缺氧诱导因子(HIFs)在肾癌发生中的作用及其分子机制

肾癌是一种常见的泌尿系统肿瘤,但在临床上对转移性肾癌的治疗手段还非常有限。缺氧是实体肿瘤微环境的一个重要的基本特征。近年来基于分子机制和临床研究的数据表明,低氧诱导因子(hypoxia-inducible factors, HIFs)在肾细胞癌(renal cell carcinoma, RCC)的发生发展中发挥着至关重要的作用。HIF是一类介导细胞适应低氧状况必需的转录激活因子,由α亚基和β亚基组成。研究已经证实,在RCC中HIF-1α和HIF-2α具有相反的作用,前者作为肿瘤抑制因子,而后者作为癌基因发挥功能。本文综述了HIF信号通路在RCC发生发展中的作用及其分子机制,并对靶向HIF信号通路治疗RCC的进行了探讨,以期指导临床肾细胞癌的精准化治疗和进一步的研究。     

中药毒性评价的技术方法与应用

中药的安全性近年来受到了广泛的关注和重视,但是相应的理论和实验研究还不够充分。中药的毒性是中药安全性的关键问题之一,参照国际惯例和西方植物药研究的标准规范,依据中医药理论,应用现代新技术新方法,结合基础研究的成果,制定相应的评价体系和研究规范,是解决这个关键问题的可行思路。对近年来课题组按照上述研究思路开展的有关中药毒性评价的技术方法与应用研究的结果进行了概述,希望能为中药毒性的评价方法和技术指导原则提供理论基础,也可为雷公藤等典型中毒中药的毒性研究提供研究示范,推动中药毒性研究的发展。     

遵义医学院器官移植实验室学科团队简介

遵义医学院器官移植实验室建立于2006年,六年来一直致力于以小动物各种器官移植为基础、以器官移植免疫排斥及缺血再灌注损伤与细胞信号传导关系为方向的实验性研究。实验室在学校的大力支持下已颇具规模,拥有各种大型相关实验设备及完善的配套设施。目前研究团队中拥有正高职称人员三名、副高二名,拥有博士学位人员三名。多人主持及完成多项     

pcDNA3.1（＋）-LYVE-1真核表达质粒的构建及其在COS-7细胞中的表达

目的 构建人淋巴管内皮细胞特异标志物LYVE-1融合基因表达质粒,观察其在COS-7细胞中的表达,为进一步探讨该标志物在肿瘤淋巴转移中的作用提供工具.方法 从本院结肠癌根治术患者术所取组织中的淋巴结抽提总RNA,RT-PCR扩增LYVE-1基因片段,并将其插入pMD19-T Simple Vector进行测序,鉴定正确后构建pcDNA3.1（＋）-LYVE-1并转染COS-7细胞,RT-PCR、Western印迹检测目的 蛋白表达,间接免疫荧光检测该基因表达在COS-7细胞上.结果 成功获取了人淋巴管内皮细胞特异标志物LYVE-1全长cDNA,构建了其真核表达载体pcDNA3.1（＋）-LYVE-1,转染COS-7细胞后检测出目的 蛋白的表达,并且证明该基因表达在细胞上.结论 成功构建了pcDNA3.1（＋）-LYVE-1重组质粒,为进一步研究LYVE-1在肿瘤淋巴管转移中的功能提供了重要的实验材料.     

VHL基因的研究进展及其在肾癌基因治疗中的应用

VHL基因是抑癌基因,定位于染色体3p25-26,其产物pVHL与Wnt-β-catenin信号通路、缺氧诱导因子、氧化磷酸化的调控有关。VHL基因的失活会导致VHL蛋白不能正常合成,这与散发性肾透明细胞癌的发生、发展有着密切的关系。VHL基因的失活机制主要包括基因突变,杂合性缺失和甲基化。通过对VHL基因失活机制的研究有助于筛选用于肾透明细胞癌早期诊断与预后的新分子标志物。目前利用VHL基因开展了肾癌基因治疗的试验探索。     

