IL-33在强直性脊柱炎患者外周血中的表达及意义

目的:探讨IL-33在强直性脊柱炎(AS)患者外周血中的表达水平及临床意义。方法:选择我院2013年12月至2014年8月收治的80例AS患者作为研究组,另选取同期在我院进行健康体检的80例作为对照组。检测两组患者外周血中IL-33的表达情况,记录研究组患者病情活动指数(BASDAI)、红细胞沉降率(ESR)及C-反应蛋白(CRP)水平,分析IL-33表达水平与BASDAI、ESR及CRP的相关性。结果:研究组患者血浆IL-33水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(t=6.15,P=0.025)。AS患者外周血IL-33水平与BASDAI和CRP具有显著正相关关系(r=0.432,0.525,P=0.034,0.029),而与ESR无显著相关性(r=0.175,P=0.214)。结论:AS患者外周血中IL-33呈高表达,说明其可能参与AS的发生及发展。     

鲍曼不动杆菌耐药持留菌的特征及Ⅱ型毒素-抗毒素系统的多样性

摘要:【目的】研究鲍曼不动杆菌持留菌的特征,分析鲍曼不动杆菌Ⅱ型毒素-抗毒素(TA)系统的多样性及分布,探讨TA系统与持留菌形成的潜在关联。【方法】采用分属于6 大类中的6种不同抗生素分别筛选的方法分离并定量鲍曼不动杆菌的持留菌;应用PSI-BLAST及TBLASTN程序分析721株鲍曼不动杆菌中的Ⅱ型TA系统;通过聚合酶链式反应(PCR)方法检测44株临床多重耐药(MDR)的鲍曼不动杆菌中5个Ⅱ型TA系统的分布。【结果】我们发现不同抗生素处理得到的鲍曼不动杆菌持留菌的数量并不相同;对多数抗生素而言,浓度越高,得到的持留菌数量越少;处于生长平台期的菌株中相比对数期含有更多的持留菌;多粘菌素B及妥布霉素均具有杀灭部分持留菌的能力;鲍曼不动杆菌所有菌株中均含有Ⅱ型TA系统,HTH/GNAT类型在菌株中分布最为广泛;所有700余株鲍曼不动杆菌基因组中共含有15个潜在的Ⅱ型TA系统;三类普遍存在于已知基因组中的明确功能的Ⅱ型TA系统在临床多重耐药菌株中同样分布广泛,且HigB/HigA的表达量在标准株的持留菌中显著增高。【结论】鲍曼不动杆菌的持留菌水平与菌株的生长状态、抗生素的种类及浓度密切相关。Ⅱ型TA系统在鲍曼不动杆菌已知基因组和临床多重耐药菌株中普遍存在,其中,HTH/GNAT、GP49/Cro(HigB/HigA)及DUF497/COG3514三种类型的Ⅱ型TA系统可能在鲍曼不动杆菌持留菌的形成中扮演重要角色。     

蛙皮素-蜂毒素杂合肽基因在大肠杆菌中的克隆与诱导表达

抗菌肽 (Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｐｅｐｔｉｄｅｓ)原指昆虫体内经诱导产生的一类分子量在 4ｋＤ左右 ,具有抗菌活性的碱性多肽物质[2 ] 。这类抗菌剂最初是从昆虫、哺乳动物、两栖动物等的防御系统中分离得到的。抗菌肽对革兰氏阳性及阴性细菌、病毒、原虫和发生病变的真核细胞等有杀伤作用 ,具有很强的广谱抑菌作用 ,但对正常哺乳动物细胞无杀伤作用[3 ] 。蛙皮素还具有抗肿瘤活性而没有溶血活性[4 ] ,虽然蜂毒素具有溶血活性 ,但其溶血功能区位于Ｃ端的亲水区域[5] ,两者的极性区域正好相反。据研究表明抗菌肽都会形成两亲螺旋结构的…     

