塔里木胡杨林可培养胡杨内生细菌多样性与群落结构的时空演变格局

阐明塔河,Kiyik河,Ugan河这3条河胡杨内生细菌多样性及群落结构时空演变格局。2011年5月上旬与9月下旬从Kiyik,Ugan古河道和塔河主河道的6个采样位点采集24棵树的胡杨茎秆内存液样,用4种培养基分离纯化了588株胡杨内生细菌。16S r DNA序列分析表明,588株细菌分别属于6大类群:γ-变形菌纲(50.17%),厚壁菌门(34.58%),放线菌门(10.17%),α-变形菌纲(4.24%),拟杆菌门(0.50%),β-变形菌纲(0.34%),47个属,114种。其中有211株菌的16S r DNA相似率98.0%,它们分别属于19个属的41个物种,是胡杨林本源的潜在新菌种。假单胞菌属(29.76%)和芽孢杆菌属(19.05%)为优势属。与Pseudomonas xinjiangensis相聚类的潜在新种(74株,12.585%)是本源优势菌种。辛普森多样性指数显示,Kiyik河多样性指数为0.931,塔河为0.935;Ugan河最高,为0.969。香农-威纳均匀度指数表明,Ugan河的分布最均匀,均匀度指数为0.8570;塔河次之,为0.8314;Kiyik河最低,为0.7937。时空变化对比分析表明:整体上塔里木胡杨林内生菌群落结构的原生态状态保持较好,较少地遭受到外来优势菌群的侵染。其中,Kiyik古河道的内生菌群落结构保持原生态最好,很少受外来菌群的清洗与取代;Ugan河次之,内生菌群落结构发生了一定程度的变迁;塔河主河道细菌群落结构发生了较大程度的改变,被人类活动带来的外来常见优势菌群生态冲刷的趋势明显。     

过表达亚甲基四氢叶酸脱氢酶对高山被孢霉脂质合成的影响

高山被孢霉是一种富含多不饱和脂肪酸的丝状真菌,但其脂质过程中NADPH的来源还没有研究透彻。以高山被孢霉(尿嘧啶营养缺陷型)作为出发菌株,研究亚甲基四氢叶酸脱氢酶(MTHFD1)对高山被孢霉脂质合成的影响。首先构建了过表达载体pBIG2-ura5s-MTHFD1,采用根癌土壤杆菌介导转化真菌的方法,将二元表达载体转化进高山被孢霉CCFM501中,在筛选培养基SC-CS平板上进行筛选,进而得到稳定遗传MTHFD1基因的过表达菌株(MA-MTHFD1);其次提取MA-MTHFD1菌株基因组进行PCR鉴定,并结合qPCR分析结果,表明MTHFD1基因成功在高山被孢霉中实现了过量表达;最后通过对MA-MTHFD1中的脂肪酸含量、NADPH含量及NADPH合成途径中相关基因转录水平进行分析,研究MTHFD1基因过表达对脂质合成的影响。实验结果表明,过表达MTHFD1基因可以提高高山被孢霉脂质合成能力。与原养型高山被孢霉相比,MA-MTHFD1菌株中脂肪酸含量提高了40.13%,NADPH的含量提高了26.45%,而且NADPH合成途径中其他相关基因苹果酸酶(ME)和异柠檬酸脱氢酶(IDH)的转录水平也发生了上调。这一系列研究结果表明,在高山被孢霉脂质合成还原力形成中,MTHFD1基因起到了关键作用。这为解析高山被孢霉中NADPH来源及深入研究脂质合成机制,从而对其胞内脂肪酸代谢通路进行分子水平上的改建提供了一定的理论依据。     

益母草抗结核分枝杆菌成分的跟踪分离北大核心CSCD

结核病分为肺结核和肺外结核,其中子宫结核属于肺外结核,是造成不孕的主要原因。益母草是我国传统中药,常用于妇科疾病的治疗。在筛选中发现,益母草乙醇提取物具有抗结核分枝杆菌活性,经活性跟踪分离,从益母草乙酸乙酯萃取部位中分离得到具有抑制结核分枝杆菌的单体化合物1,鉴定为益母草碱,抗结核杆菌的MIC值为80μg/m L。这一发现为治疗子宫结核提供了新的线索。     

