含hup基因的质粒在催娩克氏杆菌中的稳定性及吸氢酶的表达

以质粒pKT230为栽体,亚克隆大豆根瘤菌吸氢酶结构基因(hupSL)片段,构建成嵌合质粒pKH1。将质粒分配系统基因(parDE)片段和吸氢酶结构基因(hup)片段插入载体质粒pRK415,构建成质粒pRKBH。质粒pKH1、pRKBH和载体pRK415经转化和三亲本杂交,得到DH5α/pHR11、DH5α/pRKBH、E1201/pKH1、NG13/pKH1(NGH999)、NG1390/pRK415、NG1390/pHR11、NG1390/pRKBH和NG1390/pKH1(NGH982)等接合子。稳定性分析发现,质粒pKH1在催娩克氏杆茵中传80代后仍有92％以上的菌株含此质粒,说明质粒pKH1有较高的稳定性。吸氢酶活性分析表明,H     

毛萼田菁茎瘤菌(Azorhizobium caulinodans)吸氢活性缺陷株的筛选及特性

利用转座子Tn5随机插入突变法,从毛萼田菁茎瘤菌（Azorhizobiumcaulinodans）中筛选得到两株吸氢活性缺陷突变株（Hup-）R－49和R－309,其固氮酶活性也大大降低,约为野生型固氮酶活性的6％～8％。以带有Bradyrhizobiumjaponicum的5．9kb的hup基因的质粒pHR11为探针与A．caulinodansORS571和B.japonicum122DES（Hup＋）的总DNA进行分子杂交,放射自显影表明,A．coulinodans基因组含有与B.japonicum的hup基因同源的DNA片段,将携带B．japonicumhup基因的嵌合质粒pHR11与A.caulinodansHup-突变株进行体内遗传互补,接合转移子吸氢酶活性可以恢复至野生型的60％,同时固氮酶的活性亦有所提高。     

puc启动子上游DNA二元对称序列突变对Rhodobacter sphaeroides氧调节的影响

为了鉴定ｐｕｃＢＡ基因表达受氧调控的顺式调节位点,通过ＰＣＲ和多聚核苷酸定点、突变的体外操作,在ｐｕｃ转录子５＇上游非编码区产生了７个不同突变和５个不同１０ｂＰ缺失序列。构建了含有各种顺式突变的ｐｕｃ上游区、ｐｕｃ启动子和报告基因ｌａｃＺ的转录融合子。通过融合子β－半乳糖苷酶活性分析,发现位于ｐｕｃ启动子上游二元对称结构的突变使得ｐｕｃ基因在有氧条件下去阻遏表达。ＩＨＦ束缚位点的突变可使β－半乳糖苷酶活性提高。     

含吸氢酶基因（hup）嵌合质粒的构建和吸氢酶活性在阴沟肠杆菌中的表达

以质粒ｐＲＫ４０４为载体亚克隆含大豆根瘤菌吸氢酶结构基因（ｈｕｐ）的片段,构建成嵌合质粒ｐＨＲ１１、ｐＨＲ４和ｐＨＲ１０。通过三亲本杂交将这些嵌合质粒导入无吸氢活性的Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ２４１菌株（Ｈｕｐ－）,均获得Ｈｕｐ＋的接合子。利用启动子检测质粒ｐＭＰ２２０证明,在ｈｕｐ对结构基因上游１．２ｋｂ内存在ｈｕｐ启动基因片段。以ｐＲＫ２０１３为助质粒可将ｐＨＲ１１导入Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｃｌｏａｃａｅ和Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｏｘｙｔｏｃａ等土壤固氮菌株。本文以接合子Ｅ．ｃｌｏａｃａｅＥＨ１１１３为例,通过对基因组ＤＮＡＳｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析证明,嵌合质粒ｐＨＲ１１在ＥＨ１１１３中稳定贮存和复制。Ｈ２诱导接合子ＥＨ１１１３吸氢酶活性高表达,吸氢活性与放氢活性比值约为对照的两倍。当以延胡索酸为电子受体时,吸氢酶的吸氢作用支持菌株固氮酶活性的提高。     

