长江口水域中华鲟幼鱼与6种主要经济鱼类的食性及食物竞争

根据2004年6月至8月和2005年6月至8月在长江口崇明岛东滩水域插网所获取的鱼类样本,对东滩水域中华鲟(Acipenser sinensis)幼鱼和其它6种主要经济鱼类的食性、食物竞争状况进行了研究。结果表明:中华鲟、窄体舌鳎(Cynoglissus gracilis)为底栖生物食性;中国花鲈(Lateolabrax maculatus)为游泳生物食性;刀鲚(Coilia ectenes)和凤鲚(Coilia mystus)为浮游动物食性;鲻(Mygil cephalus)和鮻(Liza haematochiela)为腐屑(有机碎屑)食性。中华鲟幼鱼及6种主要经济鱼类食性按照相对重要性指标(IRI)大小排列:中华鲟(IRI):鱼类端足类多毛类蟹类;窄体舌鳎(IRI):虾类瓣鳃类鱼类;中国花鲈(IRI):鱼类虾类等足类蟹类;刀鲚(IRI):糠虾类虾类桡足类鱼类;凤鲚(IRI):糠虾类桡足类虾类鱼类;鲻(IRI):有机碎屑底栖藻类瓣鳃类桡足类;鮻(IRI):有机碎屑底栖藻类瓣鳃类桡足类。长江口崇明东滩中华鲟与6种经济鱼类饵料重叠系数显示,中华鲟与窄体舌鳎的饵料重叠系数达到了0.4,而与其余5种鱼类的饵料重叠系数均小于0.12。这表明窄体舌鳎对中华鲟幼鱼的食物有一定的竞争力,其余5种鱼类对中华鲟幼鱼的食物竞争强度较低。     

鲤Pdcd6ip蛋白真核表达载体的构建及抗病毒功能研究

为进一步研究程序性细胞死亡6互作蛋白Pdcd6ip (Programmed cell death 6-interacting protein)分子功能, 探讨其表达对鲤春病毒血症病毒 (Spring viraemia of carp virus, SVCV)增殖的影响, 研究通过逆转录-聚合酶链式反应扩增得到两端带有Nhe I和EcoR I酶切位点的pdcd6ip编码片段, 并将其克隆至真核表达载体pCI-neo上, 构建了真核表达质粒pCI-pdcd6ip。获得的过表达质粒转染至EPC细胞后进行RT-qPCR和western blot检测Pdcd6ip的表达情况, 并利用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响。细胞转染后24h进行SVCV感染, 检测Pdcd6ip过表达对SVCV增殖的影响。结果显示, Pdcd6ip蛋白真核重组质粒能够在EPC细胞中大量表达, 转染后72h细胞活性较对照组无显著差异。同时, 免疫荧光、RT-qPCR和western blot检测结果均显示, Pdcd6ip蛋白过表达后, SVCV M蛋白mRNA水平和蛋白表达水平较对照组显著下降, 表明Pdcd6ip过表达显著抑制了SVCV的增殖。研究为抗SVCV药物的研发提供了新的研究基础和设计思路。     

化学诱变剂和^60Co处理对大麦小孢子低氮胁迫培养的影响

以大麦品种‘花30’为材料,用不同剂量化学诱变剂（EMs和PYM）处理大麦游离小孢子,不同剂量^60Co辐照处理大麦离体穗和干种子,比较其对在低氮胁迫下小孢子培养诱导愈伤组织产量和绿苗分化数量的影响。结果表明,EMS处理离体小孢子和^60Co辐照干种子明显比PYM处理小孢子和^60Co辐照离体穗的培养效果好。     

不同饵料和水温对口虾蛄成活、生长及育肥性能的影响

为比较不同饵料、水温对口虾蛄(Oratosquilla oratoria)在越冬期间生长育肥及性腺发育的影响,选用当年池塘养殖口虾蛄[初始体重(21.99±4.86)g,n=600]为研究对象,在养殖设施相同条件下,研究了在自然水温(7.7～13.6℃)和加温(17.1～20.9℃)条件下投喂去壳蛤蜊(Ruditapes philippinarum)和冰鲜杂鱼对口虾蛄的成活率、体长、体宽、体重、性腺指数、肌肉指数及可食率等7项指标的影响。实验共分常温蛤蜊、常温冰鲜杂鱼、加温蛤蜊和加温冰鲜杂鱼4个实验组,实验周期为90 d。结果显示:(1)加温可使口虾蛄成活率显著降低,温度是影响口虾蛄越冬成活的重要因素之一;(2)在整个实验过程中口虾蛄的体长、体宽和体重3项生物学指标均随实验天数的增加呈增长趋势,但各指标不同时间均不存在显著性差异(P 0.05);(3)常温条件比加温条件更有益于口虾蛄性腺指数的增加,其中以常温投喂去壳蛤蜊的效果最好,其性腺指数平均可达14.53%(♀)和7.69%(♂);(4)在整个实验过程中,口虾蛄的肌肉指数随实验进行总体呈上升趋势,除常温蛤蜊与加温蛤蜊实验组间的口虾蛄可食率存在显著性差异(P 0.05)外,其他各实验组两两之间均不存在显著性差异(P0.05);(5)不同饵料和水温的交互影响结果表明,温度是影响口虾蛄性腺指数的重要因素(P 0.01),饵料仅对雌性口虾蛄性腺指数产生显著性影响(P 0.01)。实验结果表明,相对于加温环境,常温环境基本能满足口虾蛄越冬期间的生长和育肥的需求,特别是在10～13℃的水温条件;与冰鲜杂鱼相比,摄食去壳蛤蜊更有利于口虾蛄的性腺发育积累。     

