大熊猫遗传多样性评估的微卫星分型体系优化

微卫星作为重要的分子标记之一,已被证明在大熊猫种群规模评估、亲子鉴定和遗传多样性分析方面是有效的。目前微卫星标记在大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)染色体上物理定位方面的报道较少,而且缺乏微卫星基因分型系统的效能评估以及PCR扩增条件的优化。本研究基于大熊猫基因组参考序列(ASM200744v2),分析了34个大熊猫微卫星位点的染色体定位特征并评价了位点的应用价值。通过优化34个STR-PCR反应体系和扩增程序,结合微卫星的染色体定位数据确定了Ame-μ10标记的较低应用价值以及gpz-6重新筛选引物的必要性。本研究有助于提高基因分型结果的重复性和可靠性,对促进《大熊猫种群遗传档案建立技术规程》规范化应用和制定大熊猫保护策略具有重要意义。     

多模式磁共振指导超时间窗急性缺血性卒中的静脉溶栓治疗研究

目的:评价多模式磁共振指导下超时间窗静脉应用重组组织型纤溶酶原激活剂rt PA治疗急性缺血性卒中的疗效及安全性。方法:将68例急性脑梗塞患者分为rt PA静脉溶栓组A组、强化抗栓治疗组B组,各组按药物干预时间再分为4.5小时亚组及4.5-6小时亚组。A组给予rt PA静脉溶栓治疗和常规治疗,B组给予首剂氯吡格雷300毫克+阿司匹林100毫克和常规治疗。治疗前行急诊头多模式磁共振检查,治疗24小时后复查头CT,分别于治疗前后不同时间点进行NIHSS评分和3个月MRS评分,记录不良事件的发生情况。结果:A组两个亚组治疗后各时间点NIHSS评分均明显低于B组,且A组4.5小时亚组治疗后NIHSS评分低于其4.5-6小时亚组,A组3个月预后良好患者比例显著高于B组,差异均有统计学意义(P0.05)。A组症状性颅内出血的发生率高于B组。结论:多模式头磁共振指导下超时间窗rt PA静脉溶栓治疗安全有效,远期疗效优于强化抗栓治疗,但颅内症状性出血风险略高于强化抗栓治疗。     

烟草种间体细胞杂种及其后代的研究

通过原生质体融合方法,获得了普通烟草与黄花烟草的种间体细胞杂种植株。对体细胞杂种及其后代进行了形态学、细胞学及酶学研究。它们有许多显著不同于两个亲本的性状。例如花的颜色,叶、花及蒴果的形状,气孔的大小,染色体的数目,同功酶谱及花粉育性。实验证明,通过体细胞杂交,可以克服某些种间杂交的困难,可以作为育种工作的有效途径之一。     

结球甘蓝和青花菜小孢子胚植株再生

结球甘蓝（Brassica oleracea var.capitata）和青花菜（Brassica oleracea var.italica）小孢子胚再生植株频率低是目前影响游离小孢子培养技术有效应用的关键问题之一,研究其小孢子胚植株再生频率的影响因素,提高胚再生植株频率,对促进游离小孢子培养技术在甘蓝类蔬菜育种中更好地应用具有重要意义。该文以结球甘蓝中甘11和青花菜TI-111等基因型为试材,对影响游离小孢子胚再生成植株的固体培养基类型、琼脂浓度、胚的类型及胚在液体培养基中的滞留时间等因素进行了研究。结果表明：游离小孢子培养25天的子叶胚在琼脂浓度为1%–1.25%的B5培养基上植株再生频率最高。进一步通过8个不同基因型对上述实验结果进行了验证,结果显示,游离小孢子培养25天的子叶胚在1%琼脂浓度的B5培养基上植株再生频率达77.8%–97.2%。     

普通烟草与黄花烟草体细胞杂种的花粉粒、果实、种子及气孔的观察

长尾照义[97对有性杂交不易成功的普通烟 草(Nicotiana tabacum）粉红花品种和黄花烟草 (N. rustica）利用体细胞融合的方法,获得了 体细胞杂种。我们利用了普通烟草的红花品种 (Copes yusuhe及u No. 4）和黄花烟草的黄花烟 品种进行了体细胞融合,获得了体细胞杂种植 株^[1,2]。对这些植株的花型、花色、叶型等形态 学的特征和根尖染色体进行了观察,并作了过 氧化物酶和细胞色素氧化酶同功酶的酶谱分 析^[3],证明我们获得了真正的体细胞杂种。在 杂种植株开花、结实时,又对体细胞杂种株及 其亲本的花粉粒、果实、种子和气孔进行了观 察和比较,以期找到一种简便易行的鉴定方 法。     