浑球红细菌谷氨酰胺合成酶基因（glnA）及PⅡ蛋白基因（glnB）的序…

测定了浑球红细菌的ｇｌｎＡ和ｇｌｎＢ基因ＤＮＡ序列,共２７０７ｎｔ。其中ｇｌｎＡ基因编码区为１４０１ｎｔ,编码４６７个氨基酸;ｇｌｎＢ基因编码区为３３６ｎｔ,编码１１２个氨基酸。ＤＮＡ序列的Ｇ＋Ｃ百分含量为６５％,它们的密码子第三位ＧＣ利用率高灰８９．１％。     

浑球红假单胞菌的分离鉴定及其分类特征的研究

浑球红假单胞菌(Rhodopseudomonas spheroides)是一种兼性光合厌氧细菌。在细菌光合、生物固氮和生物力能学等研究中,日益受到人们的重视。它与荚膜红假单胞菌在形态和许多特征上非常相似,为了精确地进行分类,我们在前人的基础上对它们的分类特征作了较详细地分析,为浑球红假单胞菌的分类提供有用的鉴别依据。     

Replacement of bacteriopheophytin in reaction centers fromRhodobacter sphaeroides RS601 with plant pheophytin

In the presence of acetone and an excess of exogenous plant pheophytins, bacterio-pheophytins in the reaction centers from Rhodobacter sphaeroides RS601 were replaced by pheophytins at sites HA and HB, when incubated at 43.5℃ for more than 15 min. The substitution of bacteriopheophytins in the reaction centers was 50% and 71% with incubation of 15 and 60 min, respectively. In the absorption spectra of pheophytin-replaced reaction centers (Phe RCs), bands assigned to the transition moments Qx (537 nm) and QY (758 nm) of bacteriopheophytin disappeared, and three distinct bands assigned to the transition moments Qx (509/542 nm) and QY (674 nm) of pheophytin appeared instead. Compared to that of the control reaction centers, the photochemical activities of Phe RCs are 78% and 71% of control, with the incubation time of 15 and 60 min. Differences might exist between the redox properties of Phe RC and of native reaction centers, but the substitution is significant, and the new system is available for further     

植物脱镁叶绿素替代RS601反应中心中的细菌脱镁叶绿素的研究

在一定的温度和丙酮的协同作用下,植物脱镁叶绿素a可置换紫细菌RS601光合反应中心的细菌脱镁叶绿素而形成含有植物脱镁叶绿素的紫细菌光合反应中心(简称Phe a RC).当协同作用15和60min时,反应中心的细菌脱镁叶绿素分别被替代了50%和71%.在Phe a RC中,细菌脱镁叶绿素的QX(537nm)和QY(758nm)特征峰显著下降,而出现植物脱镁叶绿素的QX(509/542nm)和QY(674nm)特征峰.排除温度和丙酮的影响,替代时间为15或60min的Phe a RC的光化学活性分别为对照的78%或71%,其电化学特性也有所变化.     

荚膜红细菌的分离鉴定及其协同固氮作用

从上海南汇县的水稻根系中分离得到一株光合固氮菌ＳＤＨ２,经形态、细胞膜结构、生理生化等特征的分析鉴定,以伯杰细菌鉴定手册第九版和ＪＦＩｍｈｏｆｆ的光合硫细菌和绿硫细菌的生理学和分类^［１］一文为依据,确定该菌为荚膜红细菌Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒｃａｐｓｕｌａｔｕｓ。同时,发现该菌与水稻根表的其它固氮菌之间具有协同生长和协同固氮效应。     

影响Klebsiella oxytoca固氮酶和氢酶活性的生理条件

联合固氮菌在自然界广泛存在,它在提供土壤和作物氮源上起着一定的作用。近年来发现Klebsiella oxytoca参与水稻联合共生体系,但对该菌固氮生理特征的研究则相当缺乏。作为资料性的工作,本文对K.oxytoca NG13固氮酶和氢酶活性表达的生理条件作了分析,为应用研究以及深入进