定量蛋白质组学中的同位素标记技术

定量蛋白质组学的目的是对复杂的混合体系中所有的蛋白质进行鉴定,并对蛋白质的量及量的变化进行准确的测定,是当前系统生物科学研究的重要内容。近年来,由于质谱技术和生物信息学的进步,定量蛋白质组学在分析蛋白质组或亚蛋白质组方面已取得了令人瞩目的成就,但其最显著的成就应该归功于稳定同位素标记技术的应用。该技术使用针对某一类蛋白具有特异性的化学探针来标记目的蛋白质或肽段,同时化学探针要求含有用以精确定量的稳定同位素信号。在此基础上,实现了对表达的蛋白质差异和翻译后修饰的蛋白质差异进行精确定量分析。综述了在定量蛋白质组学中使用的各种同位素标记技术及其应用。     

EAG and behavioral responses of workers of the red imported fire ant,Solenopsis invicta Buren (Hymenoptera: Formicidae) to its trail pheromones

[目的]测定红火蚊Solenopsis invicta Buren工蚊对其跟踪信息素的触角电位(EAG)及行为反应.[方法]解剖红火蚁工蚁的杜氏腺,用正己烷溶剂提取其分泌的跟踪信息素进行气相色谱-质谱(GC-MS)分析,并测定了红火蚁工蚁对杜氏腺提取物、工蚁提取物和合成的法尼烯混合物的EAG和招募行为反应.[结果]通过与合成的法尼烯混合物的气相色谱(GC)保留时间和质谱图比对,发现杜氏腺提取物的主要成分并不是Z,E-α-法尼烯.EAG测定结果表明,红火蚁工蚁对杜氏腺提取物、工蚁提取物及100 μg的法尼烯混合物均有较强的EAG反应,其次为10μg和1 μg的法尼烯混合物.在招募行为测定中,杜氏腺提取物和工蚁提取物招募作用明显,而10,1,0.1和0.01 μg法尼烯混合物的作用均不显著.[结论]Z,E-α-法尼烯不是红火蚁跟踪信息素的主要成分;红火蚁工蚁对杜氏腺提取物、工蚁提取物有较强的EAG反应和明显的招募行为反应.     

黄皮的化学成分及生物活性研究进展

黄皮Clausena lansium(Lour.)Skeels是广泛分布于我国南方的一种特产果树,含有生物碱类、香豆素类、挥发油类、黄酮类等多种化学成分,具有抗氧化、保肝、降血糖以及杀虫、抑菌和除草等多方面的生物活性。本文就黄皮的化学成分及其生物活性的研究现状进行了综述。     

链霉菌来源的苯并异色烷醌家族抗生素的生物合成

苯并异色烷醌(benzoisochromanequinones,BIQs)家族抗生素是由链霉菌产生的聚酮类抗生素,其芳香聚酮母核结构中含有并联的两个芳香环和一个吡喃环,具有抗菌、抗肿瘤等多种生物学活性。BIQ抗生素聚酮链的早期生物合成过程代表了芳香聚酮抗生素母核的典型合成机制,而不同的后期修饰则决定了它们结构和生物学活性的多样性。在过去的二十几年中,以放线紫红素和美达霉素为研究重点,BIQ家族抗生素的生物合成机制逐渐得到揭示,但在后期结构修饰方面仍有许多问题有待解决。本文对BIQ家族抗生素的生物合成机制研究进行了综述,比较了不同BIQ家族抗生素结构特点、生物学活性,并重点阐述了它们生物合成中的后期结构修饰和调控过程的研究进展,并对BIQ抗生素在代谢工程方面的研究进行了展望。     

绿僵菌素对爪哇棒孢霉SP053菌株的影响及其混用对小菜蛾的联合毒力

为了寻找更有效的利用虫生真菌爪哇棒孢霉Isaria javanicus防治小菜蛾Plutella xylostella的新方法, 测定了绿僵菌素（destruxin）对SP053菌株生长发育与产孢量与萌发率的影响, 利用协同毒力指数法和毒力回归分析法评价了两者混用对小菜蛾2龄幼虫的联合毒力。结果表明: 绿僵菌素对SP053菌株菌丝生长、孢子萌发率和孢子产量均无显著影响（P>0.05）。而一定浓度的绿僵菌素与SP053菌株分生孢子混用具有增效作用, S50-CD100（指爪哇棒孢霉SP053菌株的分生孢子浓度为50×10⁵个/mL和绿僵菌素粗毒素的浓度为100 mg/L的组合; 依此类推）、S25-CD100、S25-CD50及S12.5-CD100等混配组合都有显著的增效效果, 尤其以S25-CD100组合增效效果最好, 其48 h和72 h的协同毒力指数（c.f.）分别达到52.31和31.07。毒力回归分析结果也显示, 添加绿僵菌素粗毒素25~100 mg/L的混剂的LC50值明显降低, 比如添加100 mg/L绿僵菌素粗毒素的混剂（SP053-CD100）, 其48和72 h的LC50分别为17.45和10.55 （×10⁵个孢子/mL）, 而SP053菌株分生孢子单剂的LC50相应值为>50和35.85（×10⁵个孢子/mL）。本研究证明绿僵菌素与爪哇棒孢霉SP053菌株混用有增效作用, 对改进小菜蛾的生物防治方法有一定指导意义。     

