排龈线对牙体楔状缺损患者炎症反应及悬突的预防效果

目的:探讨排龈线技术对牙体楔状缺损患者行充填修复术后发生悬突和炎症反应的预防作用。方法:选择我院收治的100例龈下牙体楔状缺损患者,根据治疗方式不同分为研究组和对照组。研究组采用排龈线技术对牙体楔状缺损排龈后以复合树脂充填,对照组对牙体楔状缺损常规处理后以复合树脂充填。观察并比较两组患者牙体楔状缺损的修复效果、悬突发生率,以及充填体颊侧龈沟液中天冬氨酸转氨酶(AST)的水平变化。结果:治疗后,两组患者AST水平均较治疗前升高,但研究组AST水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);研究组充填体脱落率及边缘不密合率均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);对患者随访1年,研究组悬突发生率低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:排龈线技术可有效减少牙体楔状缺损患者牙周组织炎症反应,降低悬突的发生率,值得临床推广应用。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒N基因和流感病毒HA基因的联合表达及应用

参照已公布的流感病毒血凝素基因(HA基因)及猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因组序列,设计并合成一对引物P1、P2,以RT-PCR方法扩增出PRRSV的ORF7片段(约410bp),其中含HA基因主要核苷酸序列(33bp)。用BamH Ⅰ、Xho Ⅰ分别对扩增出的片段及pET32a质粒进行酶切,连接后构建了重组质粒pETHN并转化到BL21(DE3)宿主菌中诱导表达。用纯化后的表达产物与流感病毒血凝素单抗及乳胶建立了诊断猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的乳胶凝集试验。检测结果显示:该方法有良好的特异性及敏感性,与IDEXX公司FLISA检测试剂盒符合率达93.8％。     

猪瘟病毒保护抗原E2和猪IgG重链基因的合成及其表达蛋白

根据已发表文献及DNAstar软件分析 ,选取双拷贝Shimen株猪瘟病毒E2基因A ,D区和猪IgG重链中可与SPA非特异性结合的区域作为目的基因进行串联表达。根据GenBank发表的序列 ,Primer5 0软件的辅助下分别设计三对引物 ,并在扩增第二条和第三条片段的上游引物 5′端分别设计一个长 5个氨基酸的Linker,将扩增的三片段串联克隆入原核表达载体pET 32a中 ,构建成重组质粒pET 2eh ,对重组质粒诱导表达 ,表达蛋白经纯化后标记于CowanⅠ株金黄色葡萄球菌SPA上 ,与收集的 80份待检血清进行平板凝集试验 ,结果与现有诊断试剂盒检测结果具有较好的符合性。该方法具有简单 ,快速 ,敏感 ,易于操作的特点。     

改良丝线结扎法建立大鼠牙周病模型的实验研究

目的:探讨改良丝线结扎法建立大鼠牙周病模型的可行性。方法:本实验创新一种新的手段,利用玻璃离子水门汀结合传统丝线结扎法建立大鼠牙周病模型,即在丝线结扎大鼠第一磨牙之后,在大鼠磨牙牙颈部丝线附近堆砌有黏着性的玻璃离子水门汀制造利于丝线固定的外形高点并同时稍微垫高咬合面,制造咬合创伤,加快牙周病的发生发展。结果:改良丝线结扎法建立牙周病模型的成功率为95%,相比传统丝线结扎发的65%,具有更高的成功率,模型建立更稳定,相比现有各种改良方法操作更简便易行。结论:改良丝线结扎法相比传统丝线结扎法建立大鼠牙周病模型具有更高的稳定性和成功率。     

检测猪繁殖与呼吸综合征抗体的重组N蛋白一乳胶凝集试验的建立

猪繁殖与呼吸综合征(Poreine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)于1987年首先在美国被发现,现在已经成为危害世界养猪业发展的重要传染病之一.我国已在许多地区分离到该病的病原体-猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome viruS,PRRSV),从而证实了该病在我国的流行[1～4].这些年来,本病的临诊表现及流行病学也出现了新的变化,如隐性感染及慢性感染病例显著上升,持续性感染在猪群中较为普遍.由于本病同其它引起猪繁殖障碍的疾病(如猪细小病毒病、伪狂犬病等)表现出极为相似的临床症状,并伴随混合感染和继发感染[5]增加了临床诊断的难度.所以,探索一种简便易行具有推广意义的检测方法成为本研究的方向.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒N基因和流感病毒HA基因的联合表达及应用

