籼稻232蜡质基因转录起始位点的鉴定

Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交分析和蜡质基因ｃＤＮＡ的序列分析表明水稻蜡质基因的转录本可能延伸到翻译起始密码子（ＡＴＧ）上游１２ｋｂ处。据此设计了２１Ｎｔ的寡核苷酸引物,并以籼稻２３２胚乳ＲＮＡ为模板,以引物延伸法确定籼稻２３２蜡质基因的转录起始点,籼稻蜡质基因的转录起始旁邻顺序ＣＴＣＡＣＣＡ与高等植物基因的转录起始点一致顺序ＣＴＣＡＴＣＡ仅相差１个碱基。通过顺序比较,对东乡野生稻蜡质基因中的转录起始位点的位置,以及对此两稻种中ＴＡＴＡ盒的可能顺序进行了讨论。     

一个恢复力受单基因控制的水稻CMS育性回复突变体

利用￣（６０）Ｃｏ－γ射线对具有印尼水田谷细胞质的籼稻细胞质雄性不育系Ⅱ－３２Ａ干种子进行诱变处理,获得了一育性回复突变体Ｔ２４。育性基因未纯合的突变体分离出可育株和完全不育株,比例为３∶１;其与Ⅱ－３２Ａ和珍汕９７Ａ测交,Ｆ１代分离出１∶１的可育株和不育株。育性稳定株系与Ⅱ－３２Ａ和珍汕９７Ａ杂交,Ｆ２分离成３∶１的可育株和不育株。表明其育性回复是由一对基因显性突变所致。这一突变体对不育系的育性恢复机制不同于明恢６３、２０９６４等恢复系,后者表现为两对显性恢复基因作用。未观察到Ｔ２４与亲本Ⅱ－３２Ａ除育性以外的其他性状的差异,因而两者构成育性恢复基因的近等基因系。本文还对不育系育性回复类型和Ｔ２４的理论意义与育种价值进行了讨论。     

水稻主要病虫综合防治专家系统—系统外壳的研制

按照国家八五项目要求,以水稻病虫害管理知识为背景,笔者构建了水稻主要病虫综防专家系统外壳（ESRIPM）．并初步建立了珠江三角洲稻区主要害虫综合防治专家系统,系统中提出一种知识的组织方法,成功地把模型引入专家系统中．本系统具有知识编辑、咨询、专家系统;系统维护、4个一级子系统,系统中已装入三化螟,稻飞虱,稻纵卷叶螟等害虫综防管理的知识,并通过调试．本系统采用下拉式菜单,人机界面友好,操作简单．此专家系统外壳也适用建立其它各种害虫管理的专家系统．     

Epstein─Barr病毒膜抗原在中国仓鼠卵巢（CHO）细胞中的表达

将切去３’端穿膜序列的ＥＢ病毒膜抗原（ＭＡ）基因,插入ｐＳＶ２－ｄｈｆｒ质粒的ＳＶ４０早期启动子下游,构建了真核表达载体ｐＳＶ２－ｄｈｆｒＧＰＴＲ,使两个ＳＶ４０早期启动子分别调控ＭＡ和二氢叶酸还原酶（ｄｈｆｒ）基因。将该重组质粒转化ＣＨＯ－ｄｈｆｒ细胞,在选择培养基中筛选阳性克隆,用氨甲喋呤加压扩增,建立了表达ＥＢＶ－ＭＡ的克隆细胞系。ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析证明,所表达的蛋白的分子量大约为３４０ｋｄ和２２０ｋｄ。经过细Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ２Ｂ琼脂糖凝胶层析初步纯化的抗原与福氏佐剂混合免疫小鼠,２周后小鼠血清中出现明显的ｇｐ３４０／２２０特异性抗体,表明切去嵌膜区结构的ＥＢＶ－ＭＡ基因在ＣＨＯ细胞中的表达产物具有同天然膜抗原相似的分子量大小、糖基化程度、免疫特异性和免疫原性,可望成为ＥＢ病毒人用基因工程亚单位疫苗。     

