与蚕豆萎蔫病毒2号胞间运动和长距离转运相关的寄主细胞超微结构研究

电镜超微结构观察和免疫金标记显示:受蚕豆萎蔫病毒2号(Broad bean wilt virus 2,BBWV 2)中国分离物B935侵染的豌豆(Pisum sativum)和蚕豆(Vicia faba)叶细胞中膜结构增生,形成膜结构增生区,病毒以结晶体和管状体形式存在于细胞质中。在病变早期,叶肉细胞的胞间连丝处连接有小管结构,病毒样颗粒呈纵列排在小管中,穿越胞间连丝的小管能被BBWV 2的金标记抗体特异性标记。维管束组织的薄壁细胞、伴胞及转移细胞内存在膜增生区及病毒管状体,在筛管壁附近存在的病毒样颗粒能被BBWV 2金标记抗体特异性标记。实验结果表明BBWV 2胞间运动形式与豇豆花叶病毒(CPMV)相似,以完整粒子通过在胞间连丝处形成的小管结构穿越胞间连丝;细胞质中存在的直径160nm管状体只是一种病毒聚集体,与胞间运动无直接关系;该病毒在筛管中可能也是以完整粒子形式进行长距离转运的。     

禽痘疫苗病毒中网状内皮组织增生病病毒5'LTR整合位点序列分析

参照国外发表的禽网状内皮组织增生病病毒（REV）5’长末端重复序列（LTR）在禽痘病毒（FPV）疫苗株基因组上的整合位点及相关序列,合成一对来自FPV的引物,从国内5个不同厂家生产的禽痘疫苗中经PCR均扩增到REV-5’LTR。通过序列比较发现,我国5个FPV疫苗毒株中REV-5’LTR整合位点与美国和澳大利亚的天然重组禽痘疫苗完全一致。其中,有3个的REV-5’LTR插入序列也与美国的Vac-3-Am株和澳大利亚的Vac-M3-Au株有100％的同源性。另2个中国疫苗毒株中的REV．LTR插入序列与美国疫苗毒株Vac-1-A。中的REV-LTR插入序列有99．6％的同源性。但是,这5个中国禽痘疫苗毒株中整合的REVLTR与中国近年分离到的REV野毒株HA9901的5’LTR的同源性只有75．4％-92．4％。     

乳酸乳球菌食品级表达载体的研究进展

乳酸乳球菌（L.lactis）是乳球菌属中最重要和最典型的一个种,在食品工业中应用广泛,被公认为安全的（generally regards as safe,GRAS）食品级微生物。以乳酸乳球菌作为宿主菌,构建表达载体用来表达异源蛋白和酶,逐渐成为食品工业、生物制药和疫苗研究的热点。近年来,乳酸乳球菌的分子微生物学研究取得了重大进展,这为表达载体的构建奠定了基础,一些具有不同用途的乳酸乳球菌基因表达载体已经构建,用来表达抗原蛋白、细胞因子和生物酶等。其中,以来源于食品级微生物的DNA片段构建的食品级表达载体引起人们的关注。     

试剂盒半小时擒获艾滋病毒

上海科华生物工程股份有限公司研发出一种艾滋病诊断试剂盒,只需一滴血加上少量药水,半小时内就能检测出血液中是否有艾滋病病毒。近日,该试剂盒被克林顿基金会确定为其在全球的艾滋病诊断系统四大供应商之一。通过这一渠道,科华公司的艾滋病抗体诊断试剂盒将大批量出口到亚非拉及欧洲部分地区。而在此次人选克林顿基金会的4家诊断系统供应商中,该试剂盒的表现优于美国、以色列和印度公司。     

以儿童呼吸道感染为主的非典型EBV感染报道

目的报道儿童EBV感染所致的临床疾病谱与年龄特点,以进一步提高对EBV感染诊治水平.方法回顾性分析了EBV-VCA-IgM或EBV-DNA-PCR诊断的690例儿童EBV感染的疾病分布和年龄分布特点.结果EBV感染儿童非典型传染性单核细胞增多症患儿422例,占61.16%,非典型EBV感染268例,占38.84%.非典型EBV感染中以呼吸道感染最为多见,为191例,占非典型EBV感染的71.27%.其他为皮炎或口炎、血小板减少性紫癜、腹泻病、川畸病、肠系膜或颈淋巴结炎、肾炎或肾病和CNS感染等.EBV感染致传染性单核细胞增多症和呼吸道感染在各年龄组的分布差异无显著性,EBV感染男女比为1.79：1.结论儿童EBV感染所致疾病多样,累及系统多,非典型表现以呼吸道感染为主.传染性单核细胞增多症和呼吸道感染在各年龄组间差异无显著性.     

