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81.
A method for efficient gene isolation from phage lambda gt11 libraries: use of antisera to denatured, acetone-precipitated proteins 总被引:3,自引:0,他引:3
Experience with cloning pseudorabies virus (PRV) DNA in the lambda gt11 phage vector has shown that there are special requirements for the antisera used in screening the libraries, in addition to the requirement that the antisera recognize proteins on a Western blot. Initial screening of a lambda gt11 library of sheared PRV DNA fragments in Escherichia coli for expression of PRV antigens using PRV hyperimmune antisera was unsuccessful. It was only after screening the library with antisera raised against PRV proteins eluted from sodium dodecyl sulfate (SDS)-polyacrylamide (PA) gels that positive results were obtained. These "gel-slice" antisera (GSA) were equivalent in potency to hyperimmune antisera in standard immunoassays (including ELISA, immunoprecipitation, Western blots, and neutralization of virus), but only the GSA could recognize PRV fusion proteins expressed by recombinant lambda gt11 phage. This difference was seen despite the fact that hyperimmune antisera performed satisfactorily on Western blots of denatured PRV-infected cell extracts. These results show that the efficiency of screening expression libraries in E. coli can be improved if antibodies are raised against denatured proteins. 相似文献
82.
Nonrandom insertion of Tn5 into cloned human adenovirus DNA 总被引:4,自引:0,他引:4
83.
84.
我国香菇人工栽培历史悠久;在今天纯种人工栽培同样是食用菌生产的主要方向。经查上海栽培香菇“菌种”内生长不正常的菌丝体制剂中有直径为20nm,长度多为100—200nm的类似棒状病毒颗粒。在接种后14—20天,生长缓慢的菌丝体中有直径为28、36、40nm三种不同大小的类似球状病毒颗粒,未见棒状颗粒。在香菇子实体的制剂中同样见到与菌丝体中一样的球状颗粒以及大小为15—16nm×100—300nm的较细的棒状颗粒。病香菇菌褶超薄切片中显示棒状颗粒结晶及球状颗粒的聚集;在液泡中有直径为15—16nm的棒状颗粒。 相似文献
85.
用鸡胚细胞(CEC)和Madin-Darby Canine Kidney(MDCK)两个宿主细胞系统,检查甲型流感病毒各亚型不同时期流行株的温度敏感性状(ts),发现自然界存在许多宿主依赖的温度敏感性突变株(hd-ts)。它们在CEC上是ts,在MDCK上却是ts~ 。检出的hd-ts株中有些曾经过人体接种观察证明为减毒株。这表明在CEC中鉴定的ts表型与对人减毒性状密切相关。 相似文献
86.
87.
从乙型肝炎病毒表面抗原阳性母亲流产的胎儿查出乙型肝炎病毒标志 总被引:7,自引:0,他引:7
应用Southern blot杂交试验检测HBsAg及HBeAg均阳性母亲流产的9例胎儿肝细胞中HBV DNA的存在状态,并与其HBV血清学、免疫电镜及肝脏免疫组织化学的结果相比较。结果在3例胎肝高分子DNA中检出了整合的HBV DNA顺序,且此3例HBV DNA整合到胎肝细胞基因组并无特定部位,提示为随机整合。3例中2例的血清及肝匀浆都检出HBsAg颗粒,其胎肝细胞胞浆HBsAg也阳性;另1例受HBV感染的唯一标志是在胎肝细胞中存在着整合的HBVDNA。此外,另1例则仅胎肝细胞中HBsAg阳性而无整合的HBV DNA。在胎肝细胞中检出整合的HBV DNA进一步证实HBV子宫内传播途径的存在。 相似文献
88.
马立克氏病毒单克隆抗体的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
获得了4株分泌马立克氏病毒(MDV)特异性单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞:4BS10对MDV所有毒株呈阳性反应;4CN8 对MDV血清1,3型毒株发生反应;2BN90和4CN24只对MDV血清1型毒株有阳性反应。3个McAb属IgG1,1个为IgG2b,均不中和MDV,免疫扩散试验也无沉淀线。对禽白血病毒(ALV)无交叉反应。 以2BN90和辣根过氧化物酶、异硫氰酸荧光素的结合物进行直接酶联免疫吸附试验和直接荧光抗体试验,均获得成功。抗体滴度前者为1/51,200,后者为1/640。对ALV无交叉反应。 相似文献
89.
90.
乙型脑炎病毒减毒株(2-8株)和野毒株(SA14株)在生物学性质上有明显的不同,特别是嗜神经毒力方面,2-8株已丧失了对小白鼠、马,猴等敏感动物的脑内致病力。为了探讨这些生物学性质变化的物质基础,我们开展了乙脑强、弱毒株聚丙烯酰胺凝胶 相似文献