利用15肽随机肽库确定抗TNF单抗表位的研究

利用抗ＴＮＦ的Ｔ５单抗作为筛选配基,对经ＤＮＡ碱基组成分析证明具有良好随机性的１５肽库进行亲和筛选．经过三轮筛选后,以硝酸纤维素膜斑点印迹法观察到良好的富集效果．由第三轮挑选出的３１个克隆进行ＤＮＡ测序,结果推出的优势克隆的短肽为ＣＹＲＲＰＡＧＧＬＰＧＩＣＳＡ等,竞争性ＥＬＩＳＡ实验证明带有以上短肽的噬菌体与ＴＮＦ能竞争性地与Ｔ５单抗结合．该多肽可能是Ｔ５单抗所识别的模拟表位     

噬菌体显示技术用于抗体表位的筛选

利用噬菌体随机肽库筛选抗TNF单抗表位的研究中,就抗体的选择、肽库富集的检测、筛选得到的表位多肽的验证及如何提高筛选的成功率等,进行了一些初步探索. 实验结果表明,由识别线性抗原位点的抗体较容易筛选到噬菌体呈现表位,具有较强中和活性的抗体,因多识别空间构型抗原位点而增加筛选难度. NC膜斑点印迹、ELISA及DNA测序均可作为筛选富集的检测方法. 用与天然抗原同源比较的方法及竞争性ELISA分析,可以帮助确定噬菌体呈现多肽是否是抗体表位.     

用噬菌体随机肽库确定抗TNF单抗识别的表位

用抗肿瘤坏死因了Ｔ５单抗做为筛选配基,对经ＤＮＡ和氨基酸组成分析证明具有良好随机性的６肽库进行亲和筛选,以期确定Ｔ５单抗识别的表位。经过三轮筛选后,以硝酸纤维素膜斑点印迹及ＥＬＩＳＡ法观察到良好的富集效果。