双基因真核表达载体pIRES-BMP2-TGFβ3 的构建与鉴定

目的:构建与鉴定骨形态发生蛋白BMP2和转化生长因子TGFβ3双基因真核表达载体pIRES-BMP2-TGFβ3。方法:首先,用PCR方法从质粒pGEMT/BMP2中扩增出BMP2基因全长,并将其连入双基因真核表达载体pIRES,得到质粒pIRES-BMP2,其次,从人胚胎组织提取总RNA,反转录成cDNA,以反转录的cDNA为模板,PCR扩增出TGFβ3基因全长,将TGFβ3基因连入质粒pIRES-BMP2;用酶切的方法筛选出阳性重组质粒,并进行测序鉴定。结果:酶切鉴定证明已将BMP2和TGFβ3两个基因连入载体中,测序结果完全正确。结论:成功构建PIRES-BMP2/TGFβ3双基因真核表达载体。     

CT三维重建技术在肺磨玻璃结节诊断中的研究进展

三维重建技术在肺磨玻璃结节(ground-glass opacity,GGO)鉴别诊断中具有重要作用,比传统的二维CT对于相关图像参数的测量更准确,更完整。近年来国内外学者对三维重建下GGO影像学变量包括结节平均直径、体积及CT值等在非典型腺瘤样增生(atypical adenomatous hyperplasia,AAH)、原位癌(adenocarcinoma in situ,AIS)、微浸润腺癌(minimally invasive adenocarcinoma,MIA)及ⅠA期浸润性腺癌(invasive adenocarcinoma,IAC)的鉴别诊断方面的研究越来越多样化。对作为早期肺癌病灶的GGO,三维重建测量可从其体积-倍增时间、CT值的峰度和偏度、平均CT值及CT值分布的方差等参数来进行术前良恶性评估。本文针对近年来国内外对三维重建处理技术在GGO诊断中的研究予以回顾和总结,旨在对GGO临床诊治予以提示。     

后路椎弓根螺钉内固定结合后外侧植骨融合治疗胸腰椎骨折的临床观察

目的：观察后路椎弓根螺钉内固定结合后外侧植骨融合治疗胸腰椎骨折的临床效果及安全性。方法：回顾性分析2010年6月-2012年4月在我院脊柱骨科住院治疗的71例胸腰脊椎骨折患者,所有患者随机被分成2组,治疗组38例接受采用后路椎弓根螺钉内固定结合后外侧植骨融合治疗,对照组33例接受传统椎弓根螺钉内固定。术后对患者椎体前缘高度、脊柱Cobb’s角、腰背痛、神经功能恢复情况、内固定并发症等方面进行手术效果的评价。结果：治疗组术后及随诊患者的椎体前、后缘高度的比值与对照组相比,均有统计学差异（P〈0．05）;治疗组术后及随诊患者的Cobb’s角较对照组明显减小,差异有统计学意义（P〈0．05）,治疗组手术时间与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）;两组患者医疗费用、神经功能改善筝级相互比较,无统计学意义咿0．05）。结论：后路复位椎弓根螺钉内固定结合后外侧植骨融合治疗胸腰椎骨折的临床疗效确切。     

对侧皮质锁定螺钉与锁定螺钉治疗股骨远端骨折疗效比较

目的:比较对侧皮质锁定螺钉与锁定螺钉治疗股骨远端骨折的临床疗效。方法:回顾性分析自2013年5月至2016年8月诊治的52例股骨远端骨折患者,采用对侧皮质锁定螺钉+NCB接骨板内固定治疗26例(A组:对侧皮质锁定组),采用锁定螺钉+NCB接骨板内固定治疗26例(B组:锁定螺钉组)。记录两组手术出血量和手术时间、切口长度、内固定治疗后骨折愈合时间、内固定治疗后完全负重时间、内固定治疗后并发症发生率等,在每个随访节点对每位患者进行患肢的正侧位X线平片检查,末次随访时对患肢进行膝关节功能评分,采用美国特种外科医院膝关节评分标准评定患肢功能。骨折愈合的定义为活动时骨折处无痛且在骨折正侧位X线平片上可见到断端骨皮质骨痂连接。术后并发症包括:关节僵硬、内固定断裂、骨不连以及感染等。结果:本研究52例骨折均获得至少12个月的随访。两组在手术相关指标及切口愈合等方面均无明显差异(P均0.05)。在骨折愈合以及完全负重时间方面,A组均显著短于B组(P均0.05)。末次随访时52例患者患肢膝关节功能:A组:优18例,良5例,差4例,优良率88.5%;B组:优15例,良6例,中4例,差1例,优良率80.8%。两组对比A组优良率显著高于B组(P0.05)。两组并发症对比无明显差异:A组发生骨不连2例,骨折内固定断裂2例。B组发生骨不连3例,畸形愈合2例。结论:与传统锁定螺钉相比,对侧皮质锁定螺钉在骨折愈合时间、完全负重时间、术后患肢功能优良率方面具有优势,但在并发症发生率方面没有明显差异。对侧皮质锁定螺钉的治疗指征及自身强度还有待大样本、多中心的临床研究进一步明确。     

犬气管超微结构分析及低温保存研究

为气管移植的临床需要,气管的低温保存是迫切需要解决的问题,国内外至今未见报导。本文通过电镜观察研究了抗冻剂的种类、浓度,以及降温速率和复温方法等因素对狗气管低温保存效果的影响;初步得到了一些有关参数,可使经低温处理后的气管仍具有较完善的超微结构。     

