全文获取类型
收费全文 | 4408篇 |
免费 | 301篇 |
国内免费 | 1733篇 |
出版年
2024年 | 11篇 |
2023年 | 88篇 |
2022年 | 76篇 |
2021年 | 103篇 |
2020年 | 101篇 |
2019年 | 115篇 |
2018年 | 82篇 |
2017年 | 94篇 |
2016年 | 123篇 |
2015年 | 114篇 |
2014年 | 247篇 |
2013年 | 194篇 |
2012年 | 254篇 |
2011年 | 280篇 |
2010年 | 282篇 |
2009年 | 298篇 |
2008年 | 482篇 |
2007年 | 286篇 |
2006年 | 266篇 |
2005年 | 327篇 |
2004年 | 288篇 |
2003年 | 254篇 |
2002年 | 268篇 |
2001年 | 220篇 |
2000年 | 192篇 |
1999年 | 179篇 |
1998年 | 141篇 |
1997年 | 176篇 |
1996年 | 114篇 |
1995年 | 92篇 |
1994年 | 102篇 |
1993年 | 92篇 |
1992年 | 93篇 |
1991年 | 91篇 |
1990年 | 93篇 |
1989年 | 73篇 |
1988年 | 51篇 |
1987年 | 15篇 |
1986年 | 15篇 |
1985年 | 38篇 |
1984年 | 9篇 |
1983年 | 6篇 |
1982年 | 3篇 |
1981年 | 7篇 |
1980年 | 2篇 |
1966年 | 1篇 |
1963年 | 2篇 |
1958年 | 1篇 |
1950年 | 1篇 |
排序方式: 共有6442条查询结果,搜索用时 15 毫秒
11.
12.
目的 蛋白质纯化是医学与生物学实验教学课程中的一个重要内容,本文通过设计新的蛋白质纯化虚拟仿真教学内容,开发虚拟仿真教学系统,希望学生能够更有效率地掌握蛋白质纯化技术的要点,提升教学质量。方法 利用3D虚拟仿真技术,构建虚拟仿真实验室。结合线下教学经验,确定虚拟仿真教学中需要体现的教学内容、教学重点、核心仪器的特色、评分指标、考核方式、操作体验等。结果 本文基于3D虚拟仿真技术构建了蛋白质纯化虚拟仿真实验室,和传统教学相比,虚拟仿真教学可以提高教学效率,节省教学成本和场地占用;教学设计和虚拟仿真教学系统融合了教学、练习和考核模块,根据以往的教学经验优化了评分体系,保证学生更加有效、严谨地掌握技术细节;涵盖了全新的教学内容——荧光检测联用的分子排阻层析,添加了蛋白质层析的常用案例,保证了内容的新颖与实用;完全再现了现实实验室中仪器设备的搭建模式,实现虚拟学习与实际操作的无缝衔接。结论 蛋白质纯化虚拟仿真教学系统由虚及实,由点及面,把控细节,保证学生动手能力和探索能力的提高,学以致用,并且拥有传统教学模式不可比拟的优势。 相似文献
13.
14.
《中国生物工程杂志》2014,(3)
<正>蛋白质研讨班学员问:姜老师,您好!我是"第十二期蛋白质分离纯化技术专题研讨班"的学员,向您请教渗透冲击法破菌的问题。我把E.coli培养到OD 0.5左右,加40%蔗糖冰上10min,然后离心直接加与原箘液1,2,3,4倍体积的蒸馏水,放置观察,一直没有观察到细菌破坏。我们的蛋白是在胞浆里面的,也看了一些文献,似乎渗透冲击更适用于表达在细胞膜和细胞壁之间的周 相似文献
15.
叶绿体中色素的提取和分离实验是高中生物学中的一个经典学生实验,有助于学生了解光合作用色素的种类和作用.针对目前存在的实验历时长、演示效果不佳等问题,对实验方法、步骤进行了若干改进. 相似文献
16.
人血浆载脂蛋白E的分离及鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
17.
用亲和层析大规模纯化蓖麻毒蛋白 总被引:3,自引:0,他引:3
18.
19.
石油降解菌的分离鉴定及石油污染土壤的细菌多样性 总被引:19,自引:0,他引:19
从石油污染的土壤中分离筛选到28株石油降解菌,经鉴定分别为短杆菌属、假单胞菌属、邻单胞菌属和微球菌属;对4个石油不同程度污染的土壤样品中嗜油微生物分布状况进行分析,发现污染严重的土壤样品中嗜油菌的数量相对较多;用聚合酶链式反应(PCR)、变性梯度凝胶电泳(DGGE)和切胶测序相结合的方法对4个土壤样品中的细菌多样性进行分析,结果显示在受污染的土壤中,My cobacterium和B acillus在污染程度较低的样品中分布的较为集中,F lavobacterium和A zosp ira在污染程度较高的样品中丰度较高。属于B eta p roteobacterium类群的细菌在受污染的土壤中占有优势,同时还有一些不可培养的菌群存在。气质联用(GC-M S)分析结果表明石油污染程度及污染物中芳香烃类的含量对细菌多样性有着显著影响。在石油污染程度高,芳香烃类含量高的样品中细菌的多样性相对较低。 相似文献
20.
巴斯德毕赤酵母表达的突变型人白细胞介素-2的发酵条件与纯化研究 总被引:3,自引:0,他引:3
在以前的研究中,通过蛋白质工程技术获得了三突变体白细胞介素_2基因(编码125位半胱氨酸→丙氨酸;18位亮氨酸→蛋氨酸;19位亮氨酸→丝氨酸) ,并在毕赤酵母中加以表达。进一步优化表达条件,其最适诱导条件:80 %以上的通气,诱导2d ,初始pH60 ,甲醇终浓度为10%。在上述条件下表达量占菌体总蛋白的30%以上,大约200mg L。建立了一套从毕赤酵母表达上清中分离纯化分泌型表达蛋白IL_2的方法,经离心,超滤浓缩,强阳离子交换S柱和分子筛层析得到纯化的突变型和野生型IL-2 ;其得率为27% ,纯度达电泳纯并且HPLC检测只有一个峰。纯化的突变蛋白对CTLL-2细胞具有刺激性;与野生型IL-2相比,在各种温度条件下储存的突变蛋白保留有更高的活性;突变型IL-2的活力是野生型的4~5倍,具有更高的利用价值。 相似文献