小麦不同类型愈伤组织及其悬浮系的原生质体培养和植株再生

小麦不同类型愈伤组织及其悬浮系的原生质体培养和植株再生侯丙凯陈际江（山东大学生物系,济南２５０１００）宋协志（莱阳农学院,莱阳２６５２００）ＰＬＡＮＴＲＥＧＥＮＥＲＡＴＩＯＮＦＲＯＭＰＲＯＴＯＰＬＡＳＴＳＯＦＤＩＦＦＥＲＥＮＴＴＹＰＥＳＯＦＷＨＥＡ...     

人微小纤溶酶原基因的克隆和表达

用PCR方法扩增人微小纤溶酶原(Microplasmingen,mPlg)基因,再与表达载体重组．构造mPlg原核表达质粒并转化大肠杆菌。阳性克隆pSSE-mPlg经温度诱导表达,SDS-PAGE等方法证明表达产物的分子量约为29kDa。占全菌总蛋白的24％左右,并在菌内形成包涵体。经半胱氨酸再氧化法和空气氧化法复性。表达产物r-mPlg经SK作用后显示纤溶活性。同时对蛋白质浓度、复性时间等因素对复性的影响进行了初步探讨。     

分子伴侣 SecB 基因和人淋巴毒素基因在大肠杆菌中的共表达

分于伴侣(Chaperohe)是细胞内催化及维持其他蛋白质正确梅象的一类蛋白质分子^[1,2]。研究表明,分子伴侣参与细胞内许多蛋白质的折叠、聚合以及跨膜运输^[3,4],通过瞬时稳定其他蛋白质折叠中间体,阻止了蛋白中间体的聚集,帮助其形成正确构象^[5,6]。SecB是一个胞质酸性蛋白．单体分子量为17kDa,在体内以4～6个相同亚基组成的寡聚体形式存在。它在大肠杆菌中参与蛋白质分泌系统,纯化后进行离体试验表明,它可以阻止抗蛋白酶的pre-MBP的出现,能稳定地结合前体蛋白．使其处于适合运输的构型^[7],它的作用是使蛋白质可以在正确折叠前跨过细胞膜,运输到细胞周质中。SecB通过与前体蛋白结合．从而阻止前体蛋自由于不正确折叠发生的聚集,属于分子伴侣家族的成员。分子伴侣的这些特性使得它们在基因工程中具有广阔的应用前景。外源蛋白在大肠杆菌中高表达时往往形成无活性的包涵体,包涵体大多是蛋白质在过量表达过程中不正确折叠形成的^[8],正确构象的形成需要在体外进行变性和复性。蛋白质的复性过程十分复杂,在方法上缺少一定的规律可循,特别是分子量较大以及二硫键较多的分子,复性更加困难,有的甚至根本难以复性。分子伴侣可以促进其它蛋白质的正确折叠,设想在基因工程中如果将分子伴侣基因与外源蛋白基因共存表达,可能会有效地促进外源蛋白形成正确的构象．提高其活性,减少包涵体的形成,对基因工程下游的处理带来很大方便。根 据这个思路,我们将克隆的SecB基因与重组人淋巴毒索(Lymphotoxin,简称LT)基因在同一个大肠杆菌细胞中共存表达,来研究分子伴侣SecB对外源基因表达的影响。     

家兔胚泡ICM在体外培养系统中的行为

一、用显微外科方法从兔早期胚泡分离来的ＩＣＭ在所用的体外培养系统中的行为,因ＩＣＭ的生长状态而不同。呈带状生长的ＩＣＭ从近端向远处延伸,而细胞的分化则从远端逐渐向近端进行,它具有明显的极性。细胞的分化秩序井然,层次分明。因此呈状生长的ＩＣＭ适艇于进行细胞分化和细胞谱系的研究。二、呈团块状生长的ＩＣＭ,没有明显的极性,细胞分化开始于团块的外表面,逐渐向中央进行,分化开始稍晚一些,速度也较慢,这种生长     