奥扎格雷钠联合依达拉奉治疗急性脑梗死的疗效观察

目的:观察奥扎格雷钠联合依达拉奉治疗急性脑梗死的临床疗效。方法:将160例急性脑梗死患者随机分为治疗组和对照组,每组各80例,治疗组采用注射用奥扎格雷钠联合依达拉奉治疗,对照组仅采用注射用奥扎格雷钠治疗,观察两组患者入院及治疗14d后临床疗效,神经功能缺损评分变化并进行对比分析。结果:治疗组的显效率为85.9%(67/78),对照组显效率为70.9%(56/79),两组显效率有显著性差异(x2=5.12,P=0.022),两组患者治疗14d后,神经功能的恢复情况与治疗前相比均有显著性差异(P<0.05),且治疗组与对照组治疗后比较有显著性差异,具有统计学意义(P<0.05)。结论:奥扎格雷钠联合依达拉奉治疗急性脑梗死较单独使用奥扎格雷钠疗效显著,是治疗急性脑梗死的有效方法。     

华癸中慢生根瘤菌7653R MCHK-3535基因在自生和与紫云英共生中的功能

【目的】探究Mesorhizobium huakuii 7653R MCHK-3535基因在共生固氮中的功能。【方法】构建MCHK-3535插入失活突变体、超表达和互补菌株,对其进行共生表型鉴定;并测定各菌株的生长曲线、运动性及生物膜形成;利用qRT-PCR方法和组织表达定位分析MCHK-3535在共生过程中的时空表达特征。【结果】与野生型7653R相比,突变体Δ3535达到稳定期的生物量增加,运动性下降,生物膜形成增加。此外,MCHK-3535基因的失活会显著提高紫云英固氮能力和植物地上部分鲜重,但不影响根瘤数量及重量;且互补菌株C3535能部分回补到野生型性状,超表达菌株OV3535均无显著性差异;qRT-PCR和启动子组织表达定位发现,MCHK-3535基因主要在根瘤的侵染区、过渡区及固氮区表达,并且表达持续整个固氮期。【结论】MCHK-3535基因在自生及与紫云英共生过程中发挥重要功能,参与根瘤的正常发育并负向调控固氮酶活性。     

应用“海燕”超轻型飞机防治森林害虫的效果及经济效益的评估

本文研究报道了“海燕”超轻型飞机同其它防治法防治森林害虫的防治教果、每公顷平均防治成本及投入产出比。结果表明,“海燕”超轻型飞机治虫具防治投入低、防治效果稳定良好等优点,有较高的防治实用价值,经济效益显著,是一种合理,经济、有效同时易被基层单位接受的防治手段。     

骆驼刺内生菌分离及代谢物活性成分分析

采用研磨法首次从新疆药用植物骆驼刺茎和叶等组织中分离得到20株内生菌并从中筛选出一株对作物致病菌的拮抗活性最强的内生菌XJAS-AB-11。通过形态学观察,生理生化特征以及16SrDNA序列分析最终将菌株XJAS-AB-11初步鉴定为枯草芽孢杆菌属(Bacillus sp.)。进一步对该拮抗菌株进行扩大培养,对其代谢产物进行初步研究,经硅胶柱色谱及TLC从具有抑菌作用的活性部位分离出活性单体C2和H2-2。紫外光谱、核磁共振氢谱及质谱分析证明化合物C2和H2-2均属于黄酮类化合物。研究表明,骆驼刺植物内生菌中蕴藏着较丰富的抗菌活性物质,是开发天然抗菌药物的潜在资源。     

