重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子包涵体提取、复性和纯化的研究

由基因工程大肠杆菌表达的重组人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）以包涵体的形式存在于细胞中,通过破菌、洗涤获得包涵体,再经过溶解、凝胶过滤、复性、疏水和离子交换柱导析得到了均一的产品,经高压液相和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳测定纯度均大于９８％,ｒｈＧＭ－ＣＳＦ的比活为３．２×１０＾７ＩＵ／ｍｇ,纯化获得的ｒｈＧＭ－ＣＳＦ为一酸性蛋白,等电点约为５．２,ＮＨ２－末端有２０个氨基酸序列测定结果     

在开花和性别分化过程中瓠瓜植株中内源雌酮的变化

根据吸收光谱和薄层层析分离后显色斑点的 R f值及荧光颜色,在雌雄同株的瓠瓜植株中鉴定出了甾类性激素雌酮。雌酮的含量随瓠瓜植株的发育进程而变化。在具有2—3片真叶的幼苗中未发现雌酮。当幼苗长至4—6片真叶时,已开始出现雌酮,但含量极少。在已现蕾开花的具有11—13片真叶的植株中,雌酮含量明显增加。这表明甾类性激素雌酮与瓠瓜的开花过程密切相关。瓠瓜幼苗经150ppm CEPA 处理后发生“雌性化”,在这种已现出雌花蕾的具有11—13片真叶的植株中,鉴定出了雌酮;瓠瓜幼苗经40ppm GA_3处理后发生“雄性化”,在这种已现雄花蕾的具有11—13片真叶的植株中也鉴定出了雌酮。     

蓝莓离体叶片胚状体高效发生及其组织学观察

以高灌蓝莓试管苗叶片为外植体、以改良WPM为基本培养基,研究了外源激素TDZ、ZT及其组合对离体叶片胚状体发生的影响,同时也探讨了蔗糖浓度、水解酪蛋白、椰汁等对胚状体发生、丛芽形成的影响.结果表明:不同浓度的外源激素TDZ、ZT及其组合对胚状体的发生频率、丛芽的形成和生长起重要作用;蔗糖浓度对胚状体的发生及丛芽的生长影响较大,而添加有机质则对胚状体的发生及丛芽的生长没有明显影响.适合高灌蓝莓叶片胚状体发生及成苗的培养基为WPM TDZ 0.04 mg/L ZT 0.25～2.0 mg/L 蔗糖20～40 g/L,而培养基WPM ZT 0.5～1.0 mg/L 蔗糖20 g/L适合于丛芽继代生长.组织学观察表明,蓝莓叶片胚状体发生主要起源于叶上表皮细胞和部分叶肉细胞,可能为多细胞起源,历经多细胞原胚、原球胚、梨形胚、心形胚、子叶胚等发育阶段,并能直接发育成苗.     

人基因工程r—干扰素发酵过程的研究

分析大肠杆菌K802(pLY—4)生产人r—干扰素的发酵过程后发现,采用丰富培养基(改良LB+M9),既适合于细菌生长,又适合于r—干扰索的表达。采用逐步升温、控制不同发酵阶段的pH及保持高的溶解氧浓度,可提高重组质粒的稳定性和细胞的生长速率,使r—干扰素的表达量达4．0 X 106IU／ml,表达水平约占菌体蛋白的55％。     

重组人α8型干扰素的纯化与鉴定

采用酵母表达载体进行重组人α８型干扰素（ＨｕＩＦＮα８）的表达,该表达菌株可将重组α８型干扰素分泌进入培养基中,回收培养基进行纯化,然后利用超滤浓缩,先过Ｓ．ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ柱,再进行ＤＥＡＥ-ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ层析和Ｇ-２５脱盐,最后用高效液相ＨＰＬＣ,ＳＤＳ-ＰＡＧＥ丙烯酰胺凝胶电泳及肽图等方法对纯化产品进行鉴定。采用以上两步纯化方法纯化酵母分泌表达的重组人α８型干扰素纯度可达９５％以上,其比活性为３.０×１０^８ｕ／ｍｇ。     

