离子束注入法诱变选育耐高糖衣康酸高产菌株

采用20keV不同剂量的低能氩离子束和氮离子束注入土曲霉T730,选育出耐高糖衣康酸高产菌株HA8。该菌株可以在蔗糖初始浓度为15％和20％的培养基中摇瓶发酵4～5d,产酸率分别达到9．2％和11．5％,糖酸转化率分别达到61．3％和57．5％,比出发菌株1．730的产酸率提高了74％。     

葡聚糖酶高产菌株的诱变筛选及其摇瓶发酵条件的初步研究

从土壤中分离出的一株产葡聚糖酶酶活31 U／ml的野生菌株,经UV、^60Co、LiCl诱变筛选后得到了产葡聚糖酶高产菌株SB126,经发酵条件优化试验后检测其酶活达到85U／ml,较野生菌株提高了近两倍。葡聚糖酶摇瓶较适发酵条件为：装量30ml(250m1)、转速180r／min、pH7．0、温度30℃、接种量8％、发酵周期5d。     

分子酶工程的研究进展

随着基因工程和蛋白质工程的进展和应用,酶工程在分子水平上的研究与应用也得到了迅猛发展。本着重介绍了酶基因克隆与异源表达、酶分子的定向改造和进化、融合蛋白与融合酶、酶的人工模拟(抗体酶、分子印迹技术)和端粒酶,综述了分子酶工程的研究进展、趋势及其应用。     

绿色荧光蛋白在枯草芽孢杆菌WB600中的表达

根据绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的特性,将GFP作为目的基因,与穿梭载体p HY300PLK结合,构建一个芽孢杆菌WB600的蛋白表达体系,为在枯草芽孢杆菌中表达其他蛋白提供了一定的技术和理论支持。本文结合p HY300PLK的克隆位点,设计gfp基因的引物,PCR扩增后回收的gfp基因片段进行双酶切,与相同双酶切的pHY300PLK连接获得pHY300PLK-GFP,通过电转化将pHY300PLK-GFP转化至芽孢杆菌WB600中并检测。获得转化子WB1,检测到转化子在荧光显微镜下显示绿色荧光,且后续测序检测表明重组质粒构建成功。     

血管内栓塞治疗已破裂后交通动脉瘤的临床研究

目的:探讨已破裂后交通动脉瘤的血管内栓塞介入治疗的临床疗效.方法:对73例血管内介入栓塞治疗已破裂后交通动脉瘤患者资料回顾分析,观察临床治疗效果.结果:所有患者均成功栓塞,获100％栓塞35个(47.9％),95％栓塞24个(32.9％),90％栓塞13个(17.8％),80％栓塞1个(1.4％),发生并发症6例(8.2％),术后随访未见复发病例(0.0％).结论:已破裂后交通动脉的血管内介入栓塞治疗是一种微创、安全、有效的方法.     

观赏性昆虫在园林绿化中的运用

在通常的城市绿地系统规划中,植物类型的选择和配置一般仅考虑其改善生态环境方面的效应。不同的植物群落上生活着不同的昆虫群落。在昆虫群落中,观赏性昆虫,譬如蝴蝶、蟋蟀和萤火虫等,则可作为一种新兴的生态景观应用于绿化中,可形成动态的景观。本文通过对崇明地区的观赏性昆虫类群调查及其与植物关系的理论分析,提出了适合崇明地区的观赏性昆虫造景方案,提供了营建生态小区的新思路。     

