全文获取类型
收费全文 | 1010篇 |
免费 | 50篇 |
国内免费 | 330篇 |
出版年
2024年 | 4篇 |
2023年 | 18篇 |
2022年 | 17篇 |
2021年 | 15篇 |
2020年 | 29篇 |
2019年 | 25篇 |
2018年 | 15篇 |
2017年 | 15篇 |
2016年 | 48篇 |
2015年 | 47篇 |
2014年 | 57篇 |
2013年 | 38篇 |
2012年 | 166篇 |
2011年 | 73篇 |
2010年 | 61篇 |
2009年 | 47篇 |
2008年 | 83篇 |
2007年 | 55篇 |
2006年 | 37篇 |
2005年 | 52篇 |
2004年 | 37篇 |
2003年 | 35篇 |
2002年 | 31篇 |
2001年 | 28篇 |
2000年 | 31篇 |
1999年 | 21篇 |
1998年 | 19篇 |
1997年 | 28篇 |
1996年 | 20篇 |
1995年 | 23篇 |
1994年 | 18篇 |
1993年 | 19篇 |
1992年 | 19篇 |
1991年 | 29篇 |
1990年 | 17篇 |
1989年 | 21篇 |
1988年 | 19篇 |
1987年 | 10篇 |
1986年 | 5篇 |
1985年 | 45篇 |
1984年 | 4篇 |
1983年 | 1篇 |
1982年 | 1篇 |
1981年 | 1篇 |
1980年 | 1篇 |
1956年 | 2篇 |
1955年 | 2篇 |
1954年 | 1篇 |
排序方式: 共有1390条查询结果,搜索用时 17 毫秒
71.
范俊梅 《现代生物医学进展》2007,7(10):1467-1469
目的:建立稳定表达EGFP标记的葡萄糖转运蛋白4的CHO细胞系,为研究GLUT4在CHO细胞中的转运调节机制奠定基础。方法:采用分子克隆方法构建GLUT4-EGFP的融合蛋白,在FLP-in的CHO细胞系中表达,潮霉素筛选后得到稳定的细胞系。结果:通过共聚焦显微镜的检测,证明了此稳定细胞系的阳性率达到了99%。定位研究表明大部分GLUT4以囊泡形式分布在CHO细胞胞浆内,但是质膜上也有少量的GLUT4。结论:建立了一个稳定表达GLUT4-EGFP的CHO细胞系,为进一步研究GLUT4的转运提供了一个很好的细胞模型。 相似文献
72.
桂枝化学成分研究北大核心CSCD 总被引:1,自引:0,他引:1
桂枝是临床常用中药,本课题组前期发现桂枝乙醇提取物具有抑制程序性细胞坏死的生理活性。为进一步阐明桂枝的化学成分和更好地开发利用桂枝药用资源,该文采用大孔吸附树脂、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱层析、制备型高效液相色谱等多种方法对桂枝75%乙醇提取物进行了研究。此次报道从中得到的13个单体化合物,它们的结构经波谱数据分析及文献对照鉴定为脱落酸(1)、蚱蜢酮(2)、2,3-二羟基-1-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-1-丙酮(3)、赤型-1,2,3-三羟基苯丙烷(4)、1-苯基-1,3-丙二醇(5)、香豆素(6)、肉桂酸(7)、对羟基肉桂酸(8)、邻羟基肉桂酸(9)、邻甲氧基肉桂酸(10)、肉桂醛(11)、阿魏酸(12)、咖啡酸乙酯(13)。其中1-5、12和13为首次从桂枝中分离得到。 相似文献
73.
猪骨骼肌磷酸葡萄糖异构酶的提纯及性质研究 总被引:3,自引:0,他引:3
本文报道猪骨骼肌磷酸葡萄糖异构酶(GPI.EC 5.3.1.9)的提纯及其性质。设计了四步提纯法(稀盐溶液抽提、有机溶媒沉淀、透析、葡聚糖G-100柱层析),对猪的五种不同解剖部位的骨骼风进行了GPI的提纯。结果均得到聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)图谱为一条带的产品。提纯效果以猪股二头肌为例:提纯10.68倍、活力回收32.37%,比活力1.6×105单位。对提纯酶性质的研究表明;猪肌提纯的GPI由三个亚基组成。分子量约为120Kd,等电点为 6. 6,最适pH8.5,最适温度 35℃,米氏常数:6.02mmol/L,活化能为32378.4焦耳/K,mol。免疫电泳实验证实猪肌提纯酶具抗原性。其免疫血清与自牛、兔、鸡、鱼的骨骼肌用同法提纯的GPI有交叉免疫反应。免疫血清且对原酶液有抑制作用。猪肌GPI与其它数种动物肌肉之GPI的PAGE行为、混合电泳行为,等电聚焦行为、氨基酸组成等各方面基本相同,可以认为这是猪肌GPI与其它数种动物肌肉的GPI为同源蛋白质的佐证。 相似文献
74.
