胰岛素类似物的内源萤光光谱

为了进一步了解胰岛素构象与功能的关系,测定了不同条件下胰岛素和它的类似物的内源萤光光谱,胰岛素类似物包括去B链羧端五肽胰岛素,去B链羧端七肽胰岛素和去B链羧端八肽胰岛素。它们的发射光谱的峰在306nm,激发光谱峰在277nm。不同pH值,不同浓度的十二烷基硫酸钠和温度变化对胰岛素的荧光光谱的影响和对类似物的影响非常相似。说明这些类似物的环境酪氨酸残基的微环境是相似的。由于去五肽胰岛素有接近于天然胰岛素的生物活力,去七肽胰岛素没有生物活力,因此说明,胰岛素分子的受体结合部位中,B_(24～25)两个苯丙氨酸侧链本身具有重要的地位。并不是因为失去它们后引起胰岛素构象变化而失活的。     

紫外照射诱发的大白菜病毒圆二色性变化

大白菜病毒(CCV)生理盐水溶液pH3.1～4.8时的紫外区圆二色性(CD)呈现一种不寻常的性质。在234nm或221nm光照射下,在相应波长的椭圆值先较快地变大,然后缓慢地变小。被光照改变了结构的病毒在200～300nm范围里的CD谱的特点为在231～230nm和205nm附近各有一个强正峰。     

胰岛素类似物的内源萤光光谱

为了进一步了解胰岛素构象与功能的关系,测定了不同条件下胰岛素和它的类似物的内源萤光光谱,胰岛素类似物包括去B链羧端五肽胰岛素,去B链羧端七肽胰岛素和去B链羧端八肽胰岛素。它们的发射光谱的峰在306nm,激发光谱峰在277nm。不同pH值,不同浓度的十二烷基硫酸钠和温度变化对胰岛素的荧光光谱的影响和对类似物的影响非常相似。说明这些类似物的环境酪氨酸残基的微环境是相似的。由于去五肽胰岛素有接近于天然胰岛素的生物活力,去七肽胰岛素没有生物活力,因此说明,胰岛素分子的受体结合部位中,B_(24～25)两个苯丙氨酸侧链本身具有重要的地位。并不是因为失去它们后引起胰岛素构象变化而失活的。     

兔小肠刷状缘膜蔗糖酶—异麦芽糖酶复合体的圆二色光谱研究

在磷酸钾缓冲液中,pH6.8,25℃时,S-I酶复合体的近紫外CD谱显示280～281nm的负峰,293～294nm的正峰。在288,269,和263nm处有3个肩膀。溶液pH值变化和对此酶的热失活处理都能使280～281nm负峰缩小,可能表示酪氨酸残基微环境和酶活力有关。S-I酶复合体的远紫外CD谱显示较大的215nm负峰和较小的192nm正峰,表示其骨架构象以β-折迭和无规卷曲为主。此远紫外CD谱在pH2.3～11范围里维持不变,也不受55℃热失活处理的影响。Na~+和tris对此酶CD谱不产生影响。高浓度盐酸胍能改变其近紫外和远紫外CD谱形。     

近年来蛋白质类激素研究的概况

关于多肽和蛋白激素(以下简称蛋白激素)的研究,大体上以胰岛素的发现为标志划分为两个时期。在胰岛素被发现以前可认为是整体研究时期,以观察内分泌腺对整个机体的影响为主;从二十年代初发现胰岛素以来,着重于从腺体中分离、纯化激素,进而测定它们的结构、研究结构和功能的关系。及人工合成、晶体结构的测定等,即所谓离体研究的时期。随着医学、     

