小麦叶绿体基因组定点整合表达载体的构建

从小麦中分别克隆了包括rbcL基因3′端部分和完整的psaI、ycf4基因的DNA片段.利用克隆到的DNA片段作为同源重组片段、烟草叶绿体16S rRNA基因的启动子Prrn和PsbA基因的终止子PsbA3′控制筛选标记基因aadA和报告基因gfp的转录,构建了小麦叶绿体基因组定点整合表达载体pRAGY. 用该载体转化大肠杆菌,在激光扫描共聚焦显微镜下,检测到了gfp基因成功表达的产物被激发出的强烈的绿色荧光.     

定点整合抗虫基因到油菜叶绿体基因组并获得转基因植株

以基因枪法进行了油菜叶绿体基因组的定点转化,载体pNRAB携带抗壮观霉素的筛选标记基因aadA和抗虫基因cry1Aα10,基因的两侧被添加了可用于同源重组的叶绿体DNA序列,基因枪轰击过的油菜子叶柄经植株再生和壮观霉素筛选,获得了36株抗性植株,PCR检测和Southern杂交显示,其中4株的叶绿体基因组已被转化,外源基因已被定点整合进叶绿体基因组的rps7和ndhB基因之间。用转基因植株的叶片饲喂二龄小菜蛾,1周后幼虫死亡率达33%-47%,存活幼虫的生长明显减慢,转基因油菜的叶片受害较轻。     

植物基因工程表达载体的改进和优化策略

外源基因在转基因植物中表达效率低一直是令相关研究者困扰的一个问题.转基因植物的生物安全性最近在全球范围内开始引起世人的担忧.本文简要介绍了近年来在植物表达载体构建方面所采用的一些新策略,这些策略有助于增强外源基因的表达水平、提高生物工程体的安全性。 Abstract:The low expression level of foreign genes in transgenic plants is a puzzling question for researchers in plant genetic engineering.The biosafety concern is now causing a growing public wariness of transgenic plants around the world.This article reviews the new strategies currently used in construction of plant expression vector for plant genetic engineering.These strategies are important for obtaining better expression of foreign genes and developing safer transgenic plants.     

植物抗虫基因工程研究进展

植物抗虫基因工程为防治农业害虫提供了一条崭新途径。本文对植物抗虫基因工程近年来所取得的某些研究进展,包括目前已发现和利用的抗虫基因、提高抗虫基因在植物体内表达的方法以及防止或延缓害虫产生抗性的策略等方面进行了综合评述,并对植物抗虫基因工程中有待解决的问题和发展前提提出了自己的看法。     

小麦不同类型愈伤组织及其悬浮系的原生质体培养和植株再生

小麦不同类型愈伤组织及其悬浮系的原生质体培养和植株再生侯丙凯陈际江（山东大学生物系,济南２５０１００）宋协志（莱阳农学院,莱阳２６５２００）ＰＬＡＮＴＲＥＧＥＮＥＲＡＴＩＯＮＦＲＯＭＰＲＯＴＯＰＬＡＳＴＳＯＦＤＩＦＦＥＲＥＮＴＴＹＰＥＳＯＦＷＨＥＡ...     

拟南芥细胞分裂素糖基转移酶UGT76C2的N端亮氨酸替换对酶活性的影响

UGT76C2是负责细胞分裂素N-糖基化修饰的糖基转移酶,该基因对于维持植物体内细胞分裂素动态平衡有重要作用。为了进一步研究UGT76C2酶蛋白结构与催化活性的关系,本文采用定点突变方法,将UGT76C2的N端第31位的保守亮氨酸替换为组氨酸。结果发现,突变型UGT76C2在离体实验中完全丧失了对细胞分裂素的糖基化修饰活性,该突变基因的过表达转基因植物出现与UGT76C2突变体类似的表型,转基因植物体内的两类主要细胞分裂素的N-糖苷含量显著降低。实验结果证明了UGT76C2 N端亮氨酸残基对于糖基化修饰活性的重要性。     

植物抗病毒基因工程的某些现状

植物抗病毒基因工程的某些现状侯丙凯于惠敏（山东大学生物系,济南２５０１００）（山东教育学院生化系,济南２５００１３）ＣＵＲＲＥＮＴＲＥＳＥＡＲＣＨＯＮＴＲＡＮＳＧＥＮＩＣＰＬＡＮＴＳＦＯＲＣＯＮＦＥＲＲＩＮＧＶＩＲＵＳＴＯＬＥＲＡＮＣＥ￥ＨｏｕＢｉｎ...     

低温处理对小麦长期培养愈伤组织分化能力的影响（简报）

小麦幼穗愈伤组织继代6个月后分化能力大大降低．5C低温处理10d后则明显提高。低温处理后过氧化物酶同工酶的第8条酶带明显减弱,而第9条酶带则明显增强,显示其与分化可能有关。     

植物细胞分裂素的糖苷物生物活性分析

用附加细胞分裂素及其糖苷物的MS培养基,垂直培养拟南芥并测定根的伸长,以此分析细胞分裂素及其糖苷物的生物学活性的结果表明,细胞分裂素的N-糖苷物几乎完全失去细胞分裂素活性,而D-糖苷仍具有细胞分裂素活性。推测两类糖苷物对植物体内细胞分裂素活性可能有不同的调控作用。