橡胶延伸因子基因及3''端非编码区的克隆与序列分析

橡胶延伸因子ＲＥＦ（Ｒｕｂｂｅｒ Ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ Ｆａｃｔｏｒ）是橡胶生物合成中最重要的酶之一．作者利用ＲＥＦ基因序列设计并合成引物． 通过提取胶乳总ＲＮＡ 用ＲＴ法合成ｃＤＮＡ 后,通过ＰＣＲ技术扩增并克隆了ＲＥＦ基因和３端非编码区． 序列测定结果表明,ＲＥＦ基因全长４１４ 个碱基,编码１３８ 个氨基酸,３端非编码区长１１２ ｂｐ． 与Ｇｏｙｖａｅｒｔｓ Ｅ 等人发表的序列比较：ＲＥＦ基因同源率为１００％ ,３端非编码区有２ ｂｐ 的差异,同源率为９８％ ． 将所克隆的ＲＥＦ基因及３非编码区进行地高辛标记, 对胶乳和叶片总ＲＮＡ 进行点杂交分析,结果表明,胶乳总ＲＮＡ 呈阳性反应,叶片总ＲＮＡ 则呈阴性反应．     

利用15肽随机肽库确定抗TNF单抗表位的研究

利用抗ＴＮＦ的Ｔ５单抗作为筛选配基,对经ＤＮＡ碱基组成分析证明具有良好随机性的１５肽库进行亲和筛选．经过三轮筛选后,以硝酸纤维素膜斑点印迹法观察到良好的富集效果．由第三轮挑选出的３１个克隆进行ＤＮＡ测序,结果推出的优势克隆的短肽为ＣＹＲＲＰＡＧＧＬＰＧＩＣＳＡ等,竞争性ＥＬＩＳＡ实验证明带有以上短肽的噬菌体与ＴＮＦ能竞争性地与Ｔ５单抗结合．该多肽可能是Ｔ５单抗所识别的模拟表位     

美味猕猴桃净光合速率日变化与光合特性的初步研究

在春季田间条件下,我们对美味猕猴桃品种米良１ 号（Ａｃｔｉｎｉｄｉａ ｄｅｌｉｃｉｏｓａ ｃｖＭｉｌｉａｎｇ－１）的光－光合特性与净光合速率日变化及其与环境因子的关系进行了初步研究．结果表明美味猕猴桃米良１ 号在适宜的环境条件下（气温３４ ℃,相对湿度６２％ ）,同化ＣＯ２ 的光合速率达到１７．３７～１８．６９ μｍ ｏｌｍ － ２ｓ－ １,但是在高温和干旱条件下（气温４１℃,相对湿度３０％ ）,其光合能力降低到７．３２ μｍ ｏｌｍ － ２ｓ－ １．该品种的光饱和点与光补偿点分别为１ １００ 和２０ μｍ ｏｌｍ － ２ｓ－ １, 表明是一种阴性偏阳的树种． ５ 月初的晴天,美味猕猴桃米良１号的净光合速率日变化呈双峰曲线型,第一高峰出现在上午１０∶００,１８．６５ μｍ ｏｌｍ － ２ｓ－ １,午间１３∶００ 剧降到３．１５ μｍ ｏｌｍ － ２ｓ－ １,下午１６∶００ 出现第二高峰,其值为１０．３５ μｍ ｏｌｍ － ２ｓ－ １． 在测定净光合速率的同时,还对田间条件下环境因子如光照、气温、空气湿度与ＣＯ２浓度以及植物叶表面温度与蒸腾速率日变化等进行了监测,用多元线形回归的方法分析了环境因子对猕猴桃光合作用日变化的影响     

IL—1预刺激对反义IRAK—1寡核苷酸抑制NF—kB活化的影响

实验分为白介素１（ＩＬ－１）预处理组和非预处理组,脂质体介异反义ＩＬ－１受体相关激酶－１（ＩＲＡＫ－１）寡核苷酸（ＯＤＮ）转染ＨｅｐＧ２细胞,用ｗｅｓｔｅｒｎ杂交分析ＩＲＡＫ－１表达水平,以夹心酶联免疫吸附测定法测定ＮＦ－ｋＢ含量。结果表明,ＩＬ－１非预处理组反义ＩＲＡＫ－１ＯＤＮ不能抑制ＩＲＡＫ－１表达和ＮＦ－ｋＢ活化,而预处理组ＩＲＡＫ－１表达和ＮＦ－ｋＢ活化受到明显抑制,反义ＩＲＡＫ－１ＯＤ     

