应用LH-PCR研究党参、麻黄和独一味内生细菌多样性

通过直接提取药用植物样品的总DNA,采用长度多态片段PCR (length heterogeneity PCR, LH-PCR)技术研究四川省甘孜藏族自治州的党参、麻黄和独一味3种药用植物内生细菌多样性.结果表明： 同种植物根、茎、叶的LH-PCR图谱相似度很高,条带丰富度差别不大;但不同植物样品之间的差异较大.党参的植物样品条带丰富度最大,麻黄次之,独一味最低.3种药用植物中474 bp长度的细菌是绝对的优势菌群.植物内生细菌多样性与土壤速效磷呈负相关,而与土壤pH值呈正相关.海拔和土壤总氮是影响植物样品内生细菌多样性分布的两个重要环境因子.LH-PCR所得的种群信息能较直观地反映不同植物样品间细菌多样性的差异.因此LH-PCR适用于分析药用植物内生菌多样性.     

假单胞菌H78中PhoR/B系统对磷元素吸收及其藤黄绿菌素合成的调控

【目的】研究根际荧光假单胞菌(Pseudomonas protegens)H78中双组分系统PhoR/B对Pst磷转运系统以及Plt生物合成的调控作用。【方法】通过同源重组的方法敲除pho R和pho B基因;使用lac Z报告基因融合质粒研究PhoR/B系统对Pst磷转运系统表达的调控;在不同磷浓度下测定H78野生型及H78pho BR突变株的生长,并在KMB培养基中测定其Plt产量。【结果】H78野生型中pst S′-′lac Z融合质粒表达的Lac Z酶活是H78pho BR突变株的15倍;在磷饥饿条件下H78的生长是H78pho BR菌株的3倍;在KMB培养基中,H78的Plt产量为H78phoBR菌株的2倍。【结论】PhoR/B系统正调控Pst转运系统的表达;在磷饥饿条件下,PhoR/B促进磷元素的吸收和利用;PhoR/B同时对Plt生物合成存在一定程度的正调控作用。     

非人灵长类动物基因编辑技术的应用及挑战

建立有效的动物模型是研究人类疾病演进、开发新型治疗手段的重要方法。非人灵长类动物在进化发育、生理生化及病理方面和人类最接近,是研究人类疾病的理想动物模型。随着基因编辑技术的发展,研究者已经成功建立了多种模仿人类疾病的非人灵长类动物模型。但是CRISPR/Cas9的脱靶效应、嵌合突变以及基因敲入效率较低等突出问题也逐渐引起重视。本文综述了基因编辑技术在建立非人灵长类动物模型中的应用现状,提出了目前亟需解决的难点和应对策略,以期为高效、准确构建非人灵长类动物模型提供借鉴与参考。     

复合酶生物技术制-剂的功用

复合酶制剂是继酵母和乳酶生制剂之后由华中农业大学科研人员用生物技术方法,研制和开发的多酶复合物。其酶的种类较多,以非淀粉多糖水解酶为主,包括蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、半纤维素酶、β-葡萄糖酶、果胶酶、甘露聚糖酶等多种水解酶类;其有益微生物如乳酸杆菌、酵母菌和少量双歧杆菌等。 目前华中农业大学发酵工程制得的复合酶制剂富含单细胞蛋白、多种水解酶、粘多糖、游离氨基酸及其衍生物、各脂溶性及水溶性维生素、常量及微量元素,具有营养、促进消化吸收、增强免疫功能、降低料肉比、消除肠道臭气、减少对环境的污染和防治疾病的作用。 复合酶制剂对当前养殖业生产有极其重要的意义,它不仅在饲养业中作饲料添加剂,提高营养水平,促进动物生长和繁殖,还能在饲料工业中作为防腐剂、诱食剂和抗菌剂。 据测算,若筹建年产250吨复合酶制剂生产厂,总投资120万元,流动资金1000万元,年增产值可达750万元,利税450万元,2～4年可回收投资,投资收益率为516％,而抗风险系数仅为18％。秦春圃     

IQGAP1高表达抑制食管鳞癌细胞对顺铂化疗的敏感性

本文旨在研究含IQ模序的GTP酶激活蛋白1(IQ motif containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)过表达或基因干扰是否影响食管鳞癌细胞对顺铂化疗的敏感性。质粒转染构建IQGAP1高表达和基因干扰的稳定细胞系,并采用Western blot进行鉴定。然后,采用不同浓度(2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L)的顺铂处理细胞,通过3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑噻唑蓝[3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]法检测IQGAP1高表达、IQGAP1基因干扰和相应对照细胞的活力,通过4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-Diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色和流式细胞技术检测细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果显示,IQGAP1高表达和基因干扰的稳定细胞系成功建立。在不同浓度的顺铂处理后,MTT结果表明,IQGAP1...     

