家兔肠系膜上神经节注射HRP后脊神经节内标记细胞的节段分布

将ＨＲＰ（ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，辣根过氧化物酶）注入７只家兔肠系膜上神经节内，观察逆行标记神经元胞体在脊神经节内的节段性分布。结果显示，标记细胞见于双侧Ｔ５（胸５）－Ｌ３（腰３）脊神经节内，较集中地分布于Ｔ８－Ｔ１２节段，高峰在Ｔ９和Ｔ１０。两侧脊神经节内的标记细胞数及节段分布模式无显著差异。标记细胞散布于脊神经节各部，大都是５０μｍ以下的中，小型细胞。研究结果揭示了肠系膜     

采后GA_3诱导菠萝多酚氧化酶活性升高的机理

在多酚氧化酶（ＰＰＯ）提取过程中,直接加入ＧＡ３溶液,不能使ＰＰＯ活性增加。采后ＧＡ３诱导菠萝（Ａｎａｎａｓｃｏｍｏｓｕｓ（Ｌ．）Ｍｅｒ．）ＰＰＯ活性升高的同时,显著提高了酸性磷酸酯酶的活性,这是果实组织的Ｐｉ浓度明显升高的主要原因。随着果实的后熟,磷脂酶Ｄ活性不断下降,ＧＡ３处理显著延缓了该酶的下降速度。虽然采后ＡＢＡ处理使果实ＰＰＯ活性有小幅度增加,但ＡＢＡ处理能使ＧＡ３对ＰＰＯ活性的诱导明显加强。     

不同条件下荔枝多酚氧化酶活性的分析(英)

经硫酸铵盐析和ＳｅｐｈａｄｅｓＧ－１００,Ｑ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和ＰｈｅｎｙｌＳｅｐｈａｒｏｓｅ柱层析分别纯化后,得到了电泳均一的荔枝多酚氧化酶,荔枝多酚氧化酶在ＳＤＳ和ＣＡＴＢ存在下测得的酶活性略有降低,但在ＴｒｉｔｏｎＸ－１００下活性有所增加,丁酸等短链的脂肪酸对酶活性起抑制作用,而亚油酸等长链的不饱和脂肪酸则起促进作用,另外,荔枝多酚氧化酶活性还明显受ＦｅＳＯ４和ＳｎＣｌ２所抑制,但能补Ｃａ     

八种红树植物幼苗的叶片可溶性蛋白和抗氧化酶活性对光强的响应

红树林湿地生态系统的恢复与重建是我国南方海岸带生态恢复研究的重点领域之一。为明确红树植物光适应的生理生态策略，该文选取无瓣海桑(Sonneratia apetala)、秋茄(Kandelia obovata)、木榄(Bruguiera gymnorhiza)、桐花树(Aegiceras corniculatum)、老鼠簕(Acanthus ilicifolius)、卤蕨(Acrostichum aureum)、银叶树(Heritiera littoralis)和黄槿(Hibiscus tiliaceus)作为研究对象，通过遮荫控制试验，探究这8种红树植物一年生幼苗在不同光照强度(自然光强的100%、45%、30%、10%)处理下的叶片可溶性蛋白含量和抗氧化酶活性的响应特征。结果表明：(1)随光照强度下降，木榄、老鼠簕和卤蕨的叶片可溶性蛋白含量受到的影响较小，而无瓣海桑、秋茄、桐花树、银叶树和黄槿的叶片可溶性蛋白含量则表现出下降趋势。(2)木榄、老鼠簕和卤蕨的超氧化物歧化酶(SOD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)等抗氧化酶活性在10%光照强度处理下的活性与对照无显著差异，而无瓣海桑、秋茄...     

向日葵ACC氧化酶基因(HaACO1)的克隆及表达分析

目的:克隆向日葵中的ACC氧化酶基因(HaACO1),并对其进行生物信息学分析及盐胁迫表达分析,为理解向日葵ACC氧化酶生理功能并加强对ACO基因的利用奠定基础。方法:以前期从盐胁迫的内葵杂4号根中获得的ACC氧化酶基因片段4-4-7TDF(KM823963)为基础,通过RT-PCR和5'/3'RACE技术克隆ACO基因的全长cDNA序列,利用生物信息学软件对获得的cDNA序列及编码的蛋白质序列进行分析。同时采用PCR方法克隆基因组DNA(genemic DNA,gDNA)序列,并对其进行结构分析。利用实时荧光定量PCR分析Na Cl胁迫下向日葵根、下胚轴、叶中HaACO1的表达量和不同NaCl浓度及不同胁迫时间下根中Ha ACO1的表达量。结果:Ha ACO1的cDNA序列全长为1 135bp,其开放阅读框为942bp,编码313个氨基酸。预测其分子质量和等电点分别为35.84k Da和5.13,基因登录号为KP966508。HaACO1与已报道的多种植物的ACO基因核苷酸序列及其推导的氨基酸序列有较高的相似性,分别为76%~83%和77%~88%。gDNA起始密码子至终止密码子序列长1 018bp,包含2个外显子和1个内含子,基因登录号为KP988289。实时荧光定量PCR分析表明向日葵HaACO1在不同器官及不同NaCl浓度、不同时间诱导下存在特异性表达差异。结论:获得的向日葵HaACO1是植物ACO家族成员之一,该基因应答盐胁迫具有独特的表达模式。     