用氨基葡萄糖含量的测定值间接表示红曲菌固态发酵过程中生物量的研究

【目的】为准确快速地了解紫色红曲菌固态发酵中生物量的变化,【方法】采用理化方法测定菌体量和氨基葡萄糖含量,研究了不同培养时间、培养基组成、培养方式下菌体量与氨基葡萄糖含量的关系,建立生物量和氨基葡萄糖含量的换算关系式;构建关联该菌固态培养物近红外光谱数据与实测氨基葡萄糖含量的PLS模型。【结果】建立了可通过近红外光谱法测定氨基葡萄糖来快速预测固态发酵生物量的方法,其中最优近红外模型的校正集内部交叉验证均方根误差(RMSECV)为0.209 4,预测集相关系数(Rp)和均方根误差(RMSEP)分别为0.993 4和0.217 3;同时利用所建的换算关系式也大大提高了生物量计算的准确性。【结论】基于所建立的生物量和氨基葡萄糖的换算关系式,利用近红外光谱法可以快速并且较准确地测定紫色红曲菌固态发酵过程中生物量的变化。     

伯氏疟原虫Pb22截短蛋白免疫血清的传播阻断能力的研究

为探讨伯氏疟原虫（Plasmodium berghei）Pb22蛋白免疫血清的传播阻断能力,应用原核表达系统高效表达Pb22截短蛋白免疫小鼠后获得免疫血清。IFA实验证明Pb22截短蛋白免疫血清均可与疟原虫天然抗原结合。通过传播阻断实验,比较了Pb22截短蛋白和全长蛋白免疫血清的传播阻断效果,证明截短蛋白和全长蛋白对雄配子体出丝均有抑制作用,结果表明全长蛋白免疫小鼠的雄配子体出丝与对照组相比显著下降,截短蛋白免疫小鼠的雄性配子体出丝具有下降趋势但无统计学差异。全长蛋白和截短蛋白免疫小鼠的动合子形成数量较对照组均显著下降。以上结果表明抗Pb22截短蛋白免疫血清具有传播阻断能力,但阻断效果不如全长蛋白免疫血清。     

Caspase-1、OPN在慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者血清中的表达及其临床意义

摘要 目的：探讨半胱氨酸蛋白酶-1 (Caspase-1)、骨桥蛋白（OPN）在慢加急性乙型肝炎肝衰竭（HBV-ACLF）患者血清中的表达及其临床意义。方法：选择2020年6月至2022年6月中国人民解放军联勤保障部队第九七Ο医院收治的86例HBV-ACLF患者（HBV-ACLF组）;另选取同时段接诊的58例慢性HBV感染患者（CHB组）;收集同时间段60例体检的健康志愿者（对照组）。检测所有受试者血清Caspase-1、OPN、肝功能指标水平,探讨HBV-ACLF患者血清Caspase-1、OPN水平与肝功能指标的相关性,单因素分析及Logistic多元逐步回归分析影响HBV-ACLF患者预后的危险因素。结果：三组血清Caspase-1、OPN、肝功能指标水平比较差异有统计学意义（P＜0.01）。HBV-ACLF组、CHB组血清Caspase-1、OPN、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）水平高于对照组（P＜0.05）,白蛋白（Alb）、胆碱酯酶（CHE）水平低于对照组（P＜0.05）,HBV-ACLF组血清Caspase-1、OPN 、ALT 、AST 、TBIL水平高于CHB组（P＜0.05）,Alb、CHE水平低于CHB组（P＜0.05）。Pearson相关分析显示,HBV-ACLF患者血清Caspase-1、OPN水平均与ALT、AST、TBIL呈正相关（P＜0.05）,与Alb、CHE呈负相关（P＜0.05）。单因素分析显示,HBV-ACLF患者预后与肝硬化、肝性脑病、腹膜炎发生率、终末期肝病评分模型（MELD）评分、白细胞计数（WBC）、血小板计数（PLT）、肌酐（Cr）、国际标准化比值（INR）、TBIL、HBV-DNA载量（HBV-DNA）、Caspase-1、OPN有关（P＜0.05）;而与年龄、性别、血红蛋白（HGB）、BUN、ALT、AST、CHE、Alb无关（P>0.05）。Logistic多元逐步回归分析模型结果显示,HBV-DNA、MELD评分、Caspase-1、OPN是影响HBV-ACLF患者预后的危险因素（P＜0.05）。结论：HBV-ACLF患者血清Caspase-1、OPN水平呈异常高表达,且Caspase-1、OPN高表达水平与肝功能恶化和不良临床结局有关,可为HBV-ACLF患者病情进展及预后评估提供依据。     

