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| HIV-1整合酶基因合成与其在大肠杆菌中的高效表达 | |
| 引用本文： | 赵喜红,何小维,李文美,王继华,杨连生,彭运平,刘晓云.HIV-1整合酶基因合成与其在大肠杆菌中的高效表达[J].现代生物医学进展,2009,9(21). |
| 作者姓名： | 赵喜红 何小维 李文美 王继华 杨连生 彭运平 刘晓云 |
| 作者单位： | 1. 华南理工大学轻工与食品学院,广东,广州,510640 2. 华南理工大学轻工与食品学院,广东,广州,510640;广州万孚生物技术有限公司,广东,广州,510640 3. 广州万孚生物技术有限公司,广东,广州,510640 |
| 基金项目： | 广东省部产学研结合项目,国家科技部火炬计划项目,广州市开发区科技计划项目 |
| 摘 要： | 目的:通过人工合成HIV-1整合酶(integrase,IN)基因的编码序列,提高目的蛋白的表达.方法:根据IN的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏好的密码子,设计并合成了877碱基,共编码288个氨基酸,克隆入pMD18-T载体,经测序证实后,构建原核表达载体pET-His-p31,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果:酶切及测序结果表明表达载体构建成功,工程菌诱导表达后的电泳图谱在相对分子质量为32kDa的位置出现明显目的蛋白条带,表达产物主要以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的65.9%,Western blot结果表明表达的聚合酶蛋白能与HIV-1阳性血清发生特异性反应.结论:已获得高效表达工程菌pET-His-p31,为下一步研究HIV诊断试剂奠定基础. |
| 关 键 词： | 人类免疫性缺陷病毒 聚合酶 基因合成 高效表达 |
Synthesis of HIV-1 Integrase Gene and Its High Level Expression in Escherichia coli |
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| ZHAO Xi-hong,HE Xiao-wei,LI Wen-mei,WANG Ji-hua,YANG Lian-sheng,PENG Yun-ping,LIU Xiao-yun.Synthesis of HIV-1 Integrase Gene and Its High Level Expression in Escherichia coli[J].Progress in Modern Biomedicine,2009,9(21). | |
| Authors: | ZHAO Xi-hong HE Xiao-wei LI Wen-mei WANG Ji-hua YANG Lian-sheng PENG Yun-ping LIU Xiao-yun |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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