酶解天山马鹿血分离制备抗疲劳肽的研究

本文选用木瓜蛋白酶水解天山马鹿血,制备具有抗疲劳活性的多肽,并测定其抗疲劳活性,并对具有活性的多肽进行进一步的分离制备.结果:确定最佳的酶解工艺条件为温度52℃;pH值为7.4;酶与底物浓度比(E/S)为9;底物浓度([S])为8%.选取3种水解产物(1组、2组、3组)进行小鼠负重游泳实验.结果表明:含水解产物的1组能使小鼠游泳力竭最长时间达到250 min(P＜0.001),第2组、第3组和空白对照组为114、82和77 min;在相同游泳时间40 min内,第1组肌乳酸含量比对照组减少44.9%;体内肝糖元消耗量减少38.4%,表明:第1组木瓜蛋白酶水解产物(水解度19.8%)能够明显延长小鼠游泳时间,增强运动耐力,具有显著的抗疲劳作用.     

胃蛋白酶和木瓜蛋白酶水解核桃蛋白工艺研究

以核桃粕为原料,以水解度为考察指标,研究胃蛋白酶和木瓜蛋白酶对核桃蛋白的水解作用.结果表明：木瓜蛋白酶为酶解核桃蛋白最佳酶,其最佳酶解条件为底物浓度4％、酶质量分数5％、酶解 pH 值为7．0、酶解温度50℃、酶解时间4 h;在该条件下,木瓜蛋白酶酶解核桃蛋白水解度可高于25．76％.     

番木瓜乳管结构及木瓜蛋白酶的免疫电镜研究

采用免疫细胞化学方法, 以透射电镜观察, 对番木瓜（Ｃａｒｉｃａ ｐａｐａｙａ Ｌ．）乳管分化及木瓜蛋白酶生成的超微结构环境进行了研究。实验结果表明：１．正在分化的乳管细胞内质网分泌旺盛, 线粒体和聚核糖体非常丰富; 之后细胞器逐渐解体, 内质网断裂、膨胀, 细胞壁多处穿孔; 经过内膜系统的重新组合, 成熟乳管被小泡充满, 小泡内有无定形物质凝聚, 已经没有任何细胞器残留, 但原生质膜一直存在。２．经过纯化的兔抗ｃｈｙｍ ｏｐａｐａｉｎ ＩｇＧ 为第一抗体, 羊抗兔ＩｇＧ－金复合物（１０ ｎｍ 直径）为间接抗体, 进行适当的免疫标记反应, 发现金颗粒主要在乳管细胞内, 附近的薄壁细胞及导管只是偶尔出现金标, 说明免疫标记的特异性较强, 通过各种对照试验, 证明了非特异性吸附相当微弱。显示木瓜蛋白酶的原初生成部位是正在分化的乳管细胞的内质网, 它暂时贮存于分泌泡, 随乳管的发育和乳汁其它成分一起被“组装”为乳汁小泡而充满成熟乳管     

环氧基高分子磁性复合微球固定化木瓜蛋白酶的研究

研究以甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)为单体,二甲基丙烯酸乙二醇酯(EDMA)为交联剂,聚乙烯醇(PVA)为分散剂,在Fe3O4磁性纳米粒子存在的条件下,合成了交联度为25%的磁性高分子复合微球(GMAE-DMA).并以这种微球为载体,进行了对木瓜蛋白酶的固定化研究.探讨了最佳的固定化条件如下:温度为25℃,反应时间20h,pH值为8.5,给酶量为160mg/g.同时以酪蛋白为底物,研究了固定化酶的酶学性质,结果表明:固定化酶对不同pH值环境的耐受力、热稳定性和操作稳定性都有较大幅度的提高.实验证明这种高分子磁性复合微球是一种优良的固定化酶载体.     

植物存在抗冻基因

2003年,恐怕最让人难忘的一个词就是 SARS 了。虽然那场瘟疫似乎已经风平浪静了,但如果不保持应有的警惕心,谁能保证不会卷土重来呢?目前,世界上许多研究人员仍在对 SARS 病毒进行着深入的研究。美国芝加哥伊利诺斯州大学和另外两个科研机构的研究人员破解了 SARS 病毒中类木瓜蛋白酶的三维结构。类木瓜蛋白酶对所有和上呼吸道感染有关的冠状病毒的复制与感染至关重要,除去这种酶可以终止病毒引     

响应曲面法制备蛹虫草子实体酶解液的研究

为了将蛹虫草开发成为便于人们食用的产品形式,本实验以不同的酶对蛹虫草进行水解得到蛹虫草酶解液.以水解度和酶解液中腺苷含量为目标,确定选用木瓜蛋白酶.以水解度为响应指标,应用响应曲面法对蛹虫草酶解条件进行优化,根据Box-Behnken中心组合实验设计原理,选取酶解温度、酶解时间、加酶量三因素三水平进行中心组合实验,响应曲面分析结果表明水解最佳条件为:酶解温度60.92℃,酶解时间11.85 h,加酶量1.02％,此条件下蛹虫草的水解度达到最大.水解度验证值61.27％与预测值60.76％接近,说明建立模型正确.     