利用一种新型反应器——BelloCell培养动物细胞

利用Bello Cell这种新型的生物反应器,来培养COS7细胞和昆虫Sf9细胞。COS7细胞和昆虫sf9细胞分别用T75培养瓶及spinnerflask培养之后,经细胞计数接入Bello Cell之中,同时检测并分析培养基中葡萄糖、谷氨酰胺、乳酸和氨浓度变化情况。COS7细胞初始接种量为4．208×10^7cells,最终在培养156h后细胞数量达到了4．68×10^8cells,是初始细胞量的11倍。sf9细胞初始接种细胞量为1×10^8cells,在培养192h时,细胞总量达到了最高为4．01×10^9cells,是最初细胞量的40倍。培养基的代谢物进行有规律的变化。Bello Cell适合COS7细胞和昆虫Sf9细胞高密度大规模培养,为动物细胞高效大规模表达药物蛋白,奠定重要的基础。     

杠柳萃取物对小菜蛾幼虫的毒杀活性研究

以杠柳Periploca sepium Bunge的根为材料进行甲醇超声波提取,粗提物以水／氯仿（1：1,v／v）萃取获得杠柳根氯仿萃取物。测定了萃取物对小菜蛾Plutella xyllostellaL．3龄幼虫的胃毒和触杀活性。实验结果显示,在50μg／头剂量处理下24h和48h后,氯仿萃取物对小菜蛾3龄幼虫的胃毒死亡率分别为82．22％和92．59％,显著高于触杀死亡率58．89％和68．15％。这一结果表明,杠柳根中含有对小菜蛾幼虫具有较强胃毒作用的活性成分。     

药用野生稻和栽培稻挥发油的化学成分比较研究

本文采用水蒸气蒸馏法提取抗褐飞虱品种药用野生稻(Oryza officinalis)和感褐飞虱品种栽培稻(O.sativa)的挥发油,并运用气相色谱-质谱法(GC/MS)对二者的化学成分进行种类和含量的比较分析。结果表明,两种植物材料的挥发油在种类和含量上存在明显差异,如,糠醛(药用野生稻7.60%栽培稻0%;2,3-苯并二氢呋喃(药用野生稻10.80%,栽培稻3.32%);4-乙烯基-2-甲氧苯酚(药用野生稻22.99%,栽培稻7.32%)。推测含量较高的糠醛、2,3-苯并二氢呋喃和4-乙烯基-2-甲氧苯酚可能是药用野生稻对褐飞虱的活性成份。     

黄皮种子提取物对斜纹夜蛾幼虫的杀虫活性及有效成分鉴定

【目的】测定黄皮Clausena lansium种子提取物对斜纹夜蛾Spodoptera litura幼虫的拒食活性,对有效成分进行分离、鉴定,并进一步测定其拒食活性、生长发育抑制活性及细胞毒性,为筛选斜纹夜蛾生态防治植物源杀虫剂提供依据。【方法】采用叶蝶法测定黄皮种子甲醇提取物及其石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水4种溶剂萃取物对斜纹夜蛾3龄幼虫的非选择性拒食活性和生长发育抑制活性;用硅胶柱层析进行石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物拒食活性成分分离;用核磁共振谱(NMR)进行拒食有效成分结构鉴定;用MTT法测定拒食活性成分对SL细胞毒性。【结果】黄皮种子甲醇提取物对斜纹夜蛾3龄幼虫具有较强的拒食活性,活性成分主要分布于石油醚相和乙酸乙酯相中;石油醚相和乙酸乙酯相经硅胶柱层析分离得10个馏分,以黄色晶体馏分2的拒食活性最强;经分离纯化及核磁共振氢谱和碳谱鉴定,黄皮新肉桂酰胺B(lansiumamide B)为主要的拒食活性成分,对斜纹夜蛾3龄幼虫48 h拒食中浓度为214.95μg/m L,同时具有较强的细胞毒性,对SL细胞48 h抑制中浓度为10.09μg/m L。【结论】黄皮种子提取物对斜纹夜蛾幼虫具有较强的拒食活性及细胞毒性,黄皮新肉桂酰胺B是主要活性成分之一,作为植物源杀虫剂开发具有较好的发展前景。     

领春木枝叶化学成分的研究

为了研究领春木(Euptelea pleiospermum Hook.f.et Thoms)的化学成分,利用各种柱色谱及高压液相色谱等方法进行分离和纯化,根据理化性质和光谱数据分析鉴定了9个化合物。他们分别为:白桦脂酸(1);齐墩果酸(2);N-反式对羟基肉桂酰基-对羟基苯乙胺(3);N-反式阿魏酰酪胺(4);N-顺式阿魏酰酪胺(5);丁香脂素(6);N-顺式阿魏酰-3-甲氧基酪胺(7);N-反式阿魏酰-3-甲氧基酪胺(8);3-羟基-30-去甲基-20-酮基-28-羽扇豆酸(9)。所有化合物均为首次从领春木中分离得到。