胰岛素作用原理的研究 Ⅵ.胰岛素片段与胰岛素受体的相互作用

研究了用胰凝乳蛋白酶限制性酶解和化学合成方法所获得的若干胰岛素片段与脂肪细胞胰岛素受体的结合。它们在低浓度时几乎观察不出与胰岛素受体结合,而在高浓度时除五肽HTyr·Thr·Pro·Lys·AlaOH外都有明显的专一性结合。说明它们具有部分与胰岛素受体的结合部位。与前文关于胰岛素结合部位设想是一致的。讨论了胰岛素结合部位的性质,并讨论了五肽HArg·Gly·Phe·Phe·TyrOH加强胰岛素与其受体亲合力的可能性。     

胰岛素类似物的直线聚合

与胰岛素相似,去B链羧端五肽胰岛素(DPI)及去B链羧端八肽胰岛素(DOI)的酸性溶液于沸水浴中加热,会转变成粘度很高的溶液,该溶液具有流动双折射性质。于电子显微镜下观察,看到该两种类似物的纤维。这些纤维与胰岛素纤维相似,经常由几根微丝绞合成螺旋状。微丝的直径大约是30,与胰岛素微丝的直径相当。上述现象说明,这些类似物的直线聚合过程与胰岛素者是类同的。因此胰岛素B链羧端肽段并非胰岛素直线聚合所必须。     

Asn-Ala-Gly-Ala及Asn-Ala-Gly-Ala-Asn在溶液中的构象—远紫外圆二色性

用远紫外圆二色性研究了四肽Ash-Ala-Gly-Ala和Asn-D-Ala-Gly-Ala-NH_2及五肽Asn-Ala-Gly-Ala-Asn的构象。在低pH的水溶液中,五肽给出一正一负的峰,正的在215nm,负的在232.5nm。[θ]_(215)随pH的关系类似滴定曲线。推想此时呈β-转角。在近中性或碱性水溶液中,圆二色谱只有195nm的负峰,因此呈无规卷曲。pH5.8时加乙醇或三氟乙醇至90%,五肽给出218nm附近的负峰。设想此时分子呈类β-折迭。NAGA给出215nm附近的正峰,但没有负峰。讨论了此分子呈现β-转角的可能性。NDAGA只有在196nm附近的负峰,因此推测它具无规卷曲。潘小平等报道,上述肽都有镇痛作用,看来这种作用与分子的立体结构无关。     

NMR法研究天花粉蛋白T14肽片段的溶液构象

本文报道用１ＨＮＭＲ法测定Ｔ１４肽在ＤＭＳＯ（ＭＳ１４）,Ｈ２Ｏ（ＨＯ１４）,５０％甲醇（ＭＥ１４）和５０％六氟异丙醇（ＦＰ１４）中的溶液构象。通过ＮＯＥ效应,偶合常数,Ｈ／Ｄ交换速率表征和定位二级结构和疏水域,计算两面角φ和螺旋形成几率。结果表明序列Ｓｅｒ９～Ｔｌｅ１７在ＨＯ１４中较为有序,存在强流水作用。推测是类似螺旋样的亚稳结构;而在ＤＭＳＯ中序列ＳＡＬＳＫＱ存在形成α－螺旋结构的可能性,且六氟异丙醇（ＨＦＰ）促进α－螺旋的稳定性,并综合分析Ｈ２Ｏ,ＤＭＳＯ,ＭｅＯＨ和ＨＦＰ４种溶剂对Ｔ１４肽二级结构形成的作用。     

天花粉蛋白小结构域N端TCS182—200同源片段的构象研究

以天花粉蛋白小结构域Ｎ端ＴＣＳ１８２－２００同源片段序列为基础,设计Ｔ１４,Ｔ１８和ＴＤＫ３个模型肽。本文分析了模型肽的肽链柔性和侧链两亲性,预测二级结构形成势,并通过多肽固相合成和圆二色性研究模型肽的溶液二级结构,比较理论预测和实测结果。在水溶液中,Ｔ１８为β－折叠,ＴＤＫ含有一定量α－螺旋;而Ｔ１４基本上为无规卷曲,但在碱性条件下有类似螺肇的亚稳结构存在。