机械应力是一种普遍存在的刺激因子。我们以前的工作表明,机械应力能调节人红细胞膜上葡萄糖运输蛋白-GluT-1的功能:GluT-1介导的输入、输出葡萄糖的速率能对机械应力产生响应[1]。但到底这种功能变化的原因是来源于机械应力对GluT-1的结构改变还是其它因子至今尚不清楚。为此,我们试图从GluT-1内源性色氨酸的荧光变化上观测机械应力对GluT-1结构的影响,并探讨其可能的机制。 相似文献
75.
魔芋甘露聚糖化学结构的研究 总被引:11,自引:0,他引:11
研究了陕西花魔芋块茎中分离所得的魔芋甘露聚糖的化学结构与分子组成。经葡聚糖凝胶G-75柱层析为一组均一性多糖,气相色谱检测由甘露糖,葡萄糖组成,其克分子比Man;Glu=1.78:1,平均分子量为11×10^-5。 相似文献
76.
短乳杆菌葡萄糖异构酶固定化的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
采用离子交换树脂DEAE纤维素对短乳杆菌葡萄糖异构酶进行固定化,并用固定化细胞使葡萄糖异构化为果糖,研究了制备固定化细胞最佳条件,而且与戊二醛交联法,海藻酸钙包埋法作了比较。还研究了固定化细胞的性质及连续转化的最佳条件,用DEAE纤维素固定化具有酶活力高,回收率高,机械强度好,成本低等优点。 相似文献
77.
小鼠胚胎体外培养条件的研究 总被引:1,自引:1,他引:0
为了探讨小鼠胚胎在体外发育过程中的最佳方案,我们将从超排昆明小鼠取出的543枚受精卵经过不同的培养液(M16、M16+OEC、Glu-FreeM16和Glu-FreeM16+OEC)及不同的培养微环境处理后,观察胚胎体外发育的过程。结果表明,葡萄糖在胚胎发育早期(2细胞期)有比较明显的发育阻断作用,同种输卵管上皮(OEC)共同培养能够有效地抑制这种阻断作用;葡萄糖对胚胎8-16细胞期及以后阶段的发育具有十分重要的作用,而此时OEC的作用则不明显;除了葡萄糖外,在早期可能还有其它一些象磷酸盐、重金属离子的物质也能起胚胎发育阻断作用。同时还发现培养微环境的稳定也是胚胎发育的重要保证条件,石蜡油的封盖能够保持某种特定微环境而支持胚胎的体外发育。 相似文献
78.
一组丝瓜籽小分子核糖体失活蛋白LuffinS的分离、纯化和性质 总被引:2,自引:0,他引:2
通过硫酸铵分级沉淀、CM-52阳离子交换层析、HRLC分子排阻层析及FPLCMonoS离子交换层析等步骤,从丝瓜籽中分离到一组分子量为8kD左右的小分子核糖体失活蛋白——LufinS1、LufinS2、LufinS3。末端分析结果表明,它们的N端氨基酸分别为Ala、Pro和Thr。氨基酸序列分析确定了LufinS2的N端9个氨基酸的序列是Pro-Arg-Arg-Gly-Gln-Glu-Ala-Phe-Asp。LufinSs对核糖体的失活机制与天花粉蛋白(TCS)一致,是RNAN-糖苷酶催化型的。它们对无细胞蛋白质生物合成的抑制活性较TCS略强,IC50分别为1.3×10-11、1.0×10-10和6.3×10-11mol/L左右。因此LufinSs有可能开发成免疫毒素的高效“弹头”。 相似文献
79.
本研究测定了成年来航母鸡口服TOCP(750mg/kg)引起的迟发性神经毒性,卵壳腺钙ATP酶及钙镁ATP酶的活性。在为期10天的试验中,染毒鸡在给药后的第8-10天出现迟发性神经毒性症状:表现为轻度步态失调,而对照鸡自至至终未见有此类症状表现。 相似文献
80.
目的:体外研究尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT2B7)基因SNP rs28365062对霉酚酸酯(MMF)代谢的影响,明确该位点变异是否与MMF副作用具有潜在关系。方法:采用基因重组、定点突变技术构建UGT2B7基因SNP rs28365062不同等位基因过表达载体,POLO3000转染法将重组过表达载体转染HEK293细胞,采用液相色谱-质谱联用仪(LC/MS/MS)系统检测霉酚酸(MPA)代谢产物--酰基化葡萄糖醛酸化物(Ac MPAG)24小时的生成量来评估转染不同等位基因细胞的酶活性。结果:成功构建过表达载体p IRES2-EGFP-prom(A)和p IRES2-EGFP-prom(G)并转染至HEK293细胞。LC/MS/MS系统检测结果显示携带G等位基因的突变型UGT2B7代谢MMF产生Ac MPAG的能力降低,产物Ac MPAG 24小时的生成量仅为野生型的18.60%(P0.001)。结论:UGT2B7基因SNP rs28365062可显著影响MMF代谢产物Ac MPAG的生成,可能是导致病人对MMF产生不同程度副作用的因素之一。 相似文献