一株蓝麻黄内生真菌XJEG-GF-82的筛选、鉴定及其抑菌活性研究

利用琼脂扩散法从蓝麻黄内生菌中筛选出对农作物致病菌和动物病原菌具有较强抑制活性的内生真菌XJEG-GF-82,其对对玉米小斑病菌、西瓜枯萎病菌的抑菌圈直径分别达18 mm和16 mm,对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别达19、25、27 mm。根据XJEG-GF-82的形态特征和D1 D2区基因序列特征将XJEG-GF-82最终鉴定为赭曲霉Aspergillus ochraceus。XJEG-GF-82代谢产物中检测出了生物碱和多糖,优化后XJEG-GF-82生成的多糖含量达160.233μg/mL。蓝麻黄内生真菌XJEG-GF-82给新型生物农药及天然药物的研发添加新的微生物资源。     

AO 微型钢板与克氏针固定在断指再植术中的临床应用比较

目的:比较AO微型钢板与克氏针内固定在断指再植术中的临床应用效果。方法:断指患者52例,其中26例(34指)断指采用AO微型钢板内固定治疗(观察组),另26例(37指)采用克氏针交叉固定治疗(对照组),术后均辅以功能康复训练。比较两组患者的手术时间、骨折愈合时间及断指功能恢复优良率。结果:观察组与对照组断指再植平均耗时分别为(83.5±10.2)min、(62.7±8.3)min(P<0.01),骨折愈合时间分别为(5.8±0.9)周、(8.4±1.7)周(P<0.01),断指功能恢复优良率分别为91.2%、62.2%(P<0.01)。结论:在断指再植术中应用AO微型钢板内固定与克氏针比较,虽手术耗时较长,但骨折愈合时间短,断指功能恢复优良,值得临床推广应用。     

齐墩果酸对APP/PS-1双转基因AD小鼠的神经保护作用研究

摘要 目的：研究齐墩果酸（Oleanolic Acid，OA）对APP/PS-1双转基因阿尔茨海默病（Alzheimer''s disease，AD）小鼠模型神经保护作用及机制。方法：选取6月龄APP/PS-1雄性小鼠21只，随机分为模型组（0.5% CMC-Na）、阳性组（多奈哌齐组，0.7 mg?kg^-1）、齐墩果酸组（10 mg?kg^-1）每组7只，6月龄同背景SPF级C57BL/6小鼠7只为对照组。灌胃8周之后通过Morris水迷宫实验观察小鼠学习记忆能力的改变，HE染色观察神经元细胞形态，ELISA检测血清中Aβ1-42含量；免疫组化检测Aβ_1-42、APP、Iba1蛋白表达情况；Western blot检测APP、Iba1蛋白表达水平。结果：（1）对照组，模型组，阳性组及齐墩果酸组进入有效区域次数分别为7.00±2.09，1.00±0.89，3.67±1.97，4.33±2.50，与模型组相比，对照组，阳性组，齐墩果酸组均有统计学意义（P<0.05）；（2）血清Aβ_1-42含量按上述顺序依次为4.98±0.25，2.50±0.66，4.63±0.73，4.36±0.97，与模型组相比，对照组，阳性组，齐墩果酸组均有统计学意义（P<0.05）；（3）免疫组化结果显示与模型组相比，对照组，阳性组，齐墩果酸组Aβ_1-42、APP、Iba1蛋白阳性细胞数减少；（4）WB结果：对照组，模型组，阳性组，齐墩果酸组APP蛋白相对表达量分别为0.52±0.17，1.38±0.35，0.89±0.25，0.93±0.27；这四组的IBA1蛋白相对表达量分别为0.98±0.34，1.79±0.74，1.06±0.61，0.88±0.49，与模型组相比，野生对照组，阳性组，齐墩果酸组APP、IBA1蛋白相对含量有统计学意义（P<0.05）。结论：齐墩果酸组可以改善APP/PS-1模型小鼠记忆力及认知功能，降低海马神经元的损伤，并通过下调Aβ_1-42、APP、Iba1蛋白的表达水平来发挥保护神经作用。