Cloning and biological comparison of Restin, a novel member of Mage superfamily

In the present study, a new member of melanoma associated antigens (Mage), named Restin (219 amino acids), was identified from HL-60 cell induced by all-trans-retinoic acid (ATRA) by PCR-based subtractive hybridization. Bioinformatics analysis found this novel gene shares high homolog with Necdin (a neuronal growth suppressor, 49%). Both of them are basic proteins. Moreover, the Restin, Necdin and Mages are in one protein superfamily. This fact indicates that the Restin and Mages are mutually related but functionally different. Further analysis found that they can be divided into two subgroups, the acid and the basic. Restin, Necdin and Mage-D1 have an alkaline conserve region (PI is from 8.6 to 10.1), which are not or less expressed in tumor tissues but mostly in normal tissues. It has been reported that Necdin can arrest the cell proliferation by interaction with p53 and E2F1. Therefore, all of them are probably related to arrest the cell cycle. However, the Mage A and C are primarily acid proteins (PI is from 4.2 to 4.9), not expressed in normal tissues but in tumors. It is quite probable that these proteins are involved in the cell proliferation. We therefore suggest that these two protein families might be a pair of control elements of cell cycle--"in cycle or out of cycle".     

随机十肽库的构建及血管形成素结合肽的筛选

将合成的含有随机序列（NNK）₁₀的寡核苷酸片段,克隆入噬菌体呈现载体噬菌粒pCANTAB5E的SfiⅠ,NotⅠ位点,即cpⅢ蛋白信号肽与成熟肽之间,电转化E.coli TG1,构建了噬菌体表面呈现的十肽库,实际库容为3.53×10⁷,插入率为66.7%.经辅助噬菌体M13KO7超感染后,获得滴度为4.8 ×10¹¹ pfu/ml的噬菌体上清.经过两轮panning筛选和富集,从构建的随机十肽库中筛选到26个具有血管形成素结合活性的重组噬菌体克隆,对其中12个阳性噬菌体克隆的短肽序列进行了分析,ELISA检测结果显示12个阳性噬菌体克隆都能够与血管形成素特异性结合.     

蓝藻抗病毒蛋白-N衍生物的克隆、发酵与纯化

蓝藻抗病毒蛋白-N( Cyanovirin-N,CVN)能特异性与病毒表面糖蛋白结合,抑制病毒进入宿主细胞及抑制病毒感染细胞与未感染细胞的融合.通过分子设计及优化,在CVN的N-末端连接了5个氨基酸的柔性多肽(GGGGS),构建了SUMO-L5-CVN融合表达系统.SUMO-L5-CVN在大肠杆菌BL21中呈可溶性表达;通过表达条件优化,以0.5 mmol/L IPTG在20℃诱导24h 是最佳的诱导表达条件;SUMO-L5-CVN表达量占菌体总蛋白的30％;经Ni-NTA亲和层析获得融合蛋白SUMO-L5-CVN,SUMO蛋白酶酶切,以及进一步从Ni-NTA亲和层析获得的目的蛋白L5-CVN蛋白纯度＞98％.结果表明,低浓度的L5-CVN与流感病毒表面糖蛋白gp120就有较高的亲和力.     

血清唾液酸和超敏C反应蛋白与高血压前期的关系及临床意义

目的:探讨血清唾液酸(SA)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)与高血压前期的关系及临床意义。方法:将160例2012年10月至2014年9月于我院进行体检者分为正常血压组、高血压前期组和高血压组,分别测量所有研究对象的血压、身高和体重,检测所有对象同一天的血清SA、hs-CRP、血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、三酰甘油(TG)和空腹血糖(FPG)水平,采用多元线性回归方法探究血清SA和hs-CRP水平对收缩压(SBP)和舒张压(DBP)的影响。结果:三组间的DBP、SBP、BMI、SA、hs-CRP、TC、LDL、HDL和FBG水平差异均具有统计学意义(P0.05),其中BMI、SA和hs-CRP水平随着血压升高逐渐上升,而HDL水平逐渐下降(P0.05);TC和LDL水平仅高血压组高于正常血压组,高血压前期组与正常血压组的TC和LDL水平差异无统计学意义(P0.05);多元线性回归发现:BMI、SA、hs-CRP和FBG均与SBP成正相关,BMI、SA、hs-CRP和LDL均与DBP呈正相关。结论:血清SA与hs-CRP水平均与血压值呈现独立正相关,可作为高血压前期的评估指标。