湖北海棠实生树童区与成年区基因组DNA的RAPD研究

本试验以具无融合生殖特性的１４年生湖北海棠实生树为试材,对其童区和成年区的叶片基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析。结果显示：从１５０个引物中由Ｐ７０１从童区叶片基因组ＤＮＡ中扩增出１个约２．１ｋｂ的片段,成年区基因组ＤＮＡ中未能扩增出该片段。文中对阶段转变的机理及基因组ＤＮＡ多态性的原因作了讨论。     

湖北海棠阶段转变过程中几种同工酶变化研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,研究了湖北海棠1年生实生苗(S1)、4年生(S4)、14年生(S14)实生树及4年生成年芽嫁接树(G4)不同高度叶片的过氧化物酶(POX)、细胞色素氧化酶(COD)、酯酶(EST)、乙醇脱氢酶(ADH)同工酶的变化。结果表明：多年生实生树随着高度的增加,POX Rf 0.56、060,COD Rf 0.50,EST Rf 0.09、015、075、077,ADH Rf 0.76等几条酶带呈现差异,出现了童区和成年区各自特有的同工酶带,随高度变化童区特征酶带消失或成年区特征酶带出现的高度均保持在150～200 cm之间,同当年植株开花最低位置相同,S4、S14童区与S1同工酶谱带完全一致,S4、S14成年区与G4 同工酶谱基本保持一致,G4同工酶谱并未随高度增加而发生变化。四种同工酶可以作为阶段转变的指标。S4、S14童区与成年区谱带的差异是高度的结果,高度是湖北海棠阶段转变的重要因子。     

花发育阶段以及温度对不同品种甜樱桃柱头可授性的影响

以‘布鲁克斯’、‘美早’、‘红蜜’等5个甜樱桃(Prunus avium)品种为试材,检测不同品种甜樱桃花期不同发育阶段的柱头可授性;并利用人工气候箱模拟花期低温(2 ℃/10 ℃)、常温(6 ℃/18 ℃)、高温(12 ℃/24 ℃)以及超高温(12 ℃/24 ℃/30 ℃)环境,研究不同温度处理对甜樱桃柱头可授性的影响。结果表明：(1)‘美早’、‘先锋’和‘萨米脱’适宜的授粉温度是常温(6 ℃/18 ℃)环境,‘红蜜’适宜的授粉温度是高温(12 ℃/24 ℃)环境,‘布鲁克斯’适宜授粉的温度范围更广,在常温(6 ℃/18 ℃)和高温(12 ℃/24 ℃)环境条件下其柱头均具有较高的活性。(2)‘红蜜’柱头对花期低温(2 ℃/10 ℃)和超高温(12 ℃/24 ℃/30 ℃)的抗性较强;‘布鲁克斯’和‘萨米脱’柱头对花期超高温(12 ℃/24 ℃/30 ℃)抗性较差;‘美早’柱头对花期低温(6 ℃/10 ℃)的抗性较强,但对花期高温(12 ℃/24 ℃)的抗性较差;‘先锋’柱头对花期低温(6 ℃/10 ℃)和超高温(12 ℃/24 ℃/30 ℃)均无明显抗性。研究认为,低温(2 ℃/10 ℃)对甜樱桃柱头可授性的影响主要在开花之后,而超高温(12 ℃/24 ℃/30 ℃)对整个开花过程柱头可授性的影响都很大。     

根域限制对葡萄根中IAA含量及其代谢相关基因表达的影响

以1年生“玫瑰香”葡萄为试验材料,进行根域限制栽培处理,以传统地栽为对照,研究根域限制对葡萄根系构型、细胞结构、IAA含量及其代谢和根系生长发育相关基因表达丰度的影响,以探讨根域限制栽培影响葡萄根系构型变化的内在机制。结果表明:(1)根域限制处理后,葡萄根系构型发生显著变化,主要表现在根尖处出现大量集群根、不定根持续发生、根系出现螺旋卷曲;根系细胞排列更加疏松,幼根根尖的根冠区更厚,细胞更大、更长;毛细根的内皮层细胞加厚,中柱鞘和皮层细胞更大。(2)根域限制处理显著降低了葡萄根中IAA的含量;在葡萄定植后40、100和205 d时,根系IAA合成关键基因VvYUC6和VvYUC8的表达量变化趋势与IAA含量变化趋势一致,同时根域限制处理诱导IAA合成相关基因VvTAR2、VvYUC2和VvYUC4的表达水平在大部分采样时期显著上调;在定植后70、85、130和205 d时,根域限制导致VvAUX1、VvLAX1等8个IAA运输相关基因的表达水平显著上调,这与根域限制下根系大量发生的时期相吻合。(3)根域限制条件下,葡萄细胞周期调控相关基因VvcycA1、VvcycB1、VvcycD3和Vvcdc2在8月中旬到11月初呈上调表达趋势。研究表明,根域限制下葡萄根系构型、细胞结构以及内源IAA均发生显著变化;根域限制可能通过改变根系中生长素合成和极性运输相关基因的表达丰度,从而影响根系中生长素的合成和运输,进而改变葡萄的根系构型以适应根域限制的栽培环境。     