酵母线粒体遗传

最近二、三十年来,细胞质遗传研究在酵母菌线粒 休遗传和高等植物细胞质雄性不育性遗传两个方面有 比较多的成就。遗传研究工作者常常以酵母菌和高等 植物为材料,从线粒体和叶绿体两大细胞器着手,深人 研究涉及真核生物细胞质遗传的诸多间题,逐步地充 实了遗传学的一门分支学科— 细胞质遗传学。本文 仅就酵母线粒体遗传作些介绍。     

中国姜花属基于SRAP分子标记的聚类分析

依据苞片是覆瓦状排列或是卷筒状排列而把姜花属Hedychium分为两个亚属的分类法近年颇受质疑.本文利用30对多态性好的随机引物,对中国姜花属的19种1变种共22份材料进行SRAP分子标记分析.其中最有效的28对引物共扩出152条带,当中135条为多态性带,占88.8%.平均每对4.8条,多态性条带里最多的为引物组合F13R1,达到13条.聚类分析表明:(1)中国姜花属植物可分为三个类群:第1群植株较矮小,主要分布于石灰岩地区;第Ⅱ群与第Ⅰ群每苞片均具2朵以上的小花,但植株较高大且基本上不分布于石灰岩地区;第Ⅲ群每苞片仅具1朵小花.此结果与Wood(2000)用ITS分析得出的结果基本一致.(2)支持吴德邻和Larsen(2000)把H. emeiense Z.Y Zhu归并为峨眉姜花H.flavescens Carey ex Roscoe的观点.(3)盘珠姜花H.panzhuum Z.Y Zhu与黄姜花H.flavum Roxb.是同一种植物,即盘珠姜花是黄姜花的晚出同名.(4)土壤基质可能是导致姜花属物种分化的重要因素.作者认为根据每苞片有花多少的特征,在系统学上可把姜花属分为两个类群:A类群,每苞片仅有1朵小花:B类群,每苞片有2朵以上的小花.     

使用SPE软件筛选绿尾虹雉微卫星引物及其在亲缘关系鉴定上的应用

圈养绿尾虹雉Lophophorus lhuysii多为一雄配多雌,但由于雄鸟更换,雌鸟产蛋期交错,且无特定产蛋位,导致亲子关系难以确认。本研究从绿尾虹雉基因组中广泛筛选微卫星位点,得到13对引物。采用微卫星PCR引物特异性鉴定程序（SPE）对引物序列进行评估,排除1例PCR产物长度相近的特殊多位点扩增。利用获得的12个微卫星标记在18份绿尾虹雉蛋壳/羽毛DNA样品中进行遗传多样性分析,同时以其中15份蛋壳样品（2018—2019年搜集）为检材,进行了亲缘（同胞）关系鉴定。结果表明,这12个微卫星标记可用于绿尾虹雉亲缘关系的鉴定,对提高小种群的维持能力,保持种群遗传多样性具有重要意义。     

烟草种间体细胞杂种的同工酶分析

在稍加修改的Kao^[7]方法的基础上使用培 养皿沉降法成功地进行了普通烟草（Nicotiana tabacum） 品种CY,和黄花烟草（N. rustica) 品种黄花原生质体的融合,并获得了种间体细 胞杂种植株^[1,2].     

青花菜两类雄性不育系花器官形态结构的比较

青花菜是一种重要的十字花科蔬菜作物,具有良好的抗癌功效。随着青花菜栽培面积的不断扩大和抗癌药物的开发,对青花菜种子的需求量也不断增加。利用雄性不育系生产青花菜F1杂交种子是其杂种优势利用的重要途径,但常用的细胞质雄性不育系在生产中存在前期死蕾较重、花蜜量少和种子产量不高等问题。本课题组用优良的青花菜自交系为父本,以甘蓝显性细胞核雄性不育材料79-399-3和细胞质不育材料OguraCMSR3629为不育源,通过回交转育的方法获得了多个青花菜显性细胞核雄性不育系和细胞质不育系,为了进一步有效利用其青花菜雄性不育系,寻求更好的不育源。本研究以青花菜高代自交系(保持系)8554、8590、93219及由其经多代回交转育而成的两类雄性不育系为试材,对其死蕾数、花器官形态和蜜蜂访花情况进行了比较研究。结果表明,在花蕾长、花蕾直径、单枝死蕾数、花冠直径、雄蕊长、花瓣长、花药长、蜜蜂访花次数、来访蜜蜂数及访花时间等方面,经相同自交系转育而成的显性细胞核雄性不育系(DGMS)与细胞质雄性不育系(CMS)间的差异有统计学意义,总体表现为DGMS优于CMS。