产低温碱性蛋白酶海洋适冷菌SY的筛选

从连云港海域、港口、远洋捕捞船及鱼市等地采集的海水和各类海鱼、贝类等样品中分离到217株产蛋白酶的细菌,并从中得到1株产低温碱性蛋白酶的海洋适冷细菌—SY。研究表明,该菌株最适生长温度和最适产酶温度均在15℃左右,0℃下仍可生长;具有一定的耐盐性和嗜盐性,无盐条件不能生长,在3%的NaCl盐浓度时,生长达到最高峰;最适生长和最适产酶pH均为8.0;SY菌所产的蛋白酶可能为一种丝氨酸蛋白酶,酶最适作用温度为50℃,最适作用pH为9.0;酶的热稳定性差,50℃保温20min,酶活下降40%。     

离体筛选抗枯萎病辣椒新种质

以2个辣椒(Capsicum annuum L.)自交系子叶诱导产生的愈伤组织为材料,辣椒枯萎菌粗毒素为选择剂,筛选抗枯萎病辣椒新种质.结果表明,枯萎菌粗毒素对辣椒子叶愈伤组织诱导、生长及不定芽分化具有明显的抑制作用,且随着粗毒素浓度的增加,抑制作用增强;在枯萎菌粗毒素质量浓度为0.60 g·L-1条件下,筛选、鉴定并获得了抗枯萎病辣椒体细胞变异无性系,且成功再生抗性植株.从而证明,离体筛选抗枯萎病辣椒新种质的方法是可行的.     

Gateway(R)技术构建交链孢菌JH505 cDNA文库

Gateway○R技术构建cDNA文库,利用λ噬菌体的位点特异性重组,避免使用限制性内酶切割cDNA,能够解决常规方法构建cDNA文库的技术缺陷。首次应用Gateway○R技术构建交链孢菌cDNA文库,经检测cDNA入门文库的滴度达到1×107cfumL,文库总容量为9×107cfu,平均插入片段为1510bp。通过LR重组把入门文库转换为表达文库,表达文库的滴度为1.58×106cfu/mL,文库总容量为6.32×106cfu,平均插入片段大小为1680bp。表达文库的构建为进一步克隆植物激活蛋白基因打下了基础。     

辣椒ML基因植物表达载体的构建及其转化

为分析辣椒ML基因在抗辣椒疫病方面的作用,构建了ML基因的植物表达载体pBI121-ML,采用快速冻融法将表达载体导入农杆菌EHA105,并用农杆菌介导法转化辣椒感病品种B12,对得到的转化植株经PCR和RT-PCR分子检测,结果显示,获得了4个辣椒转基因株系.     

辣椒雄性不育材料H9A小孢子败育机理

运用光学、电子显微技术及生化指标测定法, 对辣椒（Capsicum annuum）雄性不育材料H9A及其保持系H9B小孢子不同发育时期进行细胞形态学观察及生化特性分析。结果表明, 雄性不育材料H9A的小孢子败育发生在单核前期, 由于绒毡层细胞极度膨胀, 四分体受挤压后破裂并降解, 无法形成正常的单核花粉粒, 属于孢子体败育。不育材料花蕾中的过氧化物酶活性从四分体时期开始明显高于保持系, 保持系游离脯氨酸含量从单核小孢子期开始明显高于不育材料; 不育材料小孢子发育各时期的可溶性蛋白含量都明显低于保持系, 但丙二醛含量均高于保持系。     

农作物花粉高温胁迫研究进展

高温现已成为农作物生产不可忽视的环境因素,而花粉是农作物对高温最敏感的器官.本文从细胞学、生理学和分子生物学等方面对近年来国内外有关农作物花粉高温胁迫的研究进行了综述,以期为保持农作物在高温胁迫下的高生产力提供思路.高温对农作物花粉的细胞学影响表现在绒毡层粗糙型内质网排列方式改变、药隔维管束鞘细胞形状异常、花粉管高尔基体小泡产生减少等方面;生理学影响表现在Ca²⁺动态平衡无法及时恢复、生长调节物质含量改变以及糖代谢减慢等方面;分子生物学影响表现在热激蛋白诱导表达不足和其他花粉功能基因表达被抑制等方面.     

