烟草种间体细胞杂种的同工酶分析

在稍加修改的Kao^[7]方法的基础上使用培 养皿沉降法成功地进行了普通烟草（Nicotiana tabacum） 品种CY,和黄花烟草（N. rustica) 品种黄花原生质体的融合,并获得了种间体细 胞杂种植株^[1,2].     

普通烟草和黄花烟草及体细胞杂种过氧化物酶同工酶等电聚焦电泳

日本学者长尾照义(1978)用原生质体融合获得普通烟草与黄花烟草的体细胞杂种植株。1980年陈家玉等在国内首先获得普通烟草(Copus Yeusuku No.4)和黄花烟草(Yellow Flower)的体细胞杂种植株。之后,中国农科院烟草所(1981)也得到相同的结果。陈家玉等(1983)对上述杂种进行了形态学、细胞学和同工酶的分析并取得一定的结果。Dlineee等(1975)分析比较了用等电聚焦技术分离的过氧     

利用原生质体融合获得普通烟草与黄花烟草种间体细胞杂种植株

我们在高国楠方法的基础上,进一步改良。 使用培养皿沉降法,使人工有性杂交很少成功 的普通烟草（Nicotiana. tabacum）和黄花烟草 (N. rustica）的原生质体融合成功。融合处理后 共得到四十三株再生植株。目前（b月23日） 已开花的有7株。其中两株与“亲本”之一普通 烟草品种CYNo.4 (Copus Yeusuheku No.4）的株 型、叶型、花型、花色无差别。推测可能是没有 产生融合的普通烟草CY No. 4的原生质体再生 植株。另外一株从株型、叶型、花型均相似于普 通烟草CY No. 4,但是花色为粉红。估计可能是 普通烟草和黄花烟草两个种的原生质体发生了 部分融合的结果。其余四株,从株型、叶型、花型、花色都介于两“亲本”之间。黄花烟草的叶 型为卵圆型,有叶柄。普通烟草为长卵圆型,有 叶托无叶柄,而这四株的叶型虽近似黄花烟草, 但无叶柄也无叶托,而且叶缘也不整齐（图1)o 从花型来看也是两“亲本”的中间型：花冠小 于普通烟草而大于黄花烟草（图2)。普通烟草 CYNo.4的花色为深红色,黄花烟草为黄绿色。 而这四株花色为淡紫色。明显地与“两亲”本不 同。推测这四株是普通烟草（N. tabacum）和黄 花烟草（N. rustica)的种间体细胞杂种。 过氧化物酶同功酶的初步鉴定,支持了上 述看法。进一步的观察和研究正在进行中。     

植物叶绿体的摄取

遗传工程的研究方法和技术,随着现代分子遗传学的迅速发展也在不断创新^[5]。其中细胞器移植的研究,一直受到国内外遗传学工作者的重视^[8,11,12]。植物细胞比原核细胞或动物细胞在遗传操作方面具有无与伦比的潜力。去了细胞壁的球形原生质休再生成一完整植株,并诱导进行种内及种间融合产生的体细胞杂种,使育种家、遗传学家超越了有性过程的局限性,扩大了遗传重组范围,同时也为摄取细胞器、外源细胞核及核酸大分子创造了有利条件^[6,14,17]     

基因型对玉米花药和盾片离体诱导频率的影响

近年来随着玉米细胞和组织培养研究的进 展,已开始着手在细胞和组织水平上改良玉米。 Green等^[5]诱导玉米盾片愈伤组织首次获得体 细胞再生植株。Gengenbach等^[6]从诱导的体细 胞组织筛选获得抗大斑病的玉米品系。中国科 学院遗传研究所^[1][2]获得玉米花粉植株自 交结实,为快速培育玉米自交系开创了道路。吴 甲林等^[3]、陈力等[4]通过花粉培养获得优良自交 系而开始组配杂交种。这些报道均提到诱导及 诱导频率高低与基因型有关。用花药培养易于 和不易于诱导的玉米杂交种能否诱导出体细胞 再生植株？它们二者有无关系。本文报道这方 面的试验初步结果。     

离体培养的玉米花药及花粉植株后代过氧化物酶同工酶的分析

近年来,同工酶技术在生物学研究中已得 到广泛的重视与应用^[8,9,11,12]。一些研究表明, 同工酶可以用于预测杂种优势^[3,4]、筛选抗病品 种^[2]鉴定远缘杂交种和花药培养获得的花粉 植株^[10]。我们对玉米不同材料、未培养与培养 的花药以及花粉植株后代的过氧化物酶同工酶 的表现进行了研究,以便探明过氧化物酶同工 酶在不同材料上的差异;在培养过程中酶的变 化以及与花粉植株后代的遗传学表现之间的关 系。本文将报道上述实验结果。     

