有杀伤效果,但其对肝癌干细胞的杀伤作用还未曾有报道。肿瘤干细胞在肿瘤的转移、复发及耐药性方面起着十分重要的作用。利用体外悬浮培养富集肿瘤干细胞并检测药物THO对其杀伤效果,并以此评价THO对肿瘤生长的体外抑制效应。通过检测体外悬浮培养肝癌干细胞在肿瘤干细胞相关因子表达、耐药性及细胞周期等方面因素,显示在一定程度上其具备肿瘤干细胞样特征,磷酸化STAT3、NANOG和XIAP表达显著上调,而Albumin表达下调;进一步运用MTT、Western blotting和细胞流式等实验验证了THO对肝癌干细胞具有较强的杀伤效果并能诱导caspase依赖的细胞凋亡,而对分化的肝癌细胞影响较弱;此外,THO和化疗药物盐酸阿霉素(DOX)的联合使用显著增强了其对肝癌干细胞和分化的肝癌细胞的杀伤作用。因此,该结果首次显示THO对肝癌干细胞具有较强的杀伤能力,可能为今后肝癌的临床治疗带来新的希望。     

盐酸阿霉素增强溶瘤腺病毒ZD55-TRAIL抑制肝癌细胞生长的研究

盐酸阿霉素(DOX)作为一种抗肿瘤抗生素,通过抑制癌细胞遗传物质的合成,对多种肿瘤均有杀伤作用,然而,其单独作用疗效有限,且加大剂量时其副作用较强。目前,携带抗癌基因的溶瘤腺病毒在肿瘤治疗中的作用日渐显现,溶瘤腺病毒ZD55-Trail联合DOX治疗肝癌的研究鲜有报道。通过MTT和结晶紫染色试验检测DOX药物处理对肝癌细胞系Bel-7404存活率的变化情况;Hoechst33342染色和流式细胞术检测肝癌细胞的凋亡;Western blot检测Trail蛋白和凋亡相关蛋白的表达;免疫荧光和流式细胞术检测凋亡相关受体表达的情况。结果显示,ZD55-Trail与DOX联合使用能够有效抑制肝癌细胞增长并诱导其凋亡,并且联合处理能增加Trail受体DR4和DR5的表达。初步探讨了DOX与ZD55-Trail两者协同诱导肝癌细胞凋亡的机制,为利用ZD55-Trail与DOX联合治疗肝癌提供依据。