硬膜外导管在大鼠肾移植血管吻合中的应用

目的建立一种手术难度低,成功率高的大鼠肾移植模型。方法 Wistar大鼠作供体,SD大鼠作受体,将供体腔静脉与受体肾静脉端端吻合,供体腹主动脉与受体腹主动脉端侧吻合,供体膀胱瓣与受体膀胱吻合。根据血管吻合时应用硬膜外导管与否,将受体分为有支架组和无支架组两组。结果有支架组共进行肾移植30次,成活26只;无支架组共进行肾移植20次,成活10只。有支架组的成活率86.7%（26/30）较无支架组50.0%（10/20）明显提高（P〈0.05）,血管吻合总时间（22±2）min较无支架组（32±2）min明显缩短（P〈0.05）。结论硬膜外导管应用于大鼠肾移植血管吻合,降低了手术难度,减少了吻合口出血,提高了手术成功率。     

标准通道经皮肾输尿管镜气压弹道碎石术治疗复杂肾结石

目的:探讨标准通道经皮肾输尿管镜气压弹道碎石术治疗复杂肾结石的疗效及安全性.方法:总结2009年4月-2009年12月采用标准通道经皮肾输尿管镜气压弹道碎石术治疗复杂肾结石36例39侧临床资料.结果:本组35例38侧成功行Ⅰ期PCNL,手术时间30-180min(平均86±34min),出血约30-500ml(平均110±20ml).其中8例残留结石大于1.0cm,术后5-7天行局麻下二期手术清除残石,总结石清除率92.1%(35/38),ESWL治疗3例.1例孤立肾铸型结石并肾积水、肾功能不全,经皮肾穿刺置入F8单J管引流,二期行标准通道PCNL术.所有病例随访1-3月,无严重手术并发症.结论:标准通道经皮肾输尿管镜气压弹道碎石术治疗复杂肾结石,具有安全、效率高、创伤小、恢复快的特点,并可明显减低医疗成本.     

Ⅰ型单纯疱疹病毒感染的细胞培养系统的建立

目的:建立稳定的HSV-1感染的细胞培养系统,为HSV-1感染性皮肤病的基础及临床研究提供稳定的平台。方法:以猴肾细胞(Vero)为繁殖细胞,选择人鼻咽癌上皮细胞(Hep-2)为靶细胞,观察HSV-1在Hep-2株中的致细胞病变效应(CPE)。结果:HSV-1在Vero细胞中能稳定、大量地繁殖;HSV-1感染Hep-2细胞后可出现明显的细胞病变;结论:以Vero为繁殖细胞,Hep-2为靶细胞的稳定的细胞培养系统可作为HSV-1感染性皮肤病的基础及临床研究的平台。     

加味黄连阿胶汤对顺铂致肾损伤大鼠TGF-β_1表达的影响

目的：观察加味黄连阿胶汤对顺铂致肾损伤大鼠TGF-β1表达的影响。方法：采用尾静脉注射顺铂的方法,制备顺铂肾毒性大鼠模型,然后给以相应的药物治疗,连续8周。剖取肾脏行HE、免疫组织化学染色,观察肾组织TGF-β1的表达情况,测定其平均吸光度。结果：模型组大鼠24h尿蛋白定量、NAG含量及TGF-β1的平均吸光度均明显高于正常对照组（P〈0.01）,而各治疗组均明显低于模型组（P〈0.05或P〈0.01）。结论：加味黄连阿胶汤可明显下调肾小管上皮细胞内TGF-β1的表达,减轻顺铂引起的肾小管和肾小管间质损伤。     

浙江省汉坦病毒基因分子进化分析

为了分析浙江省汉坦病毒分子流行病学的特点,本文应用分子生物学软件对1981～2007年从浙江省不同地区不同宿主分离的12株汉坦病毒的S、M基因序列进行分子进化分析,结果显示:浙江省属汉滩(HTN)型和汉城(SEO)型的混合型疫区,病毒的基因差异和亲缘远近关系主要表现在地区性,而与病毒分离的年代与宿主关系并不大,表现出明显的地理聚集现象,该现象在HTNV中的表现尤为明显,同一地区分离的病毒表现为较高的基因同源性,系统进化树上分布于同一或临近分支。另外发现分离自浙江省建德地区的Gou3和ZJ5株在SEOV进化枝中构成一独立分支,而且与国内外SEOV其他毒株的基因差异均较大,在浙江省建德地区存在着SOEV的特殊亚型病毒。