马铃薯叶肉细胞再生植株研究初报

早在五十年代,人们就以消除病毒为目的 进行马铃薯茎尖培养。六十年代,花药培养技 术应用于作物育种,七十年代Y. Irikura等从野 生马铃薯花药获得（2,一12）单倍体植株^[7] J. F. Shapard, R. E. Totter等人通过马铃薯叶 肉细胞原生质体培养获得了再生植株^[8], P.Γ。 БyTeJKO , A. A. KyИKO。最近报道栽培马铃薯和 野生种叶肉细胞原生质体融合〔^[9]。我国黑龙江 克山农科所报道了马铃薯茎尖培养种薯^[2],最 近甘肃省农科院王玉娟等人获得栽培马铃薯花 药再生植株^[1],关于叶肉细胞培养再生植株的 研究尚未见报道。     

烟草属花粉—叶肉原生质体的融合及杂种植株再生

用饥饿预处理分离烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ Ｌ．）品系Ｎ３６４ Ｋｍ ＋ 二核早中期的花粉原生质体,用ＰＥＧ－高钙高ｐＨ 法诱导其与黄花烟草（Ｎ．ｒｕｓｔｉｃａ Ｌ．）叶肉原生质体融合。通过抗性筛选再生的４ 株小植株,经过氧化物酶同工酶、根尖染色体计数鉴定均为配子－体细胞三倍体杂种。未经筛选处理再生的２１株小植株,经鉴定有６ 株为配子－体细胞杂种。     

融合系统pH值对杂交细胞集落形成率的影响

在发现用灭活的仙台病毒为媒介可获得能 传代的杂交体细胞以后,体细胞杂交就成为细 胞生物学、遗传学、发育生物学、肿瘤学和病毒 学等领域一个很有用的研究手段,它被广泛地 应用于体细胞种内或种间遗传物质的转移、基 因定位、基因表达过程中的核质关系、细胞重 组、真核细胞基因的调节以及单克隆抗体等研 究。多年来,对于那些可能影响细胞融合率及 杂交细胞形成的物理、化学和生物因素,例如, 病毒本身的质量^[1]、改变两亲本细胞的比例或 融合前两亲本细胞的混合培养^[3.8]、融合过程的 温度^[4.15]、加人植物凝集素^[1.4]等,均已有过报道。     

烟草种间体细胞杂种及其后代的研究

通过原生质体融合方法,获得了普通烟草与黄花烟草的种间体细胞杂种植株。对体细胞杂种及其后代进行了形态学、细胞学及酶学研究。它们有许多显著不同于两个亲本的性状。例如花的颜色,叶、花及蒴果的形状,气孔的大小,染色体的数目,同功酶谱及花粉育性。实验证明,通过体细胞杂交,可以克服某些种间杂交的困难,可以作为育种工作的有效途径之一。     

绒毛剥皮贴片原位培养法

我们自1973年首次报告吸取绒毛诊断早 孕胎儿性别后^[1,2],近年来国内外应用绒毛作产 前诊断有了很大进展^[3-14]。取绒毛方法方面：有 Hahnemann (1969, 1974）宫腔镜下钳取法^[4,5], 我们的吸管负压抽吸法,及Rhine (1975）宫腔 冲洗法^[10]。经实践证明,以抽吸法较好^[9,12,13] Old (1982）又在负压抽吸基础上加超声显相 胎盘定位,取材更为准确[9]。绒毛培养方法大 致有两种：一是将绒毛剪碎后原位培养;一是 经胰酶处理制成混悬液培养^[8],但效果都不理 想。本文报告在综合国内外绒毛培养经验的基 础上自行设计的一种新的接种方法,即：将绒 毛经胰酶处理后用玻片对合推压,使绒毛表层 不能再分裂增殖的合体细胞层与其下层分离, 暴露出能分裂增殖的朗罕氏细胞层,以利生长。     

木本植物花药培养的进展

近十年来,已从木本植物的8个科、9个属、约23 个种中获得了单倍体植株,它们是：茄科的滨黎叶拘祀 (Lycium halimifolzum Mill.)^[33],宁夏拘祀(L. barbarum L.)t'3拘祀(L. chinense Mill.)^[2]。杨柳科的 黑杨（Populus nigra L. )[33,小叶杨X黑杨（P. simonit Carr. X P. nigra L.),大青杨（P. ussuriensis Komar. )^[32],加拿大白杨X香杨（P. canadensis Moench X P. koreana Rehd.),哈青杨X钻天杨(P. harbinensis Wang et Skv. X P. pyramidalis Roz.)^[4],银白杨X小 叶杨（P. albs L. X P. simonii Carr.)^[5],中东杨（P. berolinensis Dipp. ),中东杨X钻夭杨(P. berolinensis Dipp. X P. pyramidalis Roz. ),小青杨（P. pseudo-simonii Kitagawa.)^[6],小青杨X钻天杨（P. pseudo-stmonzi Kitagawa. X P. pyramidalis Roz.)^[5],小叶杨（P. simonii Carr.) M,胡杨（P. euphratica Oliv. )^[7][8]。芸香科的权 壳（Poncirus trifolata (L.) Raf.)^[25], 柑桔（Citrus microcarpa Bge.)^[9] 葡萄科的葡萄(Vitis vinifera L.)^[10]蔷薇科苹果属的揪子（Malus pruni f olia (Wi- 11d.) Borkh.)^[11]以及苹果（Malus pumilea Mill.)^[12]。七叶树科的欧洲七叶树（Aesculus hippocastanum L.)^[30] 无患子科的荔枝（Litchi chinensis Sonn.)^[13]。此外,在 我国已从杉木花药培养获得小植株^[14],油茶也已从花 药愈伤组织分化出绿芽点^[15]。     