Nrf2 和HO_1 在肾癌组织中的表达及意义

目的：探讨肾癌组织Nrf2 和HO_1 表达水平变化及其临床意义。方法：选择经手术切除肾癌组织标本42 例及正常肾组织42 例作为研究对象,42 例患者均未接受化疗或者放疗,采取免疫组织化SABC法测定Nrf2 和HO_1 表达水平,并进行统计学分析。 结果：Nrf2 及HO_1 于肾癌组织及正常肾组织均有不同程度表达,且主要表达于肿瘤细胞胞浆,肾癌组中Nrf2 阳性35 例 （83.3%）,显著高于正常肾组织14例（33.3%）,差异具有统计学意义,P<0.05。肾癌组HO_1 表达阳性31 例（73.8）,显著高于正常 肾组织组15 例（35.7）,差异具有统计学意义,P<0.05。肾癌组织Nrf2和HO_1 表达水平成正相关,r=0.536。结论：肾癌组织Nrf2 和 HO_1表达水平较正常组织更高,且两者之间呈正相关,表明Nrf2 和HO_1 在肾癌进展中起着重要作用。     

Impacts of freeze-thaw processes on antioxidant activities and osmolyte contents of Syntrichia caninervis under different desert microhabitats

 齿肋赤藓(Syntrichia caninervis)作为典型的耐旱藓类, 广泛分布于世界干旱和半干旱荒漠地区, 是古尔班通古特沙漠生物土壤结皮中的优势藓类植物。该沙漠冬季具有稳定的降雪, 初春的积雪融化为植物的生长提供了良好的水热条件。荒漠藓类植物叶片仅具一层细胞, 对外界环境的变化十分敏感, 有关荒漠藓类植物在冬季和早春地表冻融交替过程中如何适应环境剧烈变化的研究鲜见报道。该研究探讨了生长于3种不同微生境(活灌丛、枯死灌丛和裸露地)下的齿肋赤藓, 经由冬季低温冻结到早春融雪复水再到春季中旬自然干燥过程中的生理生化变化特征。结果表明: 不同冻融期、微生境及二者的交互作用能够显著影响齿肋赤藓的渗透调节物质(游离脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白)含量、丙二醛(MDA)含量、抗氧化酶活性(过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性)。冬季低温冻结期的极端低温和春季中旬的干燥环境使得齿肋赤藓可溶性糖和MDA含量, 以及3种抗氧化酶活性均显著高于早春融雪期, 可溶性蛋白含量显著低于融雪期。同时, 在融雪期灌丛遮阴所形成的“冷岛效应”使得生长于灌丛下的齿肋赤藓植株可溶性糖和MDA含量显著高于枯死灌丛和裸露地。但灌丛的存在也为春季中旬干旱无雨期齿肋赤藓提供了一个相对良好(含水量高)的生活环境, 其下齿肋赤藓的渗透调节物含量和抗氧化酶活性均显著低于其他两个生境。在整个冻融过程中裸露地齿肋赤藓的3种抗氧化酶活性均显著高于灌丛下, 这可能是由于生活于裸露地的苔藓有更强的耐胁迫特性。     

黄曲酶尿酸氧化酶突变体的构建、表达、纯化及生物学活性分析

采用融合PCR的方法将黄曲霉尿酸氧化酶(UOX) 基因的307~309 bp的TGC(Cys) 突变为GCC(Ala),将所获得的突变体基因克隆到原核表达质粒pET-42a(+) 后转化大肠杆菌BL21(DE3)。经IPTG诱导,突变体蛋白 (UOX-Ala103) 得到高水平的可溶性表达,目的蛋白占总蛋白含量的45％。疏水柱及阴离子柱纯化后,UOX-Ala103蛋白纯度＞98％。Western blotting分析证实UOX-Ala103能与抗UOX单抗特异结合。与天然型相比较,其体外生物学活性增加约60％,在高尿酸血症小鼠模型体内也有良好的降解尿酸的活性。     

鸭梨多酚氧化酶基因反义表达载体的构建及农杆菌介导的遗传转化

根据鸭梨多酚氧化酶基因序列设计引物,PCR扩增该基因3′端450bp的片段,并将该片段反向插入真核表达载体pB I121的CaMV 35S启动子和NOS终止子之间,首次构建了鸭梨PPO基因的反义表达载体;其后,在农杆菌EHA105的介导下,成功实现了PPO反义基因对鸭梨组培苗的遗传转化。经Northern杂交和酶活检测证实,转基因鸭梨植株体内的多酚氧化酶基因转录和翻译水平均得到明显抑制,从而为耐褐化梨新品种的培育奠定了基础。