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本研究旨在探索优化肾脏脱细胞支架的制备方法,为肾脏组织工程及肾脏体外病理、毒理研究提供实验基础。取大鼠肾脏灌注PBS作为对照组 (Control组),在不同流速下分别以十二烷基磺酸钠 (Sodium dodecyl sulfate,SDS) 灌注 (S组),Triton X-100联合SDS灌注 (TS组),反复冻融后Triton X-100联合SDS灌注(FTS组),制备肾脏脱细胞支架,并测定其流体分布及脉管阻力。HE染色、DAPI染色、DNA定量检测脱细胞支架脱细胞程度,Masson染色、PAS染色、免疫组织化学染色检测脱细胞支架主要成分的保留和结构的完整,扫描电镜检测支架的超微结构,MTT法检测支架的细胞毒性,ELISA检测支架中生长因子的含量。结果显示,FTS组脱细胞用时较S组、TS组少,10 mL/min组支架脉管阻力较低,S组、TS组、FTS组流体分布与Control组存在差异。HE染色和DAPI染色显示各组支架未见细胞成分残留,DNA含量<50 ng/mg。Masson染色和PAS染色可见细胞外网状胶原及多糖,免疫组织化学染色见Ⅰ型胶原 (CollagenⅠ)、Ⅳ型胶原蛋白 (Collagen Ⅳ)、纤维连接蛋白 (Fibronectin)、层粘连蛋白 (Laminin) 表达。扫描电镜见支架呈蜂窝状结构。MTT法检测支架细胞毒性分级在0–1级之间。ELISA检测提示FTS组VEGF、EGF、IGF-1、PDGF含量明显高于S组和TS组。综上,联合冻融和灌注法能够制备更为理想且有效的大鼠肾脏整器官脱细胞支架,为肾脏组织工程及肾脏体外病理、毒理学研究奠定基础。 相似文献
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目的了解南昌大学第二附属医院2013年临床分离菌对抗菌药物的耐药性。方法采用纸片扩散法或自动化仪器法进行药敏试验,参照CLSI 2013年版判读结果,用WHONET5.5软件进行数据分析。结果2013年共收集非重复临床分离菌3996株,其中革兰阴性菌2 623株(65.6%),革兰阳性菌1 373株(34.4%)。标本来源以痰液为主(23.2%),其次为血液(21.6%)和尿液(17.8%)。居前5位的菌种依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌,分别占20.9%、10.1%、9.4%、8.7%和7.4%。甲氧西林耐药金葡菌和CNS(MRSA和MRCNS)分别占各自菌株的21.3%和82.0%,未发现对万古霉素和替加环素耐药的葡萄球菌。肺炎链球菌中青霉素耐药株占16.4%,β溶血性链球菌对红霉素、克林霉素和四环素耐药率较高。屎肠球菌对多数抗菌药物的耐药率高于粪肠球菌,共检测出2株粪肠球菌对万古霉素耐药。大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌(肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌)中ESBLs的检出率分别为60.2%和27.2%,产ESBLs株对大多数抗菌药物的耐药率高于非产ESBLs株。肠杆菌科细菌对厄他培南和亚胺培南的耐药率均低于10%。铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率为8.7%。鲍曼不动杆菌除对左氧氟沙星耐药率为34.6%外,对其他常用抗菌药物的耐药率均大于50.0%,多重耐药鲍曼不动杆菌的检出率为74.9%。结论我院临床分离菌仍以革兰阴性杆菌为主,细菌耐药性仍是临床重要问题,尤其是耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(CRKP)增加较快,应引起临床高度重视。 相似文献