卡那霉素链霉菌亚硝基胍诱变育种

亚硝基肌(NTG）是一种高效的诱变剂,对 细菌^[1,3,4]、酵母菌^[5]、、黑曲霉^[2]、、天蓝色链霉菌^[6]、 等的诱变效果显著。为了提高卡那霉素生产菌 种的发酵单位,我们研究了在pH6的条件下,不 同缓冲液、NTG不同浓度和不同处理时间对卡 那霉素链霉菌的杀菌率和效价变异频率的影 响,找到了最适诱变条件,先后筛选到两株高产 突变株K-102和K-41,并已用于生产。     

玉米花药培养自交系杂交组合的产量比较试验

利用花药培养产生单倍休植株的方法,是 培育玉米自交系的一条新途径,它一开始就引 起了国内外玉米育种工作者的普遍注意。我国 自1975年首次成功地诱导出玉米花粉植株以 来^[1],已先后有不少单位获得玉米自交系果穗, 并已开始做配合力的测定和产量比较试验^[2,3].     

椪柑营养诊断的DRIS初步标准

自1973年Beaufils提出综合诊断施肥法(Diagnosis and Recommendation Integrated System,简称DRIS)^[1]后,Sumner等人相继制订了大豆^[2]、玉米^[3]、甘蔗^[4]、马铃薯^[5]和小麦^[6]等农作物的DRIS标准,并在生产中获得了广泛的应用。但在柑桔生产中,直到1984年Beverly等人才建立伏令夏橙的DRIS标准^[7]。而对椪柑的DRIS标准则至今尚未见报道。本文根据庄伊美等报道的福建省24个高产(亩产2000-5000公斤)椪柑园的资料^[8],试图制订椪柑的DRIS初步标准,以供生产上应用之参考。     

大肠杆菌的β-半乳糖普酶高产菌株的组建

目前酶免疫测定法已成为医学及免疫学研究领域中一种新的重要测试手段^[7]。常用来作为酶标的酶主要有碱性磷酸醋酶^[3],辣根过氧化物酶β-半乳糖昔酶^[6]。     

八倍体小黑麦的醋酶同工酶

在小黑麦的醋酶同工酶研究中,一些报道 指出,六倍体小黑麦的胚乳产生5条快速移动 带,带1, 2和3来自小麦,带5来自黑麦,带4 是杂种带;小麦和黑麦胚乳样品机械混合物的 酶谱中,只有1.2、3和带5^[367]。在比较六倍 体小黑麦（AABBRR）和某些八倍体小黑麦 (AABBDDRR）时,我们看到在两者的醋酶同工 酶酶谱中都有上述E,区5条标志带^[3]。同时, 我们也发现,有一些八倍体小黑麦表现出另外 一种类型的酶谱,对这种酶谱还未见报道。对 于八倍体小黑麦的遗传育种,鲍文奎等曾进行 过许多研究^[12]。为了研究八倍体小黑麦醋酶同 工酶的特点,我们对中国农业科学院作物研究 所提供的14个八倍体小黑麦进行了醋酶同工 酶的电泳分析,     

烟草试管

几德明等闭曾用嫁接方法获得茄子品种间 无忆绮扮种,Car'.son[61首次用原生质体融合方法 获得粉蓝烟草与郎氏烟草种间体细胞杂种。我 们试rw一种简易获得体细胞杂种（即无性杂种） 方法,即将不同品种烟草茎段进行无菌操作嫁 接,然后取嫁接愈合具有两种组织的茎段离体 培养再生植株,从中获得了具有两亲本特性的 无忆杂种再生植株。我们暂称此方法为“植物 试管无性杂交”。     

甘薯同一不亲和群内品种间体细胞杂种

利用PEG融合方法,融合甘薯(Ipomoea batatas ) B不亲和群内品种‘koganesengan’和‘bitambi’的原生质体。将融合处理的原生质体进行培养,共获得45株再生植株。4株再生植株形态上表现出融合双亲的中间特性,其中2株染色体数为融合两亲之和（2n = 12x (2n + 2n) = 180）,另外2株分别为41～103和35～100,因细胞不同而不同。经RAPD分析,这4株再生植株分别具有双亲特异的DNA扩增带或双亲都不具有的新扩增带。鉴定这4株再生植株为杂交不亲和的B群内品种间体细胞杂种。     

粉兰烟草原生质体再生植株

原生质体培养成再生植株是植物休细胞杂 交的关键环节。烟草是原生质体培养和体细胞 杂交的常用材料。烟草属的几个种已能成功地 由原生质体培养成再生植株。野生的粉兰烟草 (N. glazsca)由于具有染色体数目（2n一24）比 普通烟草（2n=48）少的优点,并已成功地被 用车体细胞杂交的亲木之一^[3,4]。本文介绍粉兰 烟草从原生质体游离到植株再生的实验结果。