双歧杆菌作为基因治疗转移载体的研究进展

双歧杆菌是人和动物肠道内最重要的生理菌,它在机体内发挥生物屏障、防辐射、抗衰老、抗感染、缓解便秘、降低高胆固醇血症、控制内毒素血症、改善乳糖消化不良、营养免疫等功能,同时它还具有抗肿瘤的作用。近年来的最新研究还发现,低氧区的存在是实体瘤的—个特性,而厌氧菌具有趋低氧代谢的特点,双歧杆菌是一类革兰阳性、无运动、无芽胞的专性厌氧菌,它无毒无害,可与宿主和谐相处,所以将肿瘤治疗基因转入双歧杆菌,它可能成为肿瘤基因治疗的一个理想的靶向性转移载体。现就双歧杆菌作为肿瘤基因治疗转移载体的研究作一综述。     

细菌作为抗肿瘤载体的研究进展

细菌作为抗瘤剂的应用已历史悠久,早在100多年前,纽约医生COLEY就尝试用细菌来治疗肿瘤。现在人们往往采用分子生物学技术,通过基因改造的方法使细菌变得基本无毒并将外源基因导入细菌载体,实验证明这种方法具有很大的优越性,为肿瘤的治疗提供了新的思路,近来已成为肿瘤生物治疗研究的热点之一。     

浙南地区戊型病毒性肝炎62例临床分析

目的了解戊型病毒性肝炎的临床特点。方法对浙南地区62例戊型病毒性肝炎进行回顾性分析。结果男女之比为4．17：1。青壮年多发（54．83％）．老年人次之（35．48％）,冬春季发病率与夏秋季相似。起病急,以乏力、纳差、皮肤眼白黄染为主要表现．其次可有发热、恶心、呕吐、厌油、腹胀等症状及肝区叩痛、肝脾肿大、腹部压痛等体征。肝功能损害明显,可有凝血功能、甲胎蛋白的改变。尤其老年组ALT、TBiL升高显著．白蛋白下降明显。经治疗后。ALT复常较TBiL快,老年组TBiL复常时间长。出院前末次ALT均正常。TBiL仍偏高27例（43．55％）,以老年组居多（74．07%）。结论浙南地区戊型病毒性肝炎有较典型的临床表现;老年戊型肝炎患者黄疸发生率高。程度深,消退慢,低蛋白血症多见,更易发生淤胆。     

核酸疫苗双表达载体的构建及表达

将微小病毒内部核糖体进入位点(IRES)基因克隆到质粒pVAXI载体多克隆位点,构建出核酸疫苗双表达载体pVI。将绿色荧光蛋白(EGFP)基因和新霉素磷酸转移酶(neor)基因作为报告基因,连接到pVI载体IRES基因的前后两处多克隆位点,构建出表达载体pEIN。通过脂质体介导的方法将该载体转染COS-7细胞,筛选到同时表达绿色荧光蛋白和新霉素磷酸转移酶的表达株,表明成功地构建了核酸疫苗双表达载体,为构建多价核酸疫苗及带有分子佐剂的核酸疫苗打下了基础。     

引入CpG基序的汉滩病毒G2糖蛋白基因的克隆及表达

构建汉滩病毒G2糖蛋白的真核表达载体,并加入可增强小鼠免疫刺激作用的CpG基序,检测其可否在真核细胞中表达。参照Genebank中汉滩病毒M的全基因序列设计引物,引物两端引入可增强小鼠免疫刺激作用的CpG基序及双酶切位点,通过聚合酶链反应(PCR)获得含CpG基序的G2片段,并将其与T载体pMD18-T相连,测序后克隆至真核表达载体pcDNA3.1 上,将此真核表达载体以脂质体法转染至真核细胞Vero-E6中,利用间接免疫荧光法(IFA)检测发现转染后的Vero-E6中出现特异性的绿色荧光。结果表明本实验成功构建了汉滩病毒包膜糖蛋白G2的重组体。