骨髓间充质干细胞移植对木瓜蛋白酶和钴60照射所致肺气肿大鼠肺泡壁细胞凋亡的影响

目的：观察大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对木瓜蛋白酶和钴60照射所致的肺气肿大鼠肺泡壁细胞的凋亡以及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响,初步探讨骨髓MSCs移植改善木瓜蛋白酶和钴60照射所致肺气肿的机制。方法：雌性Lewis大鼠随机分为正常对照组、肺气肿组和肺气肿＋MSCs移植组。观察移植28 d后肺组织形态学变化;采用DNA缺口末端标记法（TUNEL）检测肺泡壁细胞的凋亡;免疫组化法检测Bcl-2蛋白、Bax蛋白在肺泡壁细胞中的表达。结果：肺气肿组、肺气肿＋MSCs移植组均出现肺气肿改变,但肺气肿＋MSCs移植组较轻 肺气肿＋MSCs移植组肺组织平均内衬间隔、平均肺泡面积明显低于肺气肿组（P〈0.01）,而肺泡细胞数明显高于肺气肿组（P〈0.01） TUNEL结果显示肺泡壁细胞凋亡指数在肺气肿组、肺气肿＋MSCs移植组大鼠明显高于正常对照组,肺气肿＋MSCs移植组肺泡壁细胞凋亡指数明显低于肺气肿组（P〈0.01） 免疫组化结果显示肺气肿＋MSCs移植组Bcl-2染色阳性细胞百分比高于肺气肿组（P〈0.01）,肺气肿＋MSCs移植组Bax染色阳性细胞百分比明显低于肺气肿组（P〈0.01）,肺气肿＋MSCs移植组Bcl-2/Bax比值高于肺气肿组。结论：骨髓MSCs移植之所以改善木瓜蛋白酶和钴60照射所致肺气肿,可能与骨髓MSCs移植抑制肺气肿大鼠肺泡壁细胞的凋亡,以及上调肺组织Bcl-2蛋白的表达和下调Bax蛋白的表达有关。     

乙醇溶液对木瓜蛋白酶催化活性的影响

研究了乙醇溶液对木瓜蛋白酶水解酪蛋白的催化活性及构象的影响。结果表明,木瓜蛋白酶在一定浓度乙醇溶液中水解酪蛋白的活性有显著上升。动力学测定表明木瓜蛋白酶在乙醇溶液中米氏常数（Km）下降。差示光谱显示,在乙醇溶液中木瓜蛋白酶的二级结构发生了变化。荧光发射光谱表明,木瓜蛋白酶在乙醇溶液中发射峰位几乎没移动,但发射强度明显增高。     

酪蛋白酶解物的抗氧化活性研究

研究了酪蛋白酶解物对DPPH、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除效果,同时用还原法研究了其抗氧化活性.结果表明,酪蛋白酶解物在体外具有较强的抗氧化能力.木瓜蛋白酶酶解物和胃蛋白酶酶解物对DPPH、超氧阴离子自由基、羟基自由基的清除能力强于胰凝乳蛋白酶酶解物和胰蛋白酶酶解物.胰凝乳蛋白酶酶解物和胰蛋白酶酶解物的还原能力强于木瓜蛋白酶酶解物和胃蛋白酶酶解物.     

酶解法提取甘薯茎叶中可溶性膳食纤维的研究

通过单因素以及正交实验来探讨脂肪酶、淀粉酶和木瓜蛋白酶的加入对提取甘薯茎叶中水溶性膳食纤维的影响,并在单因素基础上对提取工艺进行正交优化,得出酶法提取的最佳工艺条件是脂肪酶添加量为0．015 g·100 mL-1,淀粉酶添加量为0．035 g·100 mL-1,木瓜蛋白酶添加量为0．075 g·100 mL-1,其中正交实验中影响因素为淀粉酶＞蛋白酶＞脂肪酶.水溶性膳食纤维的最佳提取率为1．285％.提取得到的甘薯茎叶中水溶性膳食纤维纯度高,持水力为787％,溶胀力为4．10 mL·g-1,产品具有良好的性状.