凤凰木种子蛋白的分离提纯和生化性质

研究了植物凤凰木种子中的蛋白质成分,试图分离出新的核糖体失活蛋白,凤凰木种子经磷酸盐缓冲液抽提,硫酸铵分级盐析,分子筛和阴离子交换剂等多次柱层析,分离出三种组分ＤｒＩ,ＤｒⅡ和ＤｒⅢ．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＩＥＦ实验表明这三种蛋白质均达到单一纯,而ＨＰＬＣ实验则表明它们的纯度不低于９０％,它们的分子量据ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＨＰＬＣ实验分别约２３５００、２６０００、２８５蛋０．ＩＥＦ实验测得三者的等电点均     

凤凰木种子蛋白的分离提纯和生化性质

研究了植物凤凰木种子中的蛋白质成分,试图分离出新的核糖体失活蛋白凤凰木种子经磷酸盐缓冲液抽提,硫酸铵分级盐析,分子筛和阴离子交换剂等多次柱层析,分离出三种组分ＤｒⅠ、ＤｒⅡ和ＤｒⅢ．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＩＥＦ实验表明这三种蛋白质均达到单一纯,而ＨＰＬＣ实验则表明它们的纯度不低于９０％。它们的分子量据ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＨＰＬＣ实验分别约２３５００、２６０００、２８５００．ＩＥＦ实验测得三者的等电点均为５．２左右。测定了组分ＤｒⅠ的蛙卵泡裂解活性,其毒性约为天花粉蛋白的１／４０．分析了它们的氨基酸组成。估算了三种蛋白质的二级结构含量,结果表明三者均富含β折叠结构。已有的实验事实表明这三种蛋白质的生化行为明显异于核糖体失活蛋白,因而很可能不属于这一蛋白质家族。     

放射免疫和酶联免疫试剂发展动态

放射免疫分析是六十年代初期建立和发展起来的一种有效的体外诊断新技术。它主要用于肝炎、癌症、甲状腺等常见病,多发病的早期诊断并为计划生育、优生学等研究方面提供手段。放射免疫技术是借助于放射性同位素测量的高灵敏性和免疫学反映的高特异性(专一性)相结合,使它成为核医学临床诊断研究的强有力工具。     

人CLEC-2胞外段CRD重组蛋白纯化与多克隆抗体的制备和活性鉴定

人C型凝集素样受体(human C-type lectin-like receptor-2, hCLEC-2)是新克隆的Ⅱ型跨膜受体分子,研究表明,它在病毒感染,血小板活化、聚集,肿瘤转移和信号转导等方面发挥重要作用．通过制备针对其胞外段糖类识别结构域(CRD)的抗体来进一步研究该蛋白质的生物学功能及相关信号通路．构建了pET23b-CRD重组表达质粒,将其转化到大肠杆菌BL21中,用于hCLEC-2-CRD-His融合蛋白的表达,经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测表明,融合重组蛋白成功获得了高效表达,分子质量在18 ku左右．经鉴定,发现hCLEC-2-CRD-His表达于包涵体中．为获得高纯度的可溶性蛋白,将包涵体溶于6 mol/L盐酸胍,并用镍柱进行纯化．纯化后的蛋白质经过透析、再折叠后作为抗原,免疫家兔制备抗血清,抗血清经蛋白G亲合层析纯化后用Western blot等方法进行鉴定,结果显示该抗体能特异性地检测到GFP-hCLEC-2和GFP-CRD．通过使用该抗体,进一步发现,在用PMA和IL-4诱导单核细胞THP-1分化的过程中,内源性hCLEC-2蛋白水平下调,初步揭示了hCLEC-2的表达和单核细胞的分化存在一定的联系．因此,该抗体的成功制备将为进一步研究CLEC-2的生物学功能提供有利的条件．     

一种简易的向植物薄叶片内注射溶液的装置

在植物生理学实验中,有时需要将某种溶液或悬液(如抑制剂、诱导剂、病原物等)直接引入正常生长的活体叶片内。对厚实的叶片如烟草,可以直接用小的注射器注入主脉或叶肉组织内(Klement Z.,Nature1963,199:299),而对叶片很薄的禾本科植物来说则     

杠柳萃取物对小菜蛾幼虫的毒杀活性研究

以杠柳Periploca sepium Bunge的根为材料进行甲醇超声波提取,粗提物以水／氯仿（1：1,v／v）萃取获得杠柳根氯仿萃取物。测定了萃取物对小菜蛾Plutella xyllostellaL．3龄幼虫的胃毒和触杀活性。实验结果显示,在50μg／头剂量处理下24h和48h后,氯仿萃取物对小菜蛾3龄幼虫的胃毒死亡率分别为82．22％和92．59％,显著高于触杀死亡率58．89％和68．15％。这一结果表明,杠柳根中含有对小菜蛾幼虫具有较强胃毒作用的活性成分。