不同预处理对大麦花药3种内源激素含量和过氧化物酶活性的影响

研究了大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ Ｌ．）花药－花粉培养中不同预处理对花药内源激素（ＡＢＡ,ＩＡＡ,ＩＰＡ）含量和过氧化物酶活性的影响。结果表明：１． 经甘露醇预处理不同天数,同一种基因型的３种内源激素的变化和不同基因型的同一种内源激素的变化规律十分相似,均是在预处理初期含量急剧增加,最高值在０．５或１ ｄ 处。以后开始逐渐下降;最后,保持在一定的水平上。２． 在甘露醇预处理过程中,两种基因型花药过氧化物酶活性的变化规律也十分相似。在预处理前期（从开始到第３天）活性呈直线上升,第３天达到最大值。从第３天到第５天活性减弱。最后,活性又开始增强。３． 在低温预处理过程的初期（２～５ ｄ） 两种基因型花药过氧化物酶活性都出现第一个小峰。在第１４天（“Ｈａｒｒｉｎｇｔｏｎ”）或第２１天（“Ｉｇｒｉ”）又出现第二个峰值,但后者较高。在预处理的后期（从第２８天到第３５天）两种基因型花药过氧化物酶的活性又呈现上升的趋势。同甘露醇预处理后期变化一致     

浑球红假单胞菌的分离鉴定及其分类特征的研究

浑球红假单胞菌(Rhodopseudomonas spheroides)是一种兼性光合厌氧细菌。在细菌光合、生物固氮和生物力能学等研究中,日益受到人们的重视。它与荚膜红假单胞菌在形态和许多特征上非常相似,为了精确地进行分类,我们在前人的基础上对它们的分类特征作了较详细地分析,为浑球红假单胞菌的分类提供有用的鉴别依据。     

国产经尿道电切镜和高频发生器的使用与效果

经尿道手术(T·U·R)是目前国际泌尿科盛行的一种手术,国内由于无此仪器而施行甚少,仅限于个别具有进口设备的单位。自1982年起,上海医用光学仪器厂在上海手术器械六厂、华山医院等协作下,研制成JND—10A经尿道电切镜,现将其使用与效果总结如下:一、结构:JND—10A经尿道电切镜与高频发生器均系参考国外同类产品的特点而进行设计研制的(见图1),其有F24号镜鞘2只、F26号连续灌洗镜鞘1只、8~0观察镜1只、闭塞器2只等,可分别组成26Fr双流式、24Fr单流式、24Fr间流式三种经尿道电     

大络新妇(蜘蛛目:园蛛科)的形态特征与生物学

大络新妇是广东电白县人工阔叶混交林中的优势种。8月间产卵,孵出的幼蛛留在卵袋中越冬。翌年3月幼蛛离散。7月成熟交配。捕食对象随季节而改变。网上常有锥腹蛛寄食。大络新妇国内罕见,文内作了形态描述。     

我国黄牛属(Bos)五个种的染色体比较研究

本文应用外周血淋巴细胞短期培养方法,研究了我国黄牛属中五种牛的染色体组型,结果:黄牛(Bos taurus)2n=60;牦牛(Bos grunniens)2n=60;高峰牛(Bos indicus)2n=60;大额牛(Bos frontalis)2n=58;云南野牛(Bos gaurus readei)2n=56。并从染色体数目和形态上比较了它们之间的差异和类同。最后,从细胞遗传学角度讨论了这几种牛彼此之间杂交育种的可能性,为畜牧业上培养新的优良牛种提供了细胞遗传学的依据。     

痢疾杆菌弱毒株的选育——Ⅰ.用杂交法选育弱毒菌株的探索

利用杂交法选育痢疾杆菌弱毒株,国外已有报道,如Dupont等用大肠杆菌高频重组株W 1895与福氏志贺氏菌Ⅱ型及痢疾志贺氏菌Ⅰ型杂交,得到一些无毒的杂交株。据观察,有的免疫力虽好,但反应较强(如H株),有的反应虽小,但免疫力不够理想(如MH株),因此均未被用于预防细菌性痢疾。为了探索获得既无