橡胶延伸因子基因及3′端非编码区的克隆与序列分析

橡胶延伸因子ＲＥＦ（Ｒｕｂｂｅｒ Ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ Ｆａｃｔｏｒ）是橡胶生物合成中最重要的酶之一,作者利用ＲＥＦ基因序列设计并合成引物。通过提取胶乳总ＲＮＡ用ＲＴ法合成ｃＤＮＡ后,通过ＰＣＲ技术坟民并克隆了ＲＥＦ基因和３′端非编码区,序列测定结果表明,ＲＥＦ基因全长４１４个碱基,编码１３８个氨基酸,３′端非编码区长１１２ｂｐ．与ＧｏｙｖａｅｒｔｓＥ等人发表的序列比较：ＲＥＦ基因同源率为１００％     

用改良的MTT法测定rhG-CSF活性

ＭＴＴ测定法是根据线粒体脱氢酶催化ＭＴＴ形成蓝色甲■的多少来检测活细胞数和功能状态的,但原始方法中存在着一些问题,如敏感性偏低、有机溶剂产生蛋白质沉淀以及产物的溶解度偏低等。为了摸索测定 ｒｈＧ－ＣＳＦ活性的最适条件,我们以 ＮＦＳ－６０细胞为对象,比较了多种溶解缓冲液,并且对细胞数、ＭＴＴ浓度及保留时间、溶解液用量等条件进行了选择。结果表明,ＤＭＦ－２０％ＳＤＳ和 ２０％ＳＤＳ的效果最好,测定时细胞数为每孔 １０００个细胞,所加 ＭＴＴ浓度为 １ｍｇ／ｍｌ,保留时间为 ４ ｈ,溶解液的用量为每孔 １００μｌ。     

米根霉诱导因子对紫草细胞培养中紫草宁色素分泌的影响

在紫草细胞培养中,加入米根霉粗提物可显著提高紫草宁色素产量,并可加快胞内色素分泌到培养液中的速率和数量。在细胞培养的第６天加入米根霉诱导因子时其促进紫草宁色素分泌的作用最大,培养液中紫草宁色素含量对照的２．２４倍。此外,同时加入正十六烷和米根霉诱导因子对紫草宁色素的分泌具有协同作用。     

人多肽链延伸因子1α四个反转录假基因的鉴别与定位

人多肽链延伸因子1α基因EEF1A是一个在蛋白质合成过程中起重要作用的看家基因。通过对已有GenBank、GDB等数据库的综合分析,鉴别了4个人类多肽链延伸因子1α基因的反转录假基因,并分别将其精细定位于4q2 5、7p15-21、9q34和19q13上。 Abstract:The gene for human polypeptide chain elongation factor-1α(EEF1A)is a house-keeping gene which plays an important role in the process of protein synthesis.By means of comprehensive analysis in the database of Genbank,GDB and ect,we identify 4 retropseudogenes of EEF1A and finely localized to 4q25,7p15-21,9q34 and 19q13,respectively.     

核骨架——细胞核内生命活动的重要结构体系

综合分析了国际国内近年来有关核骨架研究的新进展,从几个方面的研究事实,包括核骨架对染色质ＤＮＡ的有序组织,核骨架参与ＤＮＡ复制和基因的表达与调控以及核骨架的起源进化等,阐明核骨架是细胞核内染色质结构的有序组织者和功能活动的参与者,核内纷繁复杂的生命活动能有条不紊地进行,核骨架在其中扮演了重要角色。     

脑特异性金属硫蛋白—Ⅲ研究进展

金属硫蛋白－Ⅲ（ＭＴ－Ⅲ）是富含半胱氨酸的低分子量蛋白,主要在脑内含Ｚｎ＾２＋神经元表达,与脑的发育过程有关。ＭＴ－Ⅲ可抑制体外培养的神经细胞生长和存活。ＭＴ－Ⅲ与Ｚｎ＾２＋的结合有相对特异性,可能影响依赖于Ｚｎ＾２＋的一系列生物活动。ＡＤ患者脑内ＭＴ－Ⅲ表达减少,敲除ＭＴ－Ⅲ基因的小鼠对红藻氨酸诱发癫痫更敏感,提示ＭＴ－Ⅲ可能在某些脑变性疾病中发挥作用。