不同月龄婴儿接种DTP后血清中百日咳抗体水平的观测

本文对比观察了２１３例２月龄、３月龄婴儿接种ＤＴＰ后百日咳抗体水平的变化,探讨了母传抗体对免后抗体增长的影响。结果表明２月龄、３月龄婴儿ＤＴＰ免疫后１个月和３个月血清中百日咳抗体达保护水平的百分率无显著性差异（ｘ￣２＝０．０３６,ｐ＞０．９;ｘ￣２＝０．３２７,ｐ＞０．５）,免后１个月抗体ＧＭＴ无显著性差异（ｔ＝０．１７,ｐ＞０．５）,免后３个月抗体ＧＭＴ３月龄组高于２月龄组（ｔ＝２．２２,ｐ＜０．０５）。我们还发现免前抗体水平与免后１个月ＧＭＴ虽有负相关（ｒ＝—０,７５４）的倾向,但总体上对抑制免后抗体应答不明显,因而建议将儿童ＤＴＰ基础免疫的起始月龄提前至２月龄进行。     

精制白喉毒素加β—丙氨酸后脱毒效果观察

精制白喉毒素加０．０２Ｍβ—丙氨酸,再加甲醛溶液经适当的时间解毒,即可转化为完全类毒化且无毒性逆转的精制白喉类毒素。此精白类的脱毒试验、毒性逆转试验、安全试验及效力试验均符合《中国生物制品规程》要求。在脱毒过程中絮状单位的损失明显低于单纯甲醛脱毒者,纯度亦相应得到了提高。     

高效液相色谱法检测大鼠子宫内膜游离氨基酸

本文采用邻苯二甲醛(OPA)和β-巯基乙醇柱前衍生,荧光检测分析大鼠子宫内膜游离氨基酸。50分钟分析18种氨基酸,以TEGD缓冲液[10mmol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris-HCI),1.5mmol/L 乙二胺四乙酸(EDTA)3mmol/L叠氮钠(NaN_2)、30％甘油Immol/L二硫苏糖醇(DTT)pH为7.4提取氨基酸,平均回收率94.0±5％。各氨基酸保留时间变异系数平均为1.25±0.1％(均值±标准差),峰面积变异系数平均为3.1±0.9％,各氨基酸浓度在10pmol—1.5nmol范围内,线性相关系数为0.979±0.08(均值±标准差)。同时还讨论了影响氨基酸检测的某些色谱条件。     

分光光度定量溶血法检测大鼠脾脏抗体生成细胞活性

本文建立了分光光度定量溶血法检测大鼠脾抗体生成细胞活性的实验手段,并对其影响因素进行了探讨。大鼠脾细胞经 DU-7HS 分光光度仪自动扫描,最佳吸收波长为413nm,且随免疫脾细胞量的增加(2×10~6—1×10~7),吸光度值相应提高,呈正相关(r=0.997);补体浓度(1:5—1:40稀释)呈负相关(r=-0.982);绵羊红细胞浓度则随加入量的增加(0.2%—1.0%),介导溶血反应明显上升。此方法简便准确、灵敏度高、重现性好,可作为免疫功能检测的一个重要指标。     

酶联免疫吸附技术(ELISA)对大豆根瘤菌的鉴定

本文用直接ELISA法检测大豆根瘤菌USDA 110和RTt 50的纯培养菌体和根瘤。确定了该试验的最佳工作条件:酶标结合物HRP—Ab 110和HRP—Ab50的工作稀释度分别为1:3200和1:800,抗体Ab 110和Ab 50的工作稀释度分别为1:3200和1:800,抗原USDA 110和RTt 50的最适工作浓度均为6×10~7细胞/ml。该法能够特异地检测和区别慢生型和快生型大豆根瘤菌。在这两种类型的大豆根瘤菌中,同种内的少数菌株存在交叉反应,通过吸收可以消除,从而使ELISA的检测达到菌株     

免疫球蛋白变区基因的体外扩增及人—鼠嵌合抗体的表达

应用聚合酶链反应法体外扩增抗人小细胞肺癌单克隆抗体的变区基因,经核苷酸序列分析,轻链变基因为３２４ｂｐ,编码１０８个氨基酸,重链变区基因为３１５ｂｐ,编码１１７个氨基酸,将重变区基因克隆至ｐＳＶ２△ＨｇｐｔＨｕγ３质粒,经一系列克隆,筛选,得一插入方面正确的表达人－鼠嵌合重链抗体的载体－ｐＳＶ２△Ｈｇｐｔ２Ｆ７ＶＨＨｕγ３。用电穿孔方法将该粒导入鼠源骨髓瘤细胞Ｊ５８８Ｌ,用霉酚酸进行初步筛选,最终     

PCR检测HPV－18DNA

采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术,对ＨＰＶ－１８序列中引物ＨＰ＿１、ＨＰ＿２之间的片段（Ｆ）进行扩增,通过两组阴、阳性对照实验证明扩增片段的特异性。用不同Ｍｇ浓度的缓冲系统进行ＰＣＲ反应发现,缓冲系统中Ｍｇ浓度高低是影响ＨＰＶ－１８／ＨＰ＿１、ＨＰ＿２特异扩增的重要因素,高浓度Ｍｇ导致扩增特异性降低。对１７例宫颈癌组织ＤＮＡ进行ＰＣＲ检测,有９例检出Ｆ片段,其检出率是５３％,为ＨＰＶ－１８与宫颈癌的相关性提供证据。     

不同感染状态下EB病毒核抗原亚型表达的研究

本实验用免疫印迹法纯化的抗ＥＢＮＡ亚型抗体,结合显微荧光分光光度检测技术,检测在不同感染状态下,三种亚型ＥＢＮＡ抗原在细胞中的表达程度。结果表明,处于潜伏感染状态下的Ｒａｊｉ细胞ＥＢＮＡ－１表达量较大,经巴豆油和正丁酸诱导进入钝挫感染状态后ＥＢＮＡ－１表达减少,而ＥＢＮＡ－２的表达增强。Ｂ＿（９５－８）细胞也有相似的趋势。表明ＥＢ病毒的激活可能与不同ＥＢＮＡ亚型表达量的改变有关。     

检测特异性抗体分泌细胞(ASCs)的固相酶联免疫斑(ELISPOT)技术的建立

ＥＬＩＳＰＯＴ技术是目前国外评价疫苗免疫原性和免疫应答机理研究中最常使用的方法。本文用自制的ＮＣ膜２４孔板为固相支持物,建立了检测小鼠脾细胞中特异性ＡＳＣｓ的ＥＬＩＳＰＯＴ技术,在检测方法的特异性、结果的稳定性上均取得了满意的效果。并对该方法的某些实验条件进行了摸索。