利用发根农杆菌（Agrobacteriom rhizogenes）介导二元载体向番茄导入TMV，CMV外壳蛋白基因的研究

本文用含ＰＲｉ（ＰＲｉＡ４ｂ）的发根农扦菌为介导,将二元载体质粒ＰＢＴＣ－８（Ｔ—ＤＮＡ上有ＴＭＶ—ＣＰ和ＣＭＶ—ＣＰ基因）,导入黑龙江省当地番茄品种。用胚轴注射,顶端切口涂抹,子叶切块穿刺等方法感染转化子菌液,诱导出毛状根。滤纸电泳检测有５０％以上的毛状根含有农抒诚和甘露碱。用抗性筛选法亦获得有卡那霉素抗性的毛状根。在穿刺感染子叶切块诱导产生的具卡那霉素抗性的愈伤组织上,获得不定芽与再生植株,经冠瘿碱,ＰＣＲ,斑点免疫结合法检测证明再生植株中有ＴＭＶ和ＣＭＶ基因产物的两种外壳蛋白和农扦碱与甘露碱,获得双转化植株。     

黑麦1R染色体的显微分离、体外扩增及扩增产物的鉴定

借助Leitz显微操作器,在国产倒置显微镜下(400×)用玻璃针对处于有丝分裂中期的黑麦根尖细胞中的1R染色体成功地进行了分离。分离出来的1R染色体转入0.5 ml的Eppendorf管中,用蛋白酶K处理,把DNA释放出来;经Sau3A酶切,再与人工合成的Sau3A连接头连接;以连接头的一条链的核苷酸顺序片段为引物对DNA酶切片段进行了PCR扩增。琼脂糖凝胶电泳显示扩增产物的长度大约为300~1000 bp。以生物素分别标记的黑麦总体DNA和小麦rDNA为探针进行斑点杂交,结果表明PCR扩增产物确实来源于黑麦的1R染色体DNA。这个方法为构建黑麦1R染色体亚基因组文库和筛选1R染色体特异性探针奠定了基础。     

毛白杨叶绿体ATP合酶β亚基基因序列

1　Ｓｏｕｒｃｅ　ＴｈｅｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｔｈｅａｔｐＢｇｅｎｅｗａｓｄｅｔｅｒ ｍｉｎｅｄｆｒｏｍＰＣＲｐｒｏｄｕｃｔｏｆｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔｇｅｎｏｍｉｃＤＮＡｏｆＰｏｐｕｌｕｓｔｏｍｅｎｔｏｓａ .2　Ｎａｍｅａｎｄｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ＴｈｅｃｏｄｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｔｈｅａｔｐＢｇｅｎｅｏｆＰｏｐｕｌｕｓｔｏｍｅｎｔｏｓａｉｓ 1 497ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｌｏｎｇｔｈａｔｅｎｃｏｄｅｓ 498ａｍｉｎｏａｃｉｄｓｏｆＡＴＰａｓｅｂｅｔａｓｕｂｕｎｉｔｏｆｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔ.ＩｔｓＤＮＡ…     

利用发根农杆菌（Agrobacteriom rhizogenes）介导二元载体向番茄导入…

本文用含ＰＲｉ（ＰＲｉＡ４ｂ）的发根农杆菌为介导,将二元载体质粒ＰＢＴＣ－８（Ｔ－ＤＮＡ上有ＴＭＶ－ＣＰ和ＣＭＶ－ＣＰ基因）,导入黑龙江省当地番茄品种。用胚轴注射,顶端切口涂抹,子叶切块穿刺等方法感染转化子菌液,诱导出毛状根。滤纸电泳检测有５０％以上的毛状根含有农杆碱和甘露碱。用抗性筛选法说获得有卡那霉素抗性的毛状根。在穿刺感染子叶切块诱导产生的具卡那霉素抗性的愈伤组织上,获得不定芽与再生植株,经     

