应用多重PCR技术检测性器官异常患者的性别决定基因

采用针对人SRY基因及X与Y染色体同源序列的两对引物进行多重聚合酶链反应技术检测204例新生儿脐血DNA,男性均显示590bp、 355bp及280bp 3条扩增带,女性只有590bp1条扩增带,性别鉴定准确率为100%。又检测47例性器官异常患,13例社会性别为女性者只出现590bp扩增带,与核型性别结果一致。 34例社会性别为男性者中,有2例SRY基因检测结果阴性,只出现590bp带,核型为46,XX,证明这两例患者社会性别不相符,经病理证实后应诊断为女性假两性畸形。 Abstract:This investigation adapted multiplex PCR technique with two pairs of primer to determine sex according to the human SRY gene and X,Y chromosome analogical sequence.We detected bellybutton blood DNA from 204 newborns.Male revealed three bands:590bp,355bp and 280bp,and females only had one band which was 590bp,the accuracy of sex determination was 100%.47 sexual abnormal patients were tested.The results showed that 13 cases,whose social sex were female,had one 590bp band which consistent with their chromosome type sex.In the rest 34 cases,whose social sex were male,2cases showed,on the contrary,only one 590bp band and their chromosome type were 46,XX.This proved that the two patients did not consistent with their social sex,and pathological analysis showed that they were female pseud-hermaphroditism.     

七重呼吸道病毒液相芯片核酸检测技术的初步建立

由呼吸道病毒引起的疾病严重威胁着人类的生命健康，为了建立一种快速高通量的呼吸道病毒核酸检测方法，本研究将多重PCR技术同液相芯片技术结合起来，针对呼吸道合胞病毒A型和B型、乙型流感病毒Victoria系和Yamagata系、甲型流感病毒H1型和H3型以及新冠病毒等常见的七种呼吸道病毒，初步建立了七重呼吸道病毒液相芯片核酸检测技术，评价了方法的特异性、敏感性和重复性，并使用来自安徽省疾控的25份临床急性期样本核酸对方法进行验证。结果显示，建立起的基于液相芯片多重核酸检测方法可特异性识别七种目标呼吸道病毒的靶基因序列，与包括副流感病毒在内的9种非目标呼吸道病毒无交叉反应。对七种病毒核酸进行十倍稀释液相检测，其中H3、BV、RSVB可以检出10²拷贝/μL,BY、RSVA和SARS-CoV-2可以检出10³拷贝/μL，对H1的检测限为10⁴拷贝/μL。25份样本核酸检测结果与实际相符。结果表明，本研究建立的七重呼吸道病毒液相芯片核酸检测技术具有特异性强、敏感性高、稳定性好等特点，可用于临床样本的快速检测，为呼吸道类传染病的液相...     

一类分数阶微分方程边值问题的多重正解

应用Guo-Krasnosel’skii不动点定理得到了边值问题(1)正解的存在性,利用锥不动点等定理证明一类分数阶微分方程边值问题(1)多重正解的存在性,推广了文献[1]的结果.     

BALB/c小鼠多重耐药鲍曼不动杆菌肺部感染模型的建立和评估

本研究旨在构建小鼠多重耐药鲍曼不动杆菌肺部感染模型，评估模型小鼠各项炎性指标的变化特征，为研究多重耐药鲍曼不动杆菌的体内致病性提供参考。首先采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)检测拟建模用鲍曼不动杆菌的毒力基因分布特征，然后通过感染秀丽隐杆线虫筛选建模菌株。结果显示，A5株携带更多的毒力基因，致病性也更强，被选为建模菌株。给小鼠注射环磷酰胺建立免疫抑制，雾化吸入A5株菌液(高、低密度组)，监测小鼠状态、肺组织改变、肺组织和肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中菌落计数、外周血白细胞和中性粒细胞计数、细胞因子等的变化。结果显示，感染A5株的小鼠较对照组状态更差，肺充血水肿，肺组织和BALF中出现鲍曼不动杆菌增殖。与低密度组相比，高密度组小鼠外周血白细胞和中性粒细胞增加更明显(白细胞F＝78.630，P＝0.000；中性粒细胞：F＝4.762，P＝0.053)。与对照组相比，感染A5株的小鼠血清白细胞介素6(interleukin 6，IL-6)水平升高并趋于稳定(F＝14.382, P＝0.001)，而肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α，TNF-α)水平持续升高(F＝4.558，P＝0.032)，高密度组与低密度组TNF-α变化趋势不完全一致。结果提示，本研究成功构建了小鼠多重耐药鲍曼不动杆菌肺部感染模型，且模型小鼠出现了明显的感染症状，接种菌量与小鼠感染程度呈正相关。     