绝经后骨质疏松患者血清I型胶原氨基末端、I型胶原羧基末端及骨钙素的表达变化及临床意义

摘要 目的：探讨绝经后骨质疏松患者血清I型胶原氨基末端（NTx）、I型胶原羧基末端（CTX）及骨钙素（BGP）的表达变化及临床意义。方法：选取我院2017年8月-2022年8月收治的60例绝经后骨质疏松患者作为研究对象,将其分为观察组,另选取同期来我院体检的60名绝经后健康志愿者作为对照组。对比两组患者NTx、CTX、BGP表达水平,并建立受试者特征工作（ROC）曲线分析NTx、CTX、BGP对绝经后骨质疏松的诊断效能。3个月后对所有患者进行门诊复查随访,将症状明显明显减轻,X线检查明显改善,骨密度值明显增加的35例绝经后骨质疏松患者分为预后良好组,将其余25例未达到上述标准的患者分为预后不良组,对比两组患者临床一般情况,并应用Logistic回归分析NTx、CTX、BGP对绝经后骨质疏松的预后预测价值。结果：两组受检者NTx、CTX、BGP表达水平对比差异显著,观察组NTx、CTX高于对照组,BGP低于对照组（P＜0.05）; NTx、CTX、BGP三者联合对绝经后骨质疏松的诊断效能优于单一检测（P＜0.05）;预后良好组与预后不良组患者年龄、BMI、合并基础疾病、病程、Ca表达水平对比无明显差异（P＞0.05）,预后良好组与预后不良组患者病情严重程度、骨密度T值、雌二醇、血清NTx、CTX、BGP表达水平对比差异显著（P＜0.05）;logistic回归分析结果表明：CTX、BGP为绝经后骨质疏松的预后不良的独立影响因素（P＜0.05）。结论：绝经后骨质疏松患者血清I型胶原氨基末端、I型胶原羧基末端表达水平高于非骨质疏松群体,骨钙素低于非骨质疏松群体,三者联合可提升绝经后骨质疏松的诊断效能。另外,CTX、BGP作为绝经后骨质疏松的预后不良的独立影响因素,CTX水平越高、BGP水平越低可能预示患者预后不良,因此临床需针对此类患者及时改良治疗措施,提升其预后水平。     

内乡宝天曼自然保护区锐齿栎林生物量和净生产力研究

对河南内乡宝天曼自然保护区35年生天然次生锐齿栎林生物量和净生产力进行了测定和研究。结果表明：锐齿栎林生物量为141．17t/hm^2,净生产力为7．39t/(hm^2.a),,其中乔木层生物量为128．30t/(hm^2.a),占总生物量的90．88％,净生产力为6．30t/(hm^2.a),占总净生产力的85．25％,生物量平均相对生长速度为0．1238。灌木层、草本层的生物量和净生产力分别占总的0．79％和0．37％、5．82％5和4．87％。调落物层现存量为11．23t/(hm^2.a),占总生物量的7．95％,年凋落物量3．37t/(hm^2.a),占总净生产力的45．60％,净生产量与叶面积指数,叶量成正相关,而与叶效率成负相关。     

山瑞鳖Trionyx steidachneri染色体组型

本文以骨髓为材料,用秋水仙—低渗—空气干燥制片法,制备染色体标本,对山瑞鳖的染色体组型进行研究。其2n=66 NF=60,其中近中着丝粒染色体4对,近端着丝粒染色体4对和端部着丝粒14对。并有11对点状染色体。山瑞鳖与鳖的染色体数目是十分相近的。     

工业应用上性能改进的工程酶

有四种工业上重要的酶种,经工程改造后改进了它们在工业应用上的性能。 枯草杆菌蛋白酶,通常加在洗衣粉中,去除蛋白质沾污效果很好。但漂白剂能使天然枯草杆菌蛋白酶失去活性。把解淀粉芽孢杆菌蛋白酶BPN'中对氧化敏感的222号甲硫氨酸换成抗氧化的氨基酸,如丙氨酸、丝氨酸或谷氨酰胺。这种酶在1M过氧化氢中仍保持活性。另外,用亮氨酸取代217位置上的酪氨酸残基,则BPN'对合成基质的水解能力比野生型酶高10倍以上。证明只要改变一个氨基酸,就能大大改进枯草杆菌蛋白酶BPN'在洗涤剂中的应用。