转基因小鼠的研究

编码人生长激素的结构基因(hGH)与编码小鼠金属硫蛋白的基因启动子(MT一1)融合,用显微注射法将此融台基因导入小鼠受精卵的原核中,共注射了121个受精卵、将卵移入11只假孕母鼠的输卵管中,11只母鼠中的7只生了43只小鼠。在小鼠的饮水中加入锌(zn。+)可诱导基因表达。小鼠长到30天时开始称体重、每隔10天记录体重、并与同时出生的对照小鼠体重比较。第一代雄性小鼠体重较对照组重、统计学分析有明显差异。小鼠长到三个月,切尾制备DNA,DNA斑点杂交法和Southern杂交法检测基因整合情况,43只小鼠中有18只有融合基因整合。用Northern、杂交法检测转录的人生长激素mRNA。用这三种方法同样检测了第二代和第三代小鼠,发现融合基因能代代相传,而后代小鼠的表型只在个别小鼠中保留下来。绝大多数转基因小鼠后代的体重减轻。用带人生长激素基因或不带人生长激素基因的小鼠做双亲,进行不同组合的交配,所得到的后代也不相同。     

猪基因组文库的构建及其生长激素基因的分离

本工作以长白猪为材料,分别用Charon28及EMBL3为载体,构建了猪的基因组文库。用牛生长激素基因为探针对基因文库进行筛选,由两个基因文库中各获得一个阳性克隆λPGH1,λPGH2。其后,以质粒pUCl9为载体对λPGHl进行了亚克隆。通过对亚克隆pPGH的酶切图谱及其Southern杂交结果的分折表明,在pPGH中含有完整的猪生长激素基因。     

影响哺乳动物细胞核移植因素的分析

细胞核移植(nuclear transplatation)是克隆具有相同遗传基础的优秀家畜的有效方法。在不远的将来,它可能成为一个广泛应用的生物技术。这一生物技术,可以使一群体内的优秀个体迅速增殖,导致快速的遗传改良,在一个繁殖周期内,获得大量与亲本遗传性状完全一致的复制子代。同时,细胞核移植又是研究哺乳动物早期胚胎发育及细胞分化过程中的基因表达与调控,不同细胞周期内,细胞核与细胞质的相互关系及其作用机理等理论问题的理想手段。在对几种哺乳动物(如小鼠、兔、羊和牛等)进行的具有开拓性研究实验中,已经显示出,哺乳动物细胞核移植作为克隆动物的一项生物技术,是进行科学研究的重要手段,并有可能投入商品化。然而,目前只有20～40％通过细胞核移植后重组的胚胎能够发育成形态学正常的桑椹胚或囊胚,能够发育产仔的就更少。这说明存在一     

3β,20α-羟基甾体脱氢酶的动力学性质

3β,20α-羟基甾体脱氢酶(3β,20α-Hydroxysteroid dehydrogenase,3β,20α-HSD)是从胎羊血中分离得到的。分子量为35kD。该酶以NADPH为辅酶,有两种底物。以孕酮为底物时,Km=30.8μmol/L,Vmax=0.7nmol min~(-1)(nmol enzyme)~(-1);以5α-二氢睾酮(5α-Dihydrotestosterone,5α-DHT)为底物时,Km=74μmol/L,Vmax=1.3nmol min~(-1)(nmol enzyme)~(-1)。5α-DHT竞争性抑制20α-还原活性,Ki=102μmol/L。16α-溴代乙酰氧基(16α-Bromo acetoxyprogesterone,16α-BAP)是3β,20α-HSD不可逆竞争性抑制剂,t_(1/2)=75min。对3β和20α还原活性的抑制常数Ki分别为23μmol/L和58μmol/L。     

鲤鱼,鲫鱼和鲤鲫移核鱼DNA的复性动力学研究与比较

才文报道鲤鱼、鲫鱼DNA复性动力学研究结果。它们均由快、中、慢速复性3个组份构成。鲤鱼DNA中Cot<1×10(-1)的复性组份占7.5％,1×10(-1)1×10~2的复性组份占75％;鲫鱼DNA中Cot<5×10~(-1)的复性组份占22％;5×10~(-1)1×10~2的复性组份占70％。它们都没有明显百分数的迥折序列组份;快速复性组份的拷贝数低于10~6,相当于中度重复序列1;中、慢速复性组份则分别为中度重复序列Ⅱ和原拷贝序列。在快速复性部份,鲤鱼与鲫鱼之间表现出较大差异。此外,本文还就鲤鱼和鲫鱼的DNA复性动力学与鲤鲫移核鱼(cyc(?))F_3进行了比较。鲤鲫移核鱼DNA的复性动力学特征与其细胞核供体鱼(即鲤鱼)是相似的。这说明异源细胞核与胞质的结合没有导致核内DNA基因组结构出现明显变化。     

兔卵母细胞体外成熟和体外受精的研究

用贴壁和悬浮生长二种培养系统,分析发情兔血清、滤泡液和激素对体外培养的兔卵母细胞的成熟、原核形成和发育能力的影响,并分析了不同浓度的激素对兔卵母细胞的作用。在贴壁生长的培养系统,滤泡液和激素对卵母细胞有明显的促成熟作用。但用这种卵母细胞体外受精,其原核形成率和发育率都较低。但在体外培养8小时后转移到体内受精,其原核形成和发育率大大提高,三者差别不大。在悬浮培养系统,卵母细胞成熟率、及体外受精后原核形成和发育率都远比贴壁生长的高,尤以原核形成率更甚。兔卵母细胞对激素的耐受力很小,以含FSH(2μg)、LH(1μg)、E_2-17B(1μg)和PRL组合的培波和含低hCG(7IU)的较适宜,高中浓度的FSH、LH和hCG都有促使卵母细胞变性和老化的作用。文中还讨论了二种培养系统不同的机制。     

细鳞鱼精巢超微结构和精子发生

细鳞鱼Brachymystax lenok(Pallas)精巢为叶型;支持细胞(Sertoli cell)和Leydig细胞具有典型内分泌细胞的一些结构特征;A型精原细胞的细胞器是区域性分布,精原细胞线粒体的发育与拟染色质 (chromatoid bodies)有关;生精细胞(spermatogenic cell)核膜孔由均匀排布最终演变为区域性聚集。重复注射绒毛膜促性腺激素(hCG)可促进雄鱼性成熟;精子质量受到多种因素的影响。     

转录因子NF—КB／ⅠКB

可与kappa基因相结合的核因子NF-κB(nuclear factor-kappa gene binding)是研究得最为广泛的转录因子之一。该因子由Baltimore等人首先在B淋巴细胞发现,后来发现它广泛存在于其他类型细胞中。NF-κB具有如下特征:对外界信号的刺激反应迅速,控制广泛的基因表达,在免疫及炎症反应中起中心作用以及在胚胎发育中充当信号分子。本文就NF-κB/IκBα的结构、调节和功能作一综述。     

蛋白激酶与植物逆境信号传递途径

蛋白质的可逆磷酸化是细胞信号识别与转导的重要环节,蛋白激酶主要催化蛋白质的磷酸化作用,植物中已发现并分离了大量蛋白激酶及其基因,它们介导了植物激素和胞外环境信号等引起的多种生理生化反应。文章着重介绍分裂原激活蛋白激酶（MAPK）、钙依赖而钙调素不依赖的蛋白激酶（CDPK）、受体蛋白激酶（RPK）、核糖体蛋白激酶和转录调控蛋白激酶等多种蛋白激酶在植物逆境信号识别与转导中的作用。