恶性肿瘤合并血流感染患儿的临床特点及病原菌分析

目的 探究恶性肿瘤合并血流感染（BSIs）患儿的临床特征、病原菌分布、病原菌耐药情况及并发脓毒症的危险因素。方法 回顾性分析2016年12月至2021年8月苏州大学附属儿童医院收治的103例恶性肿瘤合并BSIs患儿的临床资料与实验室检查数据。分析不同种属病原菌的分布及耐药情况，并采用单因素与多因素Logistic回归分析筛选出并发脓毒症的危险因素。结果 我院恶性肿瘤合并BSIs患儿以急性淋巴细胞白血病居多（63.11%）；血培养病原菌以革兰阴性菌为主（60.55%），常见病原菌依次为大肠埃希菌（19.27%）、肺炎克雷伯菌（12.84%）、金黄色葡萄球菌（11.93%）。革兰阴性菌对碳青霉烯类、氨基糖苷类药物敏感率较高；革兰阳性菌对万古霉素、利奈唑胺和替考拉宁均保持了良好的敏感性。合并脓毒症患儿的年龄、qSOFA评分（≥2分）、Pitt菌血症评分、C-反应蛋白水平及多重耐药（MDR）细菌感染发生率均显著高于未发生脓毒症患儿（均P<0.05）。此外，qSOFA评分（≥2）和MDR细菌感染是促使恶性肿瘤合并BSIs患儿发生脓毒症的独立危险因素。结论恶性肿瘤患儿并发BSIs的病原菌以革...     

大口黑鲈微卫星多重PCR体系及3个群体的遗传分析

为开展大口黑鲈(Micropterus salmoides)种质评估和遗传分析提供便捷的研究手段,试验筛选了扩增效果好、具有多态性的18个微卫星位点,构建了6组3重PCR体系。随后将多重PCR体系应用于大口黑鲈3个群体(美国群体USA、“优鲈1号”YLO和杂交子代HYB)的遗传分析。结果显示,各位点的等位基因数(N_a)、有效等位基因数(N_e)、观测杂合度(H_o)、期望杂合度(H_e)和多态性信息含量(PIC)分别介于3—14、1.622—5.841、0.333—0.806、0.385—0.833和0.361—0.810,其均值分别为7.722、3.056、0.577、0.626和0.579。剔除2个偏离Hardy-Weinberg平衡位点的分析显示,YLO的遗传多样性水平最低,HYB的平均观测杂合度最高(H_o=0.743),其余多态性指标均在USA中呈现最高值。USA与YLO间的Nei’s遗传距离最远(0.362),HYB与USA和YLO间的Nei’s遗传距离分别为0.112和0...     

多重检测的临床前景

在无数的药品开发和转化型研究应用中，用于多靶点生物标记同时测量的多重检测法体现出巨大的潜力。即使是刚刚起步，这种检测方法也可以促进人类健康并对先天和后天的不足进行弥补。     

碳汇、社区和生物多样性 重建多重效益的森林

国际能源组织称：去年全球能源领域的二氧化碳排放上升了创纪录的5%,如果这种情况持续下去将是世界末日。利用多重效益的理念进行森林恢复,是缓解气候变化危机有效的途径。     

2019年辽宁省3例输入性三日疟基因型别实验室诊治与分析

对辽宁省2019年的3例境外输入性三日疟疟疾病例进行了实验室检测与诊断分析。 收集并进行流行病学调查与资料汇总。根据疟疾实验室现有最新执行诊断标准《疟疾的诊断》（WS259-2015）的要求，对临床诊断的疑似三日疟患者采集抗凝血制作血涂片镜检、进行疟疾快速诊断检测（RDT），上送全血到辽宁省疾病预防控制中心进行病例复核，巢氏PCR检测并进行测序比对。3份病例患者外周血血涂片镜检薄厚血膜，虫体分期主要为环状体期、大滋养体期、配子体期和成熟裂殖体期，其中大滋养体期中疟色素呈深棕色、较大、沿边缘分布，发现寄生的红细胞通常不胀大甚至会缩小，配子体小而圆，根据镜下特点初步判定为三日疟原虫；RDT结果提示为感染除恶性疟以外的其他3种疟疾（三日疟、卵形疟、间日疟）的单一感染，省级参比实验室对于上送全血利用巢氏PCR检测技术进行复核检测；将扩增出的三日疟的目的片段产物序列送至上海维基基因测序公司进行序列分析比对，基因序列同源性达到了100%。 同时使用血涂片镜检、进行疟疾快速诊断检测（RDT）和PCR进行检测，实验结果均鉴定为三日疟，根据病例的流行病学调查和临床表现确定为境外输入性三日疟病例。