猪流行性腹泻病毒流行株S蛋白高变区B细胞线性表位肽的鉴定

【背景】对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)经典毒株与流行毒株S蛋白氨基酸序列比对显示,变异位点主要集中在S蛋白的N端。【目的】鉴定PEDV流行毒株S蛋白高变区(S10A,1-496 aa)的B细胞线性表位肽,特别是流行毒株特异性B细胞表位肽。【方法】以SDS-PAGE割胶纯化大肠杆菌表达的PEDV流行株SD2014 S蛋白高变区片段(S10ASD2014),免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体;在E. coli中谷胱甘肽巯基转移酶(Glutathione S-transferase,GST)融合表达覆盖S10ASD2014序列全长且彼此重叠8个氨基酸残基的系列16肽。以制备的抗S10ASD2014多抗为一抗,通过Western blot筛选系列16肽中的阳性反应性16肽,鉴定S10ASD2014上的B细胞线性表位肽;利用抗PEDV经典毒株(CV777)S蛋白高变区片段(S10ACV777)多抗血清鉴定S10ASD2014上的保守性B细胞线性表位肽。【结果】重组表达的S10ASD2014相对分子质量约为72 kD;纯化的S10ASD2014表位肽能被PEDV阳性血清识别。制备的抗S10ASD2014多抗可以识别PEDV DR13弱毒株。利用抗S10ASD2014血清和抗S10ACV777血清从61个GST融合表达的16肽中鉴定到28个阳性反应16肽,其中13个为2种血清共同识别16肽。对24株PEDV不同亚群代表毒株的对应区域进行同源性分析表明2个阳性16肽为保守性表位肽。【结论】确定了PEDV流行株SD2014 S蛋白高变区的B细胞线性表位肽,B细胞线性表位肽,特别是流行毒株特异性表位肽的确定有助于了解S蛋白的结构与功能,为建立以表位为基础的PEDV感染检测方法打下良好基础。     

杭州湾北部安氏白虾的繁殖生物学特征

采用2017年4月至2018年3月张网逐月采样数据分析杭州湾北部安氏白虾（Palaemon annandalei）的繁殖生物学特征。结果显示,安氏白虾体平均体长（32.0 ± 5.4）mm（14 ~ 51 mm,n = 3 210）,抱卵群体平均体长（36.3 ± 3.4）mm（27 ~ 51 mm,n = 375）。体重分布范围为0.016 ~ 1.700 g,n = 3 210,平均体重（0.565 ± 0.282）g,抱卵群体体重分布范围为0.400 ~ 1.700 g,n = 375,平均体重（0.868 ± 0.225）g。雌、雄个体间平均体长和平均体重都具有显著性差异（P < 0.01）;雌雄性比为1.27︰1,雌性个体数显著多于雄性个体数（P < 0.01）。繁殖期从4月下旬一直持续至10月下旬,6月和8月为两个繁殖旺期,抱卵率（B）和性比（S）具有显著线性相关关系（P < 0.05）,关系式为B = 41.80S﹣21.06（R2 = 73.9）。绝对繁殖力为17 ~ 179粒,平均绝对繁殖力（60 ± 26）粒,平均相对繁殖力（70 ± 24）粒/g,n = 375。绝对繁殖力（FA,单位粒）与体长（L,单位mm）、体重（W,单位g）均呈二次函数显著相关（P < 0.01）,关系式分别为FA = 0.29L2﹣18.52L + 342.67（R2 = 76.8）和FA = 97.32W2 ﹣100.75W + 71.66（R2 = 94.5）。卵长径分布范围为1.090 ~ 2.688 mm,平均长径（1.599 ± 0.158）mm,短径分布范围0.807 ~ 1.992 mm,平均短径（1.141 ± 0.118）mm,n = 2 787。研究表明,与20世纪80年代相比,安氏白虾个体朝小型化方向发展,繁殖周期延长,繁殖旺期由单峰型变为双峰型,这可能是生态环境持续恶化和高强度捕捞压力所致。     