甲氨蝶呤联合艾得辛可降低RA患者血清中IL-37及PD-1的水平

分析甲氨蝶呤联合艾得辛治疗对类风湿关节炎患者血清IL-37及PD-1水平的影响。选择2015年4月至2017年3月本院接诊的100例类风湿关节炎患者作为研究对象,按随机数字表法分组,每组50例,观察组患者采用甲氨蝶呤与艾得辛联合治疗,对照组患者单独采用甲氨蝶呤治疗,比较两组患者血清中细胞因子IL-6、IL-18和IL-18BP的表达,探讨IL-37、PD-1的临床意义。观察组患者的血清IL-18(63.23±7.89) pg/mL、IL-6 (3.25±0.98) pg/mL、IL-18BP (210.56±24.51) pg/mL表达水平显著低于对照组患者的血清IL-18 (140.67±18.65) pg/m L、IL-6 (8.27±1.23) pg/mL、IL-18BP (308.89±30.67) pg/mL表达水平;观察组患者的血清IL-37 (23.65±4.28) pg/m L及PD-1 (19.58±3.78) ng/mL表达水平显著低于对照组患者的血清IL-37 (58.98±5.29) pg/mL及PD-1 (36.72±4.62) ng/mL表达水平,差异具有统计学意义(p0.05),相关性分析发现,血清IL-37与细胞因子IL-18、IL-6和IL-18BP均呈正相关;但是PD-1仅与细胞因子IL-6呈正相关,按照RA评分标准,患者血清中IL-37与诊断评分呈正相关,PD-1与诊断评分呈正相关。甲氨蝶呤联合艾得辛治疗类风湿关节炎具有较为明确的疗效,能够短期内控制RA患者疾病的发展,临床的表现稳定,有效降低患者的血清IL-18、IL-6、IL-18BP以及IL-37、PD-1的表达水平,对患者的积极意义较大,可在临床的治疗中推广应用。     

辣椒雄性不育材料小孢子发生的细胞形态学观察

用石蜡切片技术,在光学显微镜下观察了辣椒雄性不育材料1A及其保持系1B的小孢子发育过程和各时期的形态特征.结果表明,雄性不育材料1A的小孢子败育发生在四分体至单核花粉粒时期,此时绒毡层细胞异常肥大,四分体受到挤压后破裂并降解,无法形成正常的单核花粉粒.扫描电镜观察结果表明,保持系1B的花粉粒结构完整,表面有3个明显的萌发沟;而雄性不育材料1A的成熟花粉粒形状不规则,空瘪,有部分花粉粒解体,败育比较彻底,说明该雄性不育材料在辣椒育种工作中有较高的利用价值.     

9个辣椒雄性不育材料花蕾生理生化特性研究

以9个辣椒雄性不育材料及其相应的保持系为试材,对有关花器的植物学性状进行了系统观察和研究,测定了花蕾中过氧化物酶、过氧化氢酶、多酚氧化酶的活性和游离脯氨酸的含量。结果表明:供试9个雄性不育材料和保持系的主要花器性状有一定差异;雄性不育材料的过氧化物酶活性和多酚氧化酶活性均高于相应的保持系, 而过氧化氢酶活性低于保持系;保持系游离脯氨酸含量离于不育材料;所测的3种酶活性和脯氨酸含量在雄性不育材料与保持系间差异显著。     

Gateway技术构建交链孢菌JH505 cDNA文库

Gateway(R)技术构建Cdna文库,利用λ噬菌体的位点特异性重组,避免使用限制性内酶切割Cdna,能够解决常规方法构建Cdna文库的技术缺陷.首次应用Gateway(R)技术构建交链孢菌Cdna文库,经检测Cdna入门文库的滴度达到1×107cfu/Ml,文库总容量为9×107cfu,平均插入片段为1510bp.通过LR重组把入门文库转换为表达文库,表达文库的滴度为1.58×106cfu/Ml,文库总容量为6.32×106cfu,平均插入片段大小为1680bp.表达文库的构建为进一步克隆植物激活蛋白基因打下了基础.