小麦6B染色体微切割及其不同片段的DNA文库构建

用Nd:YAG激光微束将处于丝分裂中期的小麦(Triticum aestivum L.)6B染色体微切割为四段,并用微细玻璃针将每个片段分别回收.将分离的染色体片段DNA用Sau3A接头介导的多聚酶链式反应(LA-PCR)分别扩增.Southem杂交证明4个特定区域的DNA确实来自于小麦基因组.用一系列(42对引物)位于6B染色体上的微卫星序列对微切割的染色体片段的PCR产物进行了验证.结果表明,获得的染色体片段的PCR产物来自于小麦6B染色体.将6B染色体4个片段的第二轮PCR产物克隆到pGET-vector中,建立了4个染色体特定区域的基因组文库,命名为R1、R2、R3和R4,分别包含2.1×105、2.74×105和2.93×105个重组子克隆.每个文库均随机挑选150个克隆进行质粒的小量制备和酶切验证.结果显示;插入片段大小在300～1800之间,平均大小为820～870bp,其中43%～48%的克隆为低/单拷贝序列,42%～47%为中/高拷贝序列.本研究为详细分析植物单染色体的不同片段的分子遗传学研究提供了基础.     

小麦ph1b突变体与小黑麦杂交的细胞遗传学研究

本文利用普通小麦品系"中国春"(对照)、中国春ph1b突变体分别与八倍体小黑麦、六倍体小黑麦杂交,杂种F1的减数分裂前期Ⅰ染色体行为表现异常,中期Ⅰ出现较多的单价体、棒状二价体和多价体,在后期和末期出现落后染色体、染色体片断和微核。原因是ph1b基因的存在造成染色体联会机制紊乱,致使一些部分同源染色体配对并发生互换,有可能在以后的世代产生染色体易位与基因重组。     

贺兰山西坡啮齿动物生境选择及种间关系

为明确对贺兰山西坡啮齿动物生境选择起关键作用的主要环境因子,探讨各鼠种之间的相互作用如何影响鼠种的生境选择,选取地理因子（海拔、坡度、坡向）、植被因子（植被盖度、植被高度、灌木/乔木高度）和其他因子（距水源距离、距道路距离、距灌木/乔木距离）等9种生境因子,利用资源选择函数模型和logistic回归模型对啮齿动物生境选择和种间关系进行分析。结果表明,在贺兰山西坡,捕获数量最多的6种啮齿动物对的生境选择存在差异,大林姬鼠（Apodemus peninsulae）偏好高海拔、多灌木（乔木）的生境;子午沙鼠（Meriones meridianus）偏好海拔较低的半荒漠稀疏生境,对道路和人为干扰不回避;灰仓鼠（Cricetulus migratorius）偏好距水源较远、多灌木（乔木）、距道路较近的生境;阿拉善黄鼠（Spermophilus alaschanicus）偏好低海拔、植被丰富的生境;短尾仓鼠（Cricetulus eversmanni）偏好高海拔、距道路较近的生境;社鼠（Niviventer niviventer）偏好海拔较高、坡度较大、距水源较远的生境。鼠种间的相互关系主要呈现回避或随机关系。研究结果有助于了解啮齿动物分布的变化及种群动态规律,可为贺兰山生物资源保护,区域性鼠害的预测、预报和综合治理提供基础资料和科学依据。     

杨树叶绿体3′rps12基因,rps7基因和ndhB基因片段的克隆及序列分析

通过烟草叶绿体相关序列设计引物 ,从杨树的叶绿体基因组中克隆出 2个相邻的DNA片段 .经分析发现 ,这 2个DNA片段包含核糖体蛋白 3′rps12、rps7基因和NADH脱氢酶第二亚基ndhB基因片段 .利用DNAMAN等软件 ,将扩增到的杨树叶绿体DNA片段与烟草、拟南芥、玉米和黑松的相关序列进行比较 ,证实所扩增的片段具有较高的保守性 ,尤其是在这 3个基因的编码区 ,同源性均在 90 %以上 .插入或缺失常发生在基因间隔区 ,同源性在 80 %左右 ;对其编码区所推导的氨基酸序列进行了比较 ,同源性均在 92 %以上 .首次克隆了杨树叶绿体的部分DNA序列 ,详细报道并分析了杨树 3′rps12、rps7基因和ndhB基因片段及其边界序列信息 .所报告的基因序列均已登录GenBank .