钝齿棒杆菌乙酰谷氨酸激酶编码基因argB的克隆表达、纯化及酶学性质研究

本研究的钝齿棒杆菌(Gorynebacterium crenatum SYPA)是筛选得到的高产精氨酸突变菌株,其中argB基因编码的乙酰谷氨酸激酶(NAGK)是精氨酸合成过程中的关键酶。为了进一步研究该酶的相关特性,以钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum SYPA)基因组为模板,扩增得到其arB基因,成功构建了pET-28a-argB重组质粒,并在E.coli BL21(DE3)中诱导后高效表达。利用载体pET-28a上的His6·Tag标记选用Ni柱亲和层析法纯化表达具有活性的NAGK,纯化后酶的比活力达到7.28 U/mg,纯化倍数达66.18。并对该酶的酶学性质进行了初步研究,该酶的最适反应温度为30℃;最适pH值为9.0;酶学动力学参数以N-乙酰谷氨酸为底物的Km为3.35mmol/L;金属离子Cu~(2+)、Mn~(2+)、螯合剂对乙酰谷氨酸激酶均有明显的抑制作用。     

苏云金芽胞杆菌cry1Ac与烟草几丁质酶tchiB双价基因克隆表达及其杀虫增效作用研究

将苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)4.0718菌株质粒上的cry1Ac基因和烟草几丁质酶tchiB基因(去掉信号肽或去信号肽再加肠激酶位点)构建了重组基因。经过双酶切和亚克隆,将带有cry1Ac基因上游启动序列和下游终止序列的重组基因片段克隆至穿梭载体pHT315,分别构建重组质粒pHUAccB6、pHUAccB7,在大肠杆菌中扩增后,将两个重组质粒分别电转化苏云金芽胞杆菌无晶体突变株XBU001中,获得重组菌株HAccB6和HAccB7。经液体双相胞晶分离提取离心后,将晶体和上清液分别进行SDS-PAGE分析,双价基因重组与cry1Ac基因在无晶体突变株中表达量相比较,几丁质酶活性提高5.2倍,双价重组蛋白表达量显著提高,主要产生130kDa蛋白条带。经定量分析:双价重组目的晶体蛋白占总蛋白量的61.38%;Cry1Ac蛋白占总蛋白量的42%。发酵上清液经60%硫酸铵沉淀,显示出一条分子量为18kDa新蛋白条带。经原子力显微镜和电子显微镜观察,表达后的重组蛋白呈菱形或椭原形晶体,其规格约为1.5×3.0μm;经生测分析,重组菌株HAccB6和HAccB7毒力相近,与HAc菌株比较毒力提高4.5倍,对棉铃虫(Helicourpa armigora)具有高效杀虫活性,其3dLC50值分别为9.1μg/mL和11.34μg/mL。研究结果表明,烟草几丁质酶与cry1Ac双价基因重组表达产物具有杀虫增效作用。     

中美两国医院感染管理体系的比较分析

通过对中美两国的医院感染监测体系和医院感染控制管理体系的发展研究对比其不同点,借鉴国外先进的管理经验,提高我国医院感染控制管理的水平。并引入循证医学的理论,提高我国感染控制工作的科技内涵。     

GM_1激活环核苷酸磷酸二酯酶的作用

神经节苷脂GM1能激活CaM依赖性环核苷酸磷酸二酯酶,其AC50为1．56μg／ml．这种作用并不一定依赖Ca2＋的存在．在有Ca2＋存在时,GM1对PDE的最大激活活性低于CaM,仅为CaM的80．4％;没有Ca2＋存在时,GM1与CaM对PDE有同样的最大激活活性（100％）．GM1能使CaM对PDE的激活曲线左移,AC50降低,但不改变CaM对PDE的最大激活活性．三氟啦嗪能使GM1激活的PDE的活性降低,其IC50为16．3μmol／L．