硫氧还蛋白Lmo1903介导单增李斯特菌抵抗氧化应激的生物学功能研究

【目的】以单增李斯特菌(Listeria monocytogenes, LM)硫氧还蛋白Lmo1903为研究对象,研究其在细菌环境适应过程中的抗氧化应激生物学作用。【方法】使用生物信息学方法分析Lmo1903的进化关系和关键活性位点,使用酶切连接的方法构建Lmo1903蛋白表达载体,获得纯化的重组蛋白,以胰岛素为底物分析其氧化还原酶学活性;同时制备鼠源多克隆抗体,分析其在细胞内的定位;采用核苷酸定点突变技术构建CX1X2C基序中的半胱氨酸点突变蛋白,分析关键位点半胱氨酸对Lmo1903酶活的影响;采用同源重组原理构建lmo1903基因缺失株Δlmo1903和回补株CΔlmo1903,研究lmo1903在单增李斯特菌生长、运动和抗氧化应激方面发挥的功能。【结果】生物信息学分析显示,Lmo1903含有CX1X2C基序,与枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)的TrxA的亲缘关系较近,属于硫氧还蛋白家族成员,主要定位在细菌细胞质中,具有较强的还原酶学活性,突变CX1X2C基序中的半胱氨酸残基会显著降低Lmo1903的还原酶活能力。缺失lmo1903不影响单增李斯特菌的生长能力,但显...     

京津冀太行山片区不同生境昆虫种类和群落多样性调查与分析

通过对京津冀太行山片区不同生境昆虫群落多样性调查,为京津冀太行山片区生物多样性的保育和决策提供科学依据。在2019年7月-2020年10月,在京津冀太行山片区的9个县（区）（包括北京市的昌平区和房山区,以及河北省的涿鹿县、蔚县、涞水县、涞源县、易县、唐县和阜平县）的6种生境（即森林、人造林、湿地、灌丛、草地和农田）共设置106个样点,具体采用“样线踏查法”和“马来氏网法”相结合共进行了6次昆虫调查。共采集昆虫62 450头,隶属于14目153科608种。不同生境间昆虫的 Margalef 丰富度指数(P<0.01）、多样性指数 H (P<0.01）和均匀度指数 E (P<0.05）存在显著或极显著差异。 Margalef 丰富度指数依次为森林＞人造林＞湿地＞灌丛＞农田＞草地,且森林的 Margalef 丰富度指数最高为5.64、草地最低为2.70;多样性指数 H 依次为草地＞灌丛＞湿地＞农田＞森林=人造林;均匀度指数 E 依次为草地＞森林＞灌丛＞湿地＞农田＞人造林。不同生境之间昆虫种群相似度分析表明,森林和人造林的相似度系数最高为0.51,表现为为中等相似;其余生境间的相似度指数均低于0.5,表现为不相似或极不相似。森林、人工林和湿地等生境昆虫物种丰富度较高,是主要的昆虫物种储存库,但对应的昆虫群落多样性指数 H 较低,突显了这些生境环境保护的重要性。     

三种方法保藏毛霉目菌种效果的评定

藻状菌类,特别是其中毛霉目的一些属种,多用于科研和生产,因而研究保藏这些菌种的方法和效果有较大的现实意义。本文是采用矿油封藏法、麸皮保藏法和冷冻真空干燥法保存18属120种548株毛霉目菌种(另外有霜霉目腐霉属7种11株)的结果。     

嗜热自养甲烷杆菌的分离和生理特性的初步研究

嗜热自养甲烷杆菌(Methanobacterium thermoau trophicum)是从上海市科学会堂沼气池取样,在65℃条件下经过富集分离而得到的一株产甲烷杆菌。该菌能利用H_2和CO_2作为生长基质,不能利用甲醇、乙醇、甲酸钠、乙酸钠、丙酸钠等作为供氢体。氮源主要来自NH_4~+。少量的酵母膏等有机物和一定量的污泥上清液对     

基于纳米金和辣根过氧化物酶双标记抗体的黄曲霉毒素B1高灵敏检测方法的建立及应用

黄曲霉毒素B₁（aflatoxin B₁,AFB₁）在自然界普遍存在,可污染多种粮食作物和饲料,给动物和人类健康造成严重威胁。为建立AFB₁高灵敏度的快速检测方法,本研究通过采用纳米金颗粒（Au nanoparticles,AuNPs）和辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase,HRP）双标记AFB₁单克隆抗体,建立新型酶联免疫检测方法（HRP-AuNPs IC-ELISA）,检测下限（IC₁₀）为0.017ng/mL,检测区间（IC₂₀-IC₈₀）为0.026-0.376ng/mL,半数抑制率（IC₅₀）为0.099ng/mL,与黄曲霉毒素B₂、G₁、G₂ 和M₁ 的交叉反应率分别为2.7%、9.3%、2.1%和5.3%,与赭曲霉毒素A、伏马毒素B₁、桔青霉素、展青霉毒素和玉米赤霉烯酮几乎不存在交叉反应。在玉米和面粉样本中的加标回收率可达88.93-103.55%,与LC-MS/MS同时对天然样本中AFB₁ 含量进行检测,结果表明,两种方法相关性良好。本研究建立的HRP-AuNPs IC-ELISA耗时短且灵敏度高,可用于实际样本中AFB₁ 的快速定量检测与分析,也为其他霉菌毒素的精准检测技术开发提供参考。