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目的了解血流感染中葡萄球菌的菌种分布及其耐药特性,以指导临床合理使用抗菌药物。方法回顾性分析南昌大学第二附属医院2013年1月至2013年8月期间临床各科室送检的血培养标本中葡萄球菌的菌种分布和耐药特性。采用BACT/ALERT 3D全自动血培养仪进行培养,VITEK2-compact全自动细菌分析仪进行菌种鉴定和药敏试验。WHONET 5.6软件分析数据。结果共分离获得176株葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌24株,占13.6%;路邓葡萄球菌1株,占0.6%;凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)151株,占85.8%,人葡萄球菌53株、溶血葡萄球菌32株、表皮葡萄球菌23株及头状葡萄球菌15株居前四位。最常见的葡萄球菌分别为人葡萄球菌、溶血葡萄球菌、金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林CNS(MRCNS)检出率分别为29.2%和85.4%,对青霉素耐药率均100.0%,磺胺甲噁唑对MRSA(耐药率仅14.3%)有较强的体外抗菌活性,利福平对MRCNS(耐药率仅18.2%)有较强的体外抗菌活性,均未发现耐万古霉素、利奈唑胺和替加环素的菌株。结论葡萄球菌引起的血流感染菌种分布较广,以人葡萄球菌、溶血葡萄球菌、金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌为主,人葡萄球菌较金黄色葡萄球菌耐药及多重耐药性严重,但均仍对万古霉素、利奈唑胺、替加环素保持高度敏感。 相似文献
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【目的】明确粗放管理的苹果园系统内金纹细蛾Lithocolletis ringoniella发生为害动态规律、其寄生蜂种类和对金纹细蛾的控害作用,为金纹细蛾生物防治提供理论依据。【方法】试验于2018年在烟台福山区管理粗放的苹果园内,通过系统调查和实验室解剖对金纹细蛾的发生及其寄生蜂种类进行调查。【结果】在粗放管理的苹果园系统内,5月中旬-6月中旬是金纹细蛾成虫发生的全年最高峰,幼虫发生的两个高峰期分别在5月底和6月中下旬,而田间叶片被害率在6月中旬以后明显升高,7月初出现大量落叶。在自然生态系统下,共调查发现金纹细蛾姬小蜂SympiesislaevifronsKamijo、金纹细蛾绒茧蜂Apanteles theivorae、金纹细蛾跳小蜂Ageniaspis pestacsipes Rate、金纹细蛾羽角姬小蜂Eulopaus longulus Zett、柠黄姬小蜂Cirros-pilues ogimae (Howard) 5种寄生蜂;在5月底至6月初和7月下旬出现2个寄生高峰,其中6月底以前,金纹细蛾姬小蜂、金纹细蛾绒茧蜂寄生率高,分别达到33.69%和29.48%,是优势种寄生蜂,7月份以后金纹细蛾跳小蜂是优势种寄生蜂,平均寄生率为38.54%,最高达71.72%。【结论】在粗放条件下,金纹细蛾寄生蜂自然寄生率高,不同时期优势种寄生蜂不同,应注意保护天敌,充分发挥寄生蜂对金纹细蛾的控害作用。 相似文献
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目的:探讨环境内分泌干扰物六氯苯对PC-12细胞凋亡的影响及其可能机制。方法:采用体外细胞培养方法,5%CO2 37℃恒温条件下,将PC-12细胞培养于含10%灭活胎牛血清的高糖DMEM培养基中。0、1、10、20、100、200μmol.L-1六氯苯处理组,每组设3组复孔,培养24 h后应用Cell Counting Kit-8试剂盒进行六氯苯对PC-12细胞增殖和毒性分析;流式细胞术FITC-An-nexinV/PI双染检测细胞凋亡率;Hoechst33258染色及倒置荧光显微镜拍摄细胞平片,观察细胞形态学改变;免疫印记法(Western blot)检测相关蛋白PLCγ及ERK蛋白磷酸化表达变化。结果:随着六氯苯浓度增加,细胞凋亡率升高,呈剂量依赖关系;Hoechst33258染色可见细胞核膨大、染色质边集浓染等凋亡特征;与对照组相比p-PLCγ及p-ERK1/2表达均降低,呈剂量依赖效用。结论:六氯苯能够诱导PC-12细胞凋亡,p-PLCγ及p-ERK1/2信号通路可能在此过程中发挥作用。 相似文献
