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免疫球蛋白变区基因的体外扩增及人—鼠嵌合抗体的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
应用聚合酶链反应法体外扩增抗人小细胞肺癌单克隆抗体的变区基因,经核苷酸序列分析,轻链变基因为324bp,编码108个氨基酸,重链变区基因为315bp,编码117个氨基酸,将重变区基因克隆至pSV2△HgptHuγ3质粒,经一系列克隆,筛选,得一插入方面正确的表达人-鼠嵌合重链抗体的载体-pSV2△Hgpt2F7VHHuγ3。用电穿孔方法将该粒导入鼠源骨髓瘤细胞J588L,用霉酚酸进行初步筛选,最终 相似文献
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本文从抗人小细胞肺癌单克隆抗体杂交瘤细胞中抽提总RNA,合成第一链cDNA,直接用PCR技术(polymerase chain reaction)扩增出351bp的重链变区基因(V_H),克隆至pUCV_(NP)-PCR载体上,经筛选得一批插入片段为351bp的阳性克隆,经核苷酸序列分析研究,证实已获得了该单克隆抗体的重链可变区基因。 相似文献
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应用聚合酶链反应法体外扩增抗人小细胞肺癌单克隆抗体的变区基因,经核苷酸序列分析,轻链变区基因为324bp,编码108个氨基酸;重链变区基因为351bp,编码117个氨基酸。将重链变区基因克隆至pSV_2△HgptHuγ_3质粒,经一系列克隆、筛选,得一插入方向正确的表达人-鼠嵌合重链抗体的载体-pSV_2△Hgpt2F7VHHuγ_3。用电穿孔方法将该质粒导入鼠源骨髓瘤细胞J558L,用霉酚酸进行初步筛选,最终用兔抗人免疫球蛋白IgGFc片段的抗体筛选得七株阳性克隆,免疫印迹法结果表明在与人IgG相同位置上有一阳性条带。 相似文献
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以原发肝癌及肝癌7402细胞株DNA转染NIH/3T3得到的转化细胞与材料,经~(35)S-甲硫氨酸参入,应用放射免疫吸附,聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,发现原发性肝癌的转化细胞株中N-ras基因的表达产物p21明显高于非转化的细胞。7402细胞株和7402转化的细胞株可能存在有二个ras基因,一个是ras~N;另一个是ras~H。本文结果为证明N-ras是人肝癌的一种转化基因提供了证据。 相似文献
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