巨桉与5种木本植物幼树的耗水特性及水分利用效率的比较

巨桉因生长迅速且经济效益高,在我国南方被广泛用于营造短周期工业原料林,但其蒸腾耗水状况与其他常见或乡土树种存在怎样的差异,大面积种植是否会改变栽培区原有的水分平衡,是一个尚未明确的问题。利用LI-6400光合作用仪测定了巨桉与其他5种木本植物在不同光强、温度、湿度下的净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)和水分利用效率(WUE),用称重法测定了参试植物载叶量、生物量和耗水量,并对这些树种的蒸腾耗水特性进行了评价。结果表明:(1)相同环境条件下,巨桉的Tr最大,WUE最低,单位质量耗水量最多,单株蒸腾耗水量远高于其他树种,其明显较大的叶面积可能是重要原因之一,虽然其Pn仅次于杨树,生物量积累最大,因此为高光合、高蒸腾、低水分利用效率植物。(2)阔叶树种的Pn和Tr明显高于针叶树种,而WUE低于针叶树种。(3)环境因子(光照强度、温度和湿度)对植物Pn、Tr和WUE的影响较大,其中Pn主要受光照强度影响,Tr对湿度最为敏感,一般情况下WUE随湿度的增大而升高。在试验设置的温度范围(24—32℃)内,光合作用变化幅度不大。光照强度800μmol.m-.2s-1和温度28℃最有利于参试植物的光合作用。(4)巨桉等速生树种较强的光合作用使其生长迅速,固碳潜力大,但其高蒸腾和低水分利用效率的特点意味着在栽培区替代原有植被进行大规模造林时,可能会消耗更多的水资源而对生态环境造成一定的不利影响,因此在发展巨桉人工林时应选择水分条件好的区域(尤其是年降雨量充沛且季节间分配相对均匀的地区),并进行科学的经营管理。     

绿豆淀粉胶电泳在同功酶研究中的应用——关于淀粉胶电泳方法的改进

淀粉胶电泳是一种以淀粉凝胶作为介质的电泳方法。这种方法自1955年由Smithies首创以来,已普遍用于蛋白质化学的研究,特别是在同功酶的研究中使用较多。淀粉胶电泳的主要优点在于它的系统简便和无毒性。淀粉凝胶中葡萄糖残基所构成的三维网状结构虽不如聚丙烯酰胺凝胶那样均匀一     

全球转基因作物种植状况及其分析

转基因植物近年来得到迅猛发展,影响日渐扩大。对近几年,尤其是2004年的全球转基因作物种植状况、未来的发展潜力及问题进行了较为系统的介绍和分析,结合我国的情况,对我国发展转基因作物的重点提出了相应的建议,认为应该重点发展优质、高产、抗逆转基因新品种。     

腹腔镜与开腹肝部分切除术治疗肝癌的疗效比较及对外周血单核细胞Wntβ-catenin信号通路的影响

摘要 目的：观察腹腔镜与开腹肝部分切除术治疗肝癌的疗效及对外周血单核细胞Wntβ-catenin信号通路的影响。方法：回顾性分析2020年2月~2021年11月期间在盐城市第一人民医院接受治疗的104例肝癌患者的临床资料。据各自施行的手术方式分为开腹组和腹腔组,例数分别为51例和53例。对比开腹组、腹腔组的围术期指标、血清肿瘤标志物[甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）和糖类抗原199（CA199）]、外周血单核细胞Wntβ-catenin信号通路相关指标,观察两组患者并发症总发生率。结果：腹腔组的首次进食时间、住院时间短于开腹组,术中出血量少于开腹组,手术时间长于开腹组（P<0.05）。两组术后7 d血清AFP、CEA、CA199水平较术前下降（P<0.05）。两组术前、术后7 d外周血单核细胞Wnt、Tcf-4、β-catenin 信使RNA（mRNA）表达量,组间对比无统计学差异（P>0.05）。两组术后7 d外周血单核细胞Wnt、Tcf-4、β-catenin 表达量较术前下降（P<0.05）。腹腔组的并发症总发生率低于开腹组（P<0.05）。结论：腹腔镜与开腹肝部分切除术治疗肝癌均可有效降低血清肿瘤标志物水平,抑制外周血单核细胞Wntβ-catenin信号通路活化,但腹腔镜在减轻手术创伤、促进患者术后恢复、降低并发症发生率中更具优势。