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为研究钙对摄食高铜饲料的大黄鱼幼鱼生长性能、抗氧化酶类及脂代谢酶类活性的影响,研究采用22双因子实验设计,配制了4组实验饲料,共包含2个铜水平(4和24 mg/kg)和2个钙水平(0.5%和3%),分别命名为: -Cu-Ca、+Cu-Ca、-Cu+Ca和+Cu+Ca,饲喂大黄鱼幼鱼[(4.050.31) g]10周,每个处理组设置3个重复。结果表明,高铜组(+Cu-Ca和+Cu+Ca)实验鱼的存活率、终末体质量和增重率显著低于低铜组(-Cu-Ca和-Cu+Ca)(P0.05); 高铜组实验鱼肝脏和肌肉中的铜含量显著高于低铜组,而高钙组(-Cu+Ca和+Cu+Ca)实验鱼肌肉中的铜含量却显著低于低钙组(-Cu-Ca和+Cu-Ca)(P0.05); 高铜组实验鱼肝脏中的糖原含量显著低于低铜组(P0.05); 实验鱼肝脏中的超氧化物歧化酶、过氧化物酶、谷胱甘肽过氧化物酶、6-磷酸葡糖酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶和脂肪酸合成酶活性,高铜组显著低于低铜组,而高钙组却显著高于低钙组,但硫代巴比妥酸反应物含量和脂蛋白脂肪酶活性正好相反(P0.05); 饲料中铜和钙的交互作用显著影响了实验鱼肌肉中的铜含量、硫代巴比妥酸反应物含量、6-磷酸葡糖酸脱氢酶、脂肪酸合成酶和脂蛋白脂肪酶活性(P0.05)。研究表明,钙能够缓解摄食高铜饲料对大黄鱼幼鱼造成的伤害。 相似文献
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中国白菜RAPD分子遗传图谱的构建 总被引:17,自引:0,他引:17
以芜菁(Brassica campestris L.ssp.rapifera Metzg)和结球白菜(B.carnpestris L.ssp .Plkinensis(Lour.)Oisson)杂交的F2群体为试材,采用RAPD标记,用84个10核苷酸随机引物构建了白菜的RAPD遗传图谱。该图谱覆盖基因组的1632.4cM(certi Morgan)标记间的平均间隔为16.5cM。其中最长的连锁群为 相似文献
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黑麦(Secale cereale)染色体除核仁组成区,着丝粒、端粒能被AgNt)3染色体,还可用BrdU和Hoechst 33258诱导出银染区,本文还对染色体差别银染的机制作了探讨。 相似文献
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ARapidandEffectiveMethodtoInduceSoybeanRegenerationZHAOGui-ying,CHENHang(BeijingVegetableResearchCentre,Beijing100081)1植物名称大豆(Glycinemax)品种京黄1号、里外青、黑皮青、丰南黄豆。2材料类别无菌种子萌发6d的子叶柄。3培养条件(1)种子前发及诱导芽分化培养基:1/2MS+6-BAP1.0mg·L-1+3%蔗糖十0.7%琼脂,pH5.8~6.0。(2)生根培养基:1/2MS+NAA0.1mg·L-1+2%蔗糖十0.7%琼脂,pH5.8~6.0。培养温度25~28℃,光照16·d-1,光照度3500lx。4生长与分化情况4.1萌发种子用75%酒精浸泡30… 相似文献
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目的:观察血清胆固醇对绝经前、后女性骨密度的影响.方法:用常规酶法测定血清总胆固醇(CHOL);用双能X线吸收法(DEXA)骨密度仪测定腰椎前后位正位总体(Ll-4)、左侧髋部总体、股骨大转子区、股骨颈和Ward's三角区骨密度(BMD).结果:胆固醇与绝经前女性Ll-4和Ward's区骨密度呈负相关,与绝经后女性BMD无关,校正年龄和BMI后CHOL与绝经前、后女性BMD均无关.结论:胆固醇对绝经前后女性骨密度可能无影响. 相似文献