参照已公布的流感病毒血凝素基因(HA基因)及猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因组序列,设计并合成一对引物P1、P2,以RT-PCR方法扩增出PRRSV的ORF7片段(约410bp),其中含HA基因主要核苷酸序列(33bp).用BamH I、Xho I分别对扩增出的片段及pET32a质粒进行酶切,连接后构建了重组质粒pETHN并转化到BL21(DE3)宿主菌中诱导表达.用纯化后的表达产物与流感病毒血凝素单抗及乳胶建立了诊断猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的乳胶凝集试验.检测结果显示该方法有良好的特异性及敏感性,与IDEXX公司ELISA检测试剂盒符合率达93.8%.     

猪繁殖与呼吸综合征与伪狂犬病混合感染的分子生物学快速诊断

猪繁殖与呼吸综合征自1987年发现至今,已在世界大多数养猪国家和地区普遍存在[1,2].而伪狂犬病作为仅次于口蹄疫、猪瘟的危害养猪业的重要疫病,一直引起人们的高度重视[3,4].     

复合菌系降解玉米秸秆过程中群落演替与秸秆降解的关系

[目的] 为了获得木质素降解复合菌系LDC降解玉米秸秆的适宜条件,明确秸秆降解过程中可能发挥重要作用的功能微生物类群。[方法] 以培养温度、pH、培养基装液量和接菌量等单因素试验结果为依据,采用响应面法优化复合菌系降解玉米秸秆的培养条件,利用Miseq高通量测序技术,分析不同降解时期复合菌系的群落结构变化规律。[结果] 复合菌系对秸秆最佳降解条件为：培养温度32℃、初始pH为8.2、装液量为40%,接菌量为10%。此条件下木质素最大降解率为44.5%,相比未优化处理提高13.3%。在门水平上,变形菌门（Proteobacteria）、拟杆菌门（Bacteroidetes）和厚壁菌门（Firmicutes）是复合菌系LDC的优势菌门。在玉米秸秆降解过程中,降解初期的优势菌属为Proteiniphilum（11.9%）、Sphaerochaeta（8.4%）、Ruminofilibacter（8.4%）、Pannonibacter（6.7%）、Pseudomonas（6.1%）和Rhizobium（5.7%）;在降解高峰期时,Anaerocolumna（24.0%）、Caenispirillum（9.2%）和Thauera（7.0%）的丰度显著上升,分别是其在降解初期的16.5倍、3.0倍和5.9倍,而Ruminofilibacter（10.9%）的丰度仍然很高且排在第二位。在降解末期的优势菌属为Ruminofilibacter（25.4%）、Pseudomonas（9.7%）、Sphaerochaeta（8.8%）、Caenispirillum（8.4%）、Pannonibacter（4.3%）、Thauera（4.0%）以及Desulfomicrobium（3.4%）。[结论] 明确了玉米秸秆降解复合菌系的最佳培养条件以及在不同降解时期微生物群落结构变化规律,在玉米秸秆降解过程中发挥重要作用的微生物类群为Pseudomonas、Pannonibacter、Thauera、Ruminofilibacter和Anaerocolumna。     

检测猪繁殖与呼吸综合征抗体的重组N蛋白-ELISA的建立

将已构建成功的重组质粒pETN转化入Ecoli BL21(DE3)中,在最佳诱导条件下获得重组N蛋白。随后用His-Bind对表达产物进行纯化,对纯化效果及纯化产物的特异性分别用SDS-PAGE电泳及Western—blot试验检测。在此基础上,以纯化的重组N蛋白作为包被抗原,对各种条件进行优化(如抗原的包被,作用时间及底物的选择),确定了判定标准。建立了检测PRRS抗体的间接ELISA方法。用此方法检测了200份血清样品,并与IDEXX公司ELISA试剂盒检测结果相比较,符合率达91％。     

检测猪繁殖与呼吸综合征抗体的重组N蛋白-乳胶凝集试验的建立

The purified recombinant nuclocapsid protein of PRRSV was used to conjoined with latex,and the conjoined concentration, temperature and time were optimized, a detection method for serum antibodies against Porcine reproductive and respiratory syndrome virus was established. Some tests for the method's sensitivity, specificity and stability were confirmed. About 200 serum samples were detected by using the method, and these samples were also detected by recombinant N protein based ELISA and IDEXX ELISA kit. The result showed that the agreement ratio of the recombinant N protein based LAT with other two methods arrived at 93%. 78%. respectively.