聚乙二醇-4000对暗纹东方鲀肠上皮电生理的影响

以暗纹东方鲀(Takifugu obscurus)为研究对象,采用Ussing chamber技术研究了聚乙二醇-4000(PEG-4000)对肠上皮开路电压、短路电流(Isc)、短路电流变化("Isc)、电导(G)、跨膜电位(TEP)的影响。结果表明:PEG-4000在肠道中6 h残留浓度为1.83 g·L-1,显著高于其在水中浓度(P0.05),残留率达184%; PEG处理组暗纹东方鲀离体肠上皮Isc为69.20μA·cm~(-2),显著低于对照组(P0.05);ΔIsc显著低于对照组(P0.05),仅为对照组的68.57%; PEG处理组暗纹东方鲀离体肠上皮电导为24.97 m S·cm~(-2),显著低于对照组(36.22 m S·cm~(-2))(P0.05); PEG-4000在暗纹东方鲀肠道中极易残留、不易渗透,使得肠道上皮的转运蛋白或者离子通道受阻,从而显著影响肠上皮Isc、"Isc以及电导,降低了离子的主动流动量。本研究结果为鱼类肠道电生理平台的构建提供了技术参数,该平台不仅能用于评估PEG等污染物对鱼类肠道的影响,还能用于鱼类肠道上皮细胞离子转运机制的研究。     

猪流行性腹泻病毒ORF3蛋白40–91 aa是其细胞质定位的关键结构域

ORF3蛋白是猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)基因组编码的唯一的辅助蛋白,与病毒毒力相关。为确定PEDV ORF3细胞质定位信号,文中构建了系列PEDV DR13wt ORF3蛋白全长或截短肽重组表达载体,转染Vero细胞并利用激光共聚焦显微镜分析与EGFP融合表达的全长ORF3蛋白和其系列截短肽在细胞内的分布。结果表明,全长ORF3蛋白或所有包含2个跨膜域的40–91 aa基序的ORF3截短肽均只定位于细胞质中,而不包含40–91aa基序的ORF3截短肽分布于整个细胞中(细胞质和细胞核均有分布)。这表明40–91 aa是猪流行性腹泻病毒ORF3蛋白细胞质定位的关键结构域。PEDVORF3蛋白细胞质定位结构域的明确为进一步研究其细胞内转运和生物学功能提供了参考。     

海水鱼趋光特性的电生理研究——Ⅲ.鲐鱼视顶盖诱发电位的一般特性和光谱敏感性

1.记录和分析了鲐鱼中脑视顶盖诱发电位(VETP)。波形基本特征同淡水鱼。2.在暗视条件下,光强和振幅间关系无简单规律可循,但峰潜伏期和光强关系满足关系式log(IT)=αlogⅠ+β,其中IT 为峰潜伏期;Ⅰ为刺激光强;α、β为常数。在明视时,此关系式在一定光强范围内依然成立。3.不同强度明适应时和暗适应过程中峰潜伏期的变化表明,决定峰潜伏期的主要因素是刺激光强,和网膜的适应状态关系不大。4.VETP 的暗适应曲线和ERG 的相同。5.VETP 暗视光谱敏感曲线和杆细胞视色素吸收光谱吻合得很好,提示在暗视条件下VETP 单一地反映了杆细胞的活动。在背景光强达4.07微瓦/平方厘米(角膜水平),短波段相对敏感度降低,长波段升高,但峰值并未向长波段位移。结合ERG 的结果推测,在更高背景光强时发生光谱敏感性的浦肯野位移是可能的。     

野生及人工养殖中华鲟幼鱼肌肉营养成分的比较

对野生及人工养殖中华鲟幼鱼的肌肉营养成分和营养品质进行了分析比较.结果表明:野生中华鲟幼鱼肌肉中水分、粗蛋白和粗灰分含量均显著高于人工养殖中华鲟(P＜0.05),而粗脂肪含量显著低于人工养殖中华鲟(P＜0.05).野生和人工养殖中华鲟幼鱼的氨基酸组成基本一致,均含有18种氨基酸,必需氨基酸指数(EAAI)分别为72.02、66.21,其构成比例符合联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)的标准.脂肪酸中二十碳五烯酸(EPA)与二十二碳六烯酸(DHA)的含量野生中华鲟显著高于人工养殖中华鲟(P＜0.05),分别为22.99%、7.15%.矿物质含量丰富,微量元素含量野生中华鲟明显高于人工养殖中华鲟[动物学报 53(3):502-510,2007].