人骨钙素蛋白在毕赤酵母中表达条件的优化

目的:在已构建的人骨钙素蛋白p PIC9K-BGP表达载体的基础上,进行表达条件优化,提高其表达含量,为研究其对2型糖尿病的作用机制奠定研究基础。方法:将前期构建的p PIC9K-BGP载体转入毕赤酵母中,以人骨钙素试剂盒鉴定不同诱导剂浓度、不同诱导温度和不同诱导时间对蛋白表达量的影响。结果:在诱导温度28℃、加入0.5%的甲醇诱导、诱导时间为96h时获得较高的分泌性蛋白的表达量。结论:优化了骨钙素在毕赤酵母中的表达条件,提高了表达量。     

杜仲叶中绿原酸醇提法的工艺研究

杜仲,又名胶木,为杜仲科植物,自身含有丰富的绿原酸。绿原酸,又称咖啡鞣酸,是一种提取于植物的化学物质,绿原酸是一种重要的生物活性物质,能够抑制细菌、病毒,增高白血球,保护肝胆,预防肿瘤,降低血压、血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用。主要应用于防治癌症方面,不过现代研究也使绿原酸应用的更为广泛。     

论制药工艺项目质量的控制

本文通过对我国制药工艺项目质量的分析,总结出我国现阶段制药工艺项目中存在的质量问题,并针对这些问题进行探讨,从原材料,药品生产人员,生产设备等具体方面提出有针对性的解决方法,促进制药工艺项目的蓬勃发展的同时,更促进了社会和谐稳定发展。     

纳豆激酶基因的优化设计、合成及其在烟草叶片中的瞬时表达

根据植物偏爱密码子优化设计、合成纳豆激酶基因sNK,利用重叠延伸PCR法在其中插入番茄果实特异性表达基因E8的第一内含子构成sNKi基因,通过农杆菌渗透法将这两种基因渗入到烟草NC89叶片中并实现瞬时表达。通过RT-qPCR法将两种基因在烟草叶片中转录水平的表达量进行比较,结果表明两种基因在烟草叶片中均表达,且sNKi基因的表达量显著高于sNK基因;通过纤维蛋白平板法在两种基因的瞬时表达样品中均能检测到纤溶酶活性,表明目的基因在烟草叶片中可正常翻译并表现出溶栓活性,且sNKi基因在翻译水平的表达量显著高于sNK基因。表明内含子对人工合成的纳豆激酶基因的瞬时表达具有显著的促进作用。     

产脂肪酶黑曲霉摇瓶发酵条件优化研究北大核心CSCD

黑曲霉Aspergillus niger G62s是一株具有遗传稳定的高产脂肪酶菌株。针对于G62s摇瓶发酵条件进行统计学优化研究,以提高该菌株的产脂肪酶能力。首先,采用单因素方法对发酵接种量、摇瓶装量、培养温度、培养时间等因素进行考查,在此基础上进行4因素3水平的响应面分析(Response surface methodology,RSM)的统计学优化。得到的优化发酵条件是接种量1.9%,摇瓶装量56 m L(500 m L摇瓶),培养温度30 oC,培养时间75 h。在该优化条件下,脂肪酶活性达到(212 9±39.9)U/m L,相比初始的发酵条件提高16.7%。针对于影响G62s菌株产脂肪酶的4个发酵条件,在单因素实验的基础上通过RSM方法优化,显著提高了目标菌株脂肪酶产量。     

改善大肠杆菌衍生型重组双层轮状病毒样颗粒的特性与保护效力

<正>在中高等收入的国家中有效的轮状病毒活疫苗在资源有限的地方的婴儿中却免疫原性和有效性较差。病毒样颗粒(VLP)是轮状病毒疫苗研究有希望的途径,但大规模的VPL生产仍旧是个挑战。此研究用大肠杆菌表达轮状病毒的衣壳VP2和VP6蛋白,通过纯化后的组装工艺高效的组装成同源单层VP6-VLPs或双层VP2/6-VLPs有(d12/6-VLPs),d12/6-VLPs有较好的热稳定性和抗原性。虽然     

垃圾微生物除臭剂的筛选、复配及其培养条件的优化

为了获取作为除臭微生物制剂的候选菌株,从垃圾渗滤液中分离筛选了4株具有对硫化氢和氨气高效降解菌株,分别标记为CC3、CC7、CC13和CC16。通过形态、生理生化和16S rDNA序列分析,分别鉴定为乳酸片球菌（Pediococcus acidilactici）、巨大芽胞杆菌（Bacillus megaterium）、嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）、粪产碱杆菌（Alcaligenes faecalis）,并确定复配菌剂的除臭能力。实验结果表明：菌株CC7、CC13和CC16组成的复配组合除臭效率最优,其最佳复配比例为1:1.5:0.5,接种量为5%,培养温度为30 ℃,初始培养基pH值为6.5,培养时间为60 h时,对氨气和硫化氢的去除率为最大值,可达到83.56%和70.25%。     

正交试验优化天麻超声波提取工艺的研究

为了优化天麻素的提取工艺,本研究采用超声法提取天麻素,以天麻素含量为指标,在单因素筛选基础上,采用正交试验优化提取工艺,选择料液比、提取次数和提取时间3个影响因素,每个因素3个水平进行正交试验。结果表明,最优提取工艺组合为:提取时间20min、料液比1∶15和提取次数2次;按照此工艺平行制备3批样品,天麻素的提取率为(0.339±0.13)%。     

住院医师临床基本技能培训模式的优化与应用效果

目的 探讨住院医师规范化临床基本技能培训模式的优化措施,并评价其应用效果。方法 对上海长海医院2012年参加上海市规范化培训的医师140人进行调查问卷、并统计其临床基本技能考核成绩及出站率。2013年对教学内容、基础条件建设、师资管理、教学方式、考核体系和激励制度等6个方面进行优化。2014年再次对参加上海市规范化培训的医师150人进行调查问卷,同时统计其临床基本技能考核成绩及出站率。将2012年及2014年调查问卷结果、考核成绩及出站率进行比较。结果 2012年收集有效问卷116份, 2014年收集有效问卷134份。两组学员在性别、年龄、学历及培训学科等方面无统计学差异（P＞0.05）。将2014年的调查问卷结果与2012年比较,发现规培学员对基地及轮转科室理论讲课的不满意率由33.6%降低到了13.4%,对基地及轮转科室临床思维和技能培训的不满意率由34.5%降低到了15.7%,对基地及轮转科室出科考核的不满意率由28.4%降低到了18.7%（P＜0.05）。2014年培训学员基本技能考核成绩及出站率较2012年明显提高。结论 住院医师规范化临床基本技能培训模式的优化明显提高了住院医师的临床基本技能,全面提升了住院医师的临床实践能力,取得了良好效果。     

应用基于粒子群优化的支持向量机算法识别真核生物基因的RNA聚合酶II启动子序列

启动子是调节基因表达的重要元件,对其的研究对于阐明基因转录调控机制具有重要意义。作者依据RNA聚合酶Ⅱ启动子序列特性选取高效的特征提取方法,构建了基于粒子群优化的支持向量机(particle swarm optimization-support vector machine,PSO-SVM)新方法,用以识别真核生物基因RNA聚合酶Ⅱ启动子。结合5-折交叉检验方法,得到启动子-外显子、启动子-内含子和启动子-基因间序列的分类准确率分别为97.1%、96.7%和98.8%,其马修斯相关系数分别为0.962、0.934和0.976。结果说明,对比其它启动子识别方法,PSO-SVM方法更能有效地识别真核生物基因启动子。