肠道菌群紊乱所致炎症反应与抑郁症

抑郁症是一种与炎症反应、神经免疫关系密切的神经精神疾病。微生物,尤其是肠道菌群,则与人类免疫调节机制形成、感染和炎症反应息息相关。研究已证实,肠道菌群在炎症性肠病、哮喘等自身免疫性疾病的发生发展过程中起了相当大的作用。这些探讨非感染性疾病与微生物的关系的研究和理论形成了卫生学假说,亦即"老朋友"假说。目前,很多研究正在运用卫生学假说的观念,探索肠道菌群与抑郁症发生、发展、预防和治疗之间的联系,并取得了一些进展。本文重点就肠道菌群失调是否能够促进抑郁症发生及其可能机制做一综述。     

巨块型肝癌的放射治疗临床效果探讨（附190例报告）

目的：探讨和分析三维适形放疗和逆向调强放疗在巨块型肝癌的治疗上的临床价值。方法：回顾性分析了本院自2004年1月至2010年12月间收治的190例巨块型肝癌放射治疗患者的临床资料,根据治疗方式的不同分为三维适形放射治疗（Three—di-mensionalconformalradiationtherapy,3D．CRT）组95例以及逆向调强放疗组（Intensity-modulatedradiotherapy,IMRT）95例。并对放疗后患者肿瘤的直径以及1、3年内的生存率进行对比分析。结果：两种治疗方式对巨块型肝癌具有一定的治疗效果,其中常规三维适形放射治疗能够让肿瘤缩小5-10％,1年和3年后的存活率为78．9％（75／95）、12．6％（12／95）;而逆向调强放疗能够让肿瘤缩小15％以上,1年和3年后的存活率为85．3％（81／95）、16．8％（16／95）。结论：三维适形放射和逆向调强放疗技术均可有效的缩小肿瘤,提高患者的1、3年生存率,而逆向调强放疗更具临床优势。     

Smo基因在人肝癌Huh-7细胞中的表达及小RNA干扰Smo基因表达对肝癌Huh-7细胞增殖及凋亡的影响

目的:在细胞学层面上研究Smo基因在人肝癌Huh-7细胞中的表达及小RNA干扰Smo基因表达对肝癌Huh-7细胞增殖及凋亡的影响。方法:Huh-7细胞培养,总RNA抽提,紫外分光光度计纯度测定,Western印记法检测Smo蛋白表达,转染后流式细胞检测Huh-7凋亡率。结果:在mRNA和蛋白水平Smo均强表达。siRNA-1干扰序列干扰结果最强,转染后可诱导Huh-7细胞凋亡。结论:siRNA-l能对肝癌Huh7细胞Smo基因表达产生干涉作用,siRNA-1序列能有效地降解肝癌Huh7细胞内的SmomRNA,使Smo mRNA及Smo蛋白表达下调,从而达到沉默肝癌Huh7细胞中Smo mRNA表达的效果。     

第三代腺病毒载体的研究进展

第三代腺病毒载体(也称为空壳载体,辅助病毒载体等)的研究已近十年,它在研究中所表现出来的特点使大多数研究者认为它是一个很有希望的理想的基因治疗转导载体。但由于生产该类载体的生产系统比较复杂,影响因素多,至今仍不能提供临床级的病毒进行研究。该文首先总结了腺病毒(载体)的性质,回顾了第三代腺病毒载体的产生和研究历程,总结了各生产系统之间的改进与不同,以及第三代腺病毒载体在基因相关疾病中的具体应用,希望对以后空壳载体的发展有所帮助。     

表达人内啡肽的腺病毒/腺相关杂合病毒的构建及体外表达分析

应用分子生物学方法将人β_内啡肽融合基因序列克隆入腺病毒穿梭质粒pDC312_AAVEE,后者与骨架质粒共转染HEK293细胞,包装得到含转基因腺病毒腺相关杂合病毒AdAAV_EE。用PCR方法对杂合病毒进行鉴定,TCID50法测定病毒滴度。杂合病毒感染体外培养细胞观察转基因表达,ELISA法测定培养液中表达产物浓度。PCR法证实转基因正确插入了杂合病毒基因组内,且没有野生型病毒污染,病毒滴度为1.29×1010PFUmL。结果表明转基因从第1天到第14天的表达水平呈上升趋势,第14天达到3141pgmL。     

