衣原体和淋球菌检测技术

从理论和应用方面介绍衣原体和淋球菌的各种检测技术,比较了各种检测技术的优缺点以及检测的敏感性、特异性,并展望了今后的应用前景。     

b-根瘤菌及特殊a-根瘤菌的研究概况

隶属于b-变形杆菌纲（proteobacteria）的根瘤菌,人们简称为b-根瘤菌。本文通过对分离自含羞草根瘤隶属于Burkhloderia 和Cupriavidus的b-根瘤菌及归于Blastobacter、Ochrobactrum和Phyllobacterium等特殊a-根瘤菌的研究总结,介绍了根瘤菌生物多样性研究的新进展。同时,简述了根瘤菌共生基因的进化研究,并对该研究领域存在的问题进行了分析,对未来相关研究方向做了展望。     

根瘤菌的系统发育及其分类研究进展

根瘤菌与豆科植物这一共生体系的突出特点是固氮量大,抗逆能力强和为人畜提高高蛋白质营养,在农业生产及固氮生态系统中占重要地位,对根瘤菌系统发育研究作一概述并描述了1997年后正式发表的根瘤菌新属种。     

Dectin-1及相关细胞因子在足菌肿皮损中的表达

目的观察Dectin-1在真菌性足菌肿皮损中的表达,初步分析其在足菌肿发病中的作用。方法实验分为3组,A组8例足菌肿病例,B组为10例着色芽生菌病病例,A组和B组统称为感染组,C组为18例正常皮肤组织。应用免疫组化法检测3组病例的组织蜡块中Dectin-1、IL-4,IL-10,IFN-γ,TNF-α的表达。结果与正常组相比,感染组皮肤的Dectin-1、IL-4、IFN-γ、TNF-α、IL-10的积分光密度增高(P0.05)。A组与B组相比,两组间Dectin-1、IL-4、IFN-γ,TNF-α的积分光密度值比较无差异(P0.05)。结论真菌感染皮损中Dectin-1的表达上调,可能说明Dectin-1在足菌肿发病中具有一定作用。     

中国对虾中肠的超微结构与细胞化学研究

(1)在透射电镜下观察中国对虾 (PenaeuschinensisOsbeck)中肠肠壁的超微结构。结果显示 :中国对虾中肠肠壁由内向外依次为上皮细胞层、结缔组织层、肌层和结缔组织层四层结构。中肠上皮有明、暗两种细胞 ,以暗细胞占多数 ,两种上皮细胞都具有从肠腔吸收营养物质和向结缔组织中转运营养物质的功能。 (2 )运用酶细胞化学技术 ,显示中肠组织细胞中的酸性磷酸酶 (ACP)和酚氧化酶 (PO)活性 ,电镜观察显示 :ACP阳性反应出现在明细胞顶部的圆形小泡和明、暗两种细胞的溶酶体中 ,暗细胞顶部聚集着大量ACP阴性反应的酶原颗粒 ,酶原颗粒主要由暗细胞合成并分泌。PO颗粒出现在患病虾肠壁结缔组织内解体的颗粒细胞上和游离于结缔组织中。结缔组织除具有维持上皮细胞的形态、贮存营养物质的功能 ,还在对虾免疫反应中发挥作用     

细胞松弛素B对鲍受精卵超微结构的影响

细胞松弛素B（CB）作为一种微丝解聚剂,可用于诱导贝类三倍体,但由于其毒副作用导致了受精卵死亡和发育异常。通过透射电镜观察比较了皱纹盘鲍（Haliotis discus hannai)正常受精卵与CB处理后的受精卵亚显微结构的变化,结果显示,CB对线粒体等细胞器的破坏,造成了受精卵的代谢缺陷,是导致鲍受精卵孵化率低的原因之一。     

一串红天然色素及其稳定性研究

以新疆地产一串红（Salvia splendens Ker-Gawl)的花为实验材料,从光、温度、pH值、还原介质、氧化介质、防腐剂、金属离子等影响因子方向对色素的稳定性进行了初步研究。结果表明：该色素属于花青苷类色素;对光、温度等比较稳定;可在偏酸或中性介质中使用;耐还原性和耐氧化性较差;蔗糖、防腐剂以及大多数金属离子对色素的稳定性无不良影响,但Fe^3 、Pb^2＋和Sn^2 对色素的稳定性有一定影响。     

β-根瘤菌及特殊α-根瘤菌的研究概况

隶属于β-变形杆菌纲(proteobacteria)的根瘤菌,人们简称为β-根瘤菌.本文通过对分离自含羞草根瘤隶属于Burkhloderia和Cupriavidus的β-根瘤菌及归于Blastobacter、Ochrobactrum和Phyllobacterium等特殊α-根瘤菌的研究总结,介绍了根瘤菌生物多样性研究的新进展.同时,简述了根瘤菌共生基因的进化研究,并对该研究领域存在的问题进行了分析,对未来相关研究方向做了展望.     

基于葡萄糖脉冲的同位素稀释质谱检测法标品制备

同位素稀释质谱检测法(IDMS)是目前进行胞内代谢物浓度高通量检测精度最高的一种方法,这个方法的关键就是制备待检测代谢物对应的~(13)C全标记的标品。传统制备~(13)C全标记标品的方法是采用批培养的模式获取,但该方法所制备的胞内代谢物浓度通常较低。通过以~(13)C全位标记葡萄糖作为唯一碳源培养毕赤酵母G/DSEL菌种,采用~(13)C全位标记葡萄糖脉冲刺激法,结合快速取样淬灭方法的新方法,成功制备了带~(13)C标记标品并提高了其浓度。经液质联用(LC-MS)与气质联用(GC-MS)结果分析,与传统制备方法相比,胞内大部分有机酸、磷酸糖、氨基酸和核苷酸类物质的浓度实现了约2–10倍的提高。因此底物脉冲法可以有效提高~(13)C全标葡萄糖的单位利用率,并能实现对胞内部分含量低于仪器检测限的代谢物的检测。     

HIV-1整合酶基因合成与其在大肠杆菌中的高效表达

目的:通过人工合成HIV-1整合酶(integrase,IN)基因的编码序列,提高目的蛋白的表达.方法:根据IN的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏好的密码子,设计并合成了877碱基,共编码288个氨基酸,克隆入pMD18-T载体,经测序证实后,构建原核表达载体pET-His-p31,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果:酶切及测序结果表明表达载体构建成功,工程菌诱导表达后的电泳图谱在相对分子质量为32kDa的位置出现明显目的蛋白条带,表达产物主要以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的65.9%,Western blot结果表明表达的聚合酶蛋白能与HIV-1阳性血清发生特异性反应.结论:已获得高效表达工程菌pET-His-p31,为下一步研究HIV诊断试剂奠定基础.