砧木类型对甜樱桃花芽多胺代谢相关基因表达和休眠的影响

为验证砧木类型对甜樱桃多胺代谢和花芽休眠的影响,该研究以嫁接于不同砧木——矮化砧木‘吉塞拉6号’[Gisela 6,(G6)]和乔化砧木‘马扎德’(Mazzard)的甜樱桃品种‘罗亚理’为试材,通过田间观察确定嫁接于两种砧木的‘罗亚理’休眠期和花期,利用生物信息学、基因克隆、实时荧光定量、亚细胞定位和双分子荧光互补等手段,对甜樱桃花芽内多胺代谢中关键基因[多胺氧化酶基因(PavPAOs)和精氨酸脱羧酶基因(PavADC)]进行克隆和功能分析,对可能与PavADC存在互作关系的蛋白进行预测和验证,并利用高效液相色谱法对花芽内游离多胺的含量进行测定。结果表明:(1)‘Mazzard-罗亚理’的休眠期(75 d)长于‘G6-罗亚理’(69 d),且初花期晚于‘G6-罗亚理’。(2)‘G6-罗亚理’花芽内游离多胺含量高于‘Mazzard-罗亚理’,其中Put含量高1.2%~163.4%,Spd含量高8.8%~261.1%,Spm仅在1月和3月的‘G6-罗亚理’花芽中检测到。(3)成功克隆获得甜樱桃多胺代谢关键基因PavPAO2、PavPAO4、PavPAO5和PavADC,其长度分别为1485、1611、1704和2307 bp;系统进化分析表明,甜樱桃PavPAOs和PavADC均与桃、扁桃和苹果等物种的亲缘关系较近;亚细胞定位显示,PavPAO2和PavPAO4定位在细胞膜,而PavPAO5和PavADC则定位在细胞核。(4)qRT-PCR分析显示,休眠期间‘G6-罗亚理’花芽中PavPAO5的表达量低于‘Mazzard-罗亚理’,而PavADC的表达量高于‘Mazzard-罗亚理’;在整个休眠期,PavPAO2和PavPAO4的表达量整体水平远远低于PavPAO5,推测PavPAO5可能是在休眠期起主导作用的家族成员。(5)BiFC验证结果表明,在多胺代谢过程中PavADC与PavSAMDC存在互作关系,推测两者相互作用参与调控花芽内多胺水平。研究认为,甜樱桃砧木类型能够通过影响多胺代谢进程而影响休眠以及开花的进程,关键基因PavPAOs和PavADC的高表达能够影响花芽内多胺水平,PavADC能够使多胺含量升高从而促进休眠解除以及提早开花;多胺代谢过程中关键基因的表达和多胺含量变化能够影响休眠和花期,多胺含量的升高能够促进休眠解除以及提早开花。     

纤维素酶与生物抛光技术

纤维素酶与生物抛光技术张才喜（浙江省农业大学园艺系,杭州３１００２９）纤维素酶是一种能分解植物中纤维素的糖蛋白,其分子呈球形或椭圆形,分子量在３０—７０ＫＤ之间。将纤维素酶应用于工业上已经产生了巨大的经济和社会效益。工业上应用的纤维素酶主要有两类：细...     

转基因蔬菜与食用疫苗

利用ＤＮＡ重组技术将目的基因转入蔬菜中,培育成的蔬菜称为转基因蔬菜,它主要是用来选育具有特殊优良性状的（如抗虫、抗病、抗除草剂等）蔬菜新品种。食用疫苗是一种医用疫苗,目前,为了提高生产能力及安全使用疫苗,科学家利用基因工程技术以细菌、酵母、昆虫及哺乳...     

湖北海棠阶段转变过程中几种同工酶变化研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法、研究了湖北海棠1年生实生菌（S1）、4年生（S4）、14年生（S14）实生树及4年生成年芽嫁接树（G4）不同高度叶片的过氧化物酶（POX）、细胞色素氧化酶（COD）、酯酶（EST）、乙醇脱氢酶（ADH）同工酶的变化。结果表明：多年生实生树随着高度的增加,POX Rf 0.56、0.60,COD Rf0.50,EST Rf0.09、0.15、0.75、0.77,ADH Rf0.76等几条酶带呈现,邮童区和成年区各自特有的同工酶带,随高度童区特征酶带消失或成年区特征酶带的高度均保持在150－200cm之间,同当年植株开花最低位置相同,S4、S14童区与S1同工酶谱带完全一致,S4、S14成年区与G4同工酶谱基本保持一致,G4同工酶谱并未随高度增加而发生变化,四种同工酶可以作为阶段转变的指标。S4、S14童区与成年区谱带的差异是高度的结果,高度是湖北海棠阶段转变的重要因子。     

湖北海棠阶段转变的生理基础

植物的营养状况对于控制阶段转变有特别重要的意义。Ｍｕｒｒｙ指出糖在诱导ＤＦＲ童年基因表达上具有促进作用[1 ] 。Ｓｎｏｗｂａｌｌ在马叙葡萄柚中发现成年植株的蛋白在单干实生树上随着向顶端的靠近 ,其含量增加[2 ] 。Ｓａｎｃｈｅｚ发现英国长春藤富含脯氨酸的糖蛋白基因ＨＷ10 3在成年叶柄 (其生根能力显著低于童年叶柄 )中大量表达[3] 。对于核酸含量的研究存在较大争议[4～ 6 ] 。对于实生树及成年芽嫁接树不同高度的生理指标变化未见系统报道 ,作者以无融合生殖的湖北海棠〔Ｍａｌｕｓｈｕｐｅｈｅｎｓｉｓ (Ｐａｎｌｐ .)Ｒｅｈ…