人神经生长因子信号肽介导β-内啡肽的分泌表达

目的:构建人神经生长因子信号肽与人β-内啡肽融合基因的真核表达载体,研究人神经生长因子信号肽介导β-内啡肽的分泌表达.方法:取得人基因组后,PCR 法获取人的神经生长因子信号肽部分序列及人β-内啡肽序列;通过 SOE-PCR法将两段 DNA 序列连接,然后插入到真核表达载体内,测序正确后扩增转染级的真核表达载体.表达载体脂质体法转染 NIH3T3细胞,转染后 48-72h 收集细胞及培养上清,RT-PCR 法检测融合基因的转录.RIA 法测定细胞外β-内啡肽的浓度.结果:成功构建全人源的分泌型表达β-内啡肽的真核表达载体,DNA 序列经测序完全符合实验设计;融合基因能够顺利地得到转录并进行表达翻译,在细胞培养上清中可检测到其产物.结论:构建的真核表达载体能够分泌表达人β-内啡肽,提示人神经生长因子信号肽序列能够发挥其介导蛋白产物分泌表达的作用.     

携带hIFN-γ的增殖型腺病毒治疗胃癌的体外实验研究

目的：研究增殖型腺病毒CNHK300-hIFN-γ在胃癌细胞中的增殖、杀伤能力与表达hIFN-γ蛋白的能力。方法：病毒增殖实验比较CNHK300-hIFN-γ与CNHK300在胃癌细胞SGC-7901与成纤维细胞BJ中的增殖能力;ELISA法比较CNHK300-hIFN-γ和复制缺陷型腺病毒Ad-hIFN-γ在细胞中hIFN-γ蛋白的表达量;细胞活力MTT检测法与CPE实验观察CNHK300-hIFN-γ对胃癌细胞与正常细胞的杀伤效应。结果：增殖实验结果表明CNHK300-hIFN-γ能选择性地在端粒酶阳性的胃癌细胞中大量增殖;ELISA实验结果表明CNHK300-hIFN-γ在胃癌细胞中hIFN-γ的表达量可至117.26±15.92ng/ml;MTT与CPE实验表明CNHK300-hIFN-γ对胃癌细胞有显著的杀伤性,对正常细胞无明显杀伤。结论：增殖型腺病毒CNHK300-hIFN-γ感染胃癌细胞后增殖活跃并能大量表达目的基因hIFN-γ,对胃癌细胞有明显杀伤作用但对正常细胞无明显杀伤,为胃癌的病毒基因治疗进一步提供了理论依据。     

用组织微阵列技术分析鼻咽癌变多阶段组织细胞周期蛋白D1过表达

为了探讨细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)在鼻咽癌变多阶段病变组织中的蛋白质表达与鼻咽癌变的关系,应用组织微阵列(tissue microarray)技术,采用免疫组化方法检测Cyclin D1在鼻咽癌旁粘膜上皮单纯性增生/化生(simple hyperplasia/ metaplasia,SH/SM)、异型增生/化生(atypical hyperplasia/metaplasia,AH/AM)和鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的蛋白质表达,阳性表达率分别为30.0%(3/10)、90.0%(18/20)和62.9%(39/62),其中在异型增生/化生中呈"一过性增高".表明Cyclin D1高表达可能为鼻咽癌发生过程中的早期事件;异型增生/化生可能是鼻咽癌变的重要"关卡".     

肝癌家族聚集性发病的分子遗传学研究进展

许多研究表明,肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）呈家族聚集性发病的倾向比较明显,肝癌家族史阳性的人群罹患肝癌的风险远超阴性人群。但关于肝癌聚集性发病的机制并未得到全面的阐释。该文对近几年来与肝癌家族聚集性发病相关的研究作出综述,以期为肝癌家族聚集性发病的研究提供一定的理论依据。     

肝门部胆管癌临床诊断与放疗疗效分析

目的：探讨不同手术方式治疗肝门部胆管癌的效果及其对术后放疗的影响。方法：回顾性分析我科自2008年6月至2012年6月间收治的60例肝门部胆管癌患者的临床资料,根据手术方式不同,将所选病例分为两组,其中26例接受根治性切除术,34例患者采用姑息性手术进行治疗。对比不同手术方式下放疗后患者生存情况。结果：围手术期死亡1例。两组患者各有2例患者失访。随访的23例根治手术患者1、3、5年间的生存率为19（82．6％）、10（43．5％）、2（8．7％）;32例姑息性手术患者1、3、5年间的生存率为15（46．9％）、4（12．4％）、0（0％）。根治性手术后患者1、3、5年间的生存率显著性高于姑息性手术治疗的患者,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：通过术前影像学诊断,选择合理的手术方式,联合术后放疗,可有效延长肝门部胆管癌患者的生存时间。