生物素生物合成的研究

综述了大肠杆菌、球形芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌中生物素生物合成操纵元基因的结构、转录和表达、基因的特点和作用,以及实验室条件下生物素操纵元的表达情况,并对宿主菌的生长抑制现象作了概述。     

透明颤菌vgb基因在产核黄素B.subtilis中的整合表达研究

目的:将透明颤菌血红蛋白vgb基因应用于核黄素的工业化生产。方法:以枯草芽孢杆菌整合载体pAmyE构建了vgb基因的整合表达载体pAudV,采用化学转化法将vgb基因整合到枯草芽孢杆菌GJ08的染色体上,并通过发酵摇瓶实验检测核黄素的产量。结果:得到产核黄素枯草芽孢杆菌GJ09,摇瓶试验结果表明,在限氧条件下核黄素的产量分别提高了5.23%和3.42%。结论:透明颤菌血红蛋白vgb基因能够促进核黄素产量的提高,可以应用于核黄素的工业化生产中。     

柴达木山羊群体遗传结构及系统地位的研究

采用简单随机抽样法对柴达木山羊群体进行了遗传检测,从毛色、外型特征、体尺、血液蛋白与DNA多态性等5个方面进行了群体遗传结构分析,并探索了其系统地位。结果表明：(1)毛色和形态特征的平均表型异质度分别为0.3419、0.5207;(2)血液蛋白在6个基因座上具有多态性,平均基因座杂合度为0.2584;(3)DNA-RAPD标记表现丰富的多样性,基因多样度为0.4085～0.5318。通过对柴达木山羊与其他国内山羊的系统聚类,初步探索了该山羊群体的形成及所属,这些都表明柴达木山羊是一个比较古老的未经较高强度选育的地方山羊品种,其基因资源是我国山羊遗传资源中宝贵的一部分。Abstract: Genetic structure and character of Chaidamu Goats were studied through simple random sampling. Genetic structure was analysed from five aspects, and phylogeny status was also investigated. The results indicated that: (1) the average phenotypic heterogeneity degree of coat color and morphological character were 0.3419 and 0.5207,respectively; (2) polymorphous blood albumen existed in 6 loci and the average loci heterozygosity was 0.2584; and (3) polymorphism existed in marked genes by DND-RAPD with diversity of 0.4085～0.5318. Phylogeny status was investigated through clustering by Ward’s method on Chaidamu Goats and other domestic goats. All these indicated that Chaidamu Goats was a domestic goat with less intensively selected breed.     

枯草芽孢杆菌核黄素操纵子rib operon的克隆与表达

目的:构建产核黄素的枯草芽孢杆菌基因工程菌.方法:以穿梭载体pEB03构建核黄素操纵子的表达质粒载体pGJB13和pGJB14,与质粒pMX45分别转化产核黄素的枯草芽孢杆菌GJ07,并通过发酵摇瓶实验检测核黄素的产量.结果:得到产核黄素的工程菌GJ13 、GJ14和GJ08,在以蔗糖为碳源的发酵条件下,GJ08可产核黄素820mg/L,提高了约55%.结论:得到了产核黄素的高产菌种G J08.     

大肠杆菌、枯草杆菌穿梭表达载体的构建及改造

将大肠杆菌的复制子rep和多克隆位点克隆到枯草杆菌质粒pGDV1的骨架上,即得到大肠杆菌枯草杆菌牙梭庾粒载俸pGDVM。在pGDVM上进行载体表达元件的构建,先后将P59启动子、核糖体结合位点SD和终止子克隆到pGDVM上得到穿梭表达载体GJ01。以β-半乳糖苷酶基因（bga）作为报告基因检测载体的表达活性,在大肠杆菌和枯草杆菌中β-半乳糖苷酶（Bga）酶活性最高达到75.3和83．2个密勒单位,表明所构建的表达载体具有较强的表达能力。以核糖体结合位点（SD、SD3、SD4和SD5）代替表达载体GJ01-bga中的SD,对载体进行改造。所构建的GJD2-bga在大肠杆菌中的最大酶活性为253．8个密勒单位,G]D5-bga在枯草杆菌中的最大酶活性为135．4个密勒单位,表明所构建的载体具有较强的表达活性。由此可以得出不同的SD序列及其与起始密码子的距离不同程度地影响mRNA的翻译效率。     

柴达木山羊群体遗传结构及系统地位的研究

采用简单随机抽样法对柴达木山羊群体进行了遗传检测,从毛色、外型特征、体尺、血液蛋白与DNA多态性等5个方面进行了群体遗传结构分析,并探索了其系统地位.结果表明:(1)毛色和形态特征的平均表型异质度分别为0.3419、0.5207;(2)血液蛋白在6个基因座上具有多态性,平均基因座杂合度为0.2584;(3)DNA-RAPD标记表现丰富的多样性,基因多样度为0.4085～0.5318.通过对柴达木山羊与国内其他山羊的系统聚类,初步探索了该山羊群体的形成及所属,这些都表明柴达木山羊是一个比较古老的未经较高强度选育的地方山羊品种,其基因资源是我国山羊遗传资源中宝贵的一部分.