亚铁离子对水稻萌发后幼苗生长的促进作用

本文最新报道亚铁离子在远高于营养浓度的情况下（０．４４－７．１６ｍｍｏｌ／Ｌ）能显著促进水稻萌发后的幼苗生长,其效果与已报道的促进因子Ｃ２Ｈ４相当．在试验的１９种不同化合物中,发现只有ＦｅＳＯ４对萌发后水稻幼苗生长有显著的促进作用,并证明其有效成分为Ｆｅ（２＋）．这种促进作用在淹水的厌氧条件下和通气条件均能发生,但通气条件下促进程度稍低．水稻不同基因型对Ｆｅ（２＋）的反应无明显差异,可能这种促进作用是水稻适应水田厌氧环境的方式之一．高浓度乙烯（５０—１００ｐｐｍ）的促进作用与亚铁离子的效果相近．这一发现有助于提高水稻在淹水厌氧直播时的出苗率．－－ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔａｔｌ％ｌｅｖｅｌ;＊－－ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔａｔ５％ｌｅｖｅｌ;ｕｓ－－ｎｏｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ．２．３ＥｆｆｅｃｔｏｆｖａｒｉｏｕｓＦｅ＋＋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｈｏｎｓｏｎｔｈｅｓｅｅｄｌｉｎｇｇｒｏｗｔｈｏｆｒｉｃｅＴｗｏｇｅｎｏｔｙｐｅｓ,ｍｏｄｅｒｎＩＲ５０ａｎｄｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＡＳＤＩ,ｗｅｒｅｕｓｅｄｆｏｒｆｕｒｔｈｅｒｓｔｕｄｙ．Ｆｅ＋＋ｗｉｔｈｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｆｒｏｍ０．４４ｔｏ７．１６ｍｍｏｌ／Ｌｗ     

旋扭山绿豆根瘤菌MXDI6菌株氢酶诱导表达

在自生异养条件下,旋扭山绿豆根瘤菌ＭＸＤＩ６菌株的氢酶诱导表达受气相、ｐＨ值、镍等因子影响：氢酶表达的最适氧浓度为４％,最适氢浓度为１５％,二氧化碳没有明显影响;氢酶表达的ｐＨ值以５．０—６．０为宜;０．５μｍｏｌ／ＬＮｉＣｌ２明显促进吸氢活性,但镍浓度大于１μｍｏｌ／Ｌ则抑制吸氢活性．     

人粒细胞集落刺激因子（hG－CSF）cDNA3′－UTR对其表达的影响

利用人粒细胞集落刺激因子（ｈＧ－ＣＳＦ）ｃＤＮＡ３′端非翻译区（３′－ＵＴＲ）中存在的ＤｒａⅠ酶切位点,通过部分酶切与完全酶切,删除３′－ＵＴＲ不同长度,构建了四种ｈＧ－ＣＳＦｃＤＮＡ瞬时重组表达质粒。转染ＣＯＳ－７细胞后,生物活性测定结果提示,ｈＧ－ＣＳＦｃＤＮＡ３′－ＵＴＲ对其表达起负调控作用,其关键性序列位于紧接终止密码子ＴＧＡ下游的６５ｂｐ范围内,３′－ＵＴＲ对ｈＧ－ＣＳＦｃＤＮＡ表达的影响与转录水平的差别有一定关系。     

人类免疫缺陷病毒Ⅰ型核心蛋白(p24)在大肠杆菌中的表达、纯化及鉴定

在大肠杆菌中,利用新构建的含T7g-10L RBS以及λ-PR启动子的新型原核表达载体,通过表达gag-pol基因片段,获得了具有天然序列的人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)核心蛋白p24的高效表达。克隆的gag-pol基因片段在其阅读框架移位区域插入了4bp碱基,其表达的病毒蛋白酶在阅读框架上与gag一致,从而实现了对gag-pol融合蛋白的有效加工,产生成熟的核心蛋白p24及其它产物。重组p24以可溶形式存在,可以被抗p24的单克隆抗体特异识别。测定的N端8个氨基酸序列与从病毒纯化的p24完全一致。在使用硫酸铵沉淀后,采用两步离子柱层析,可将重组蛋白纯化到95％以上的纯度。结果表明,纯化的p24可以作为特异性很强的试剂而用于HIV感染的诊断及病情的预后,并可用于p24的生化及结构分析。     

根瘤菌资源数据库（RRDB）的建立

在总结我室多年对根瘤菌资源调查与分类研究的基础上,建立了根瘤菌资源数据库（ＲＲＤＢ）。此库依据根瘤菌研究特点而设计,包括：基本信息、采集信息、保藏信息、回接信息、参考文献、性状信息、菌株说明等七个子库。目前收录了来自国内２１个省或地区及国外部分研究单位提供的;并经全面性状分析与分类研究的２８６个菌株的信息,每个菌株设有寄主来源、固氮酶活性、碳源、氮源的利用等３２１个数据项。该库具有数据维护、查询检索、数据统计、输出打印等功能,引入并连接了聚类分析软件包－ＭＩＮＴＳ系统,可以满足当前研究的需要。