Smo基因在人肝癌Huh-7细胞中的表达及小RNA干扰Smo基因表达对肝癌Huh-7细胞增殖及凋亡的影响

目的:在细胞学层面上研究Smo基因在人肝癌Huh-7细胞中的表达及小RNA干扰Smo基因表达对肝癌Huh-7细胞增殖及凋亡的影响。方法:Huh-7细胞培养,总RNA抽提,紫外分光光度计纯度测定,Western印记法检测Smo蛋白表达,转染后流式细胞检测Huh-7凋亡率。结果:在mRNA和蛋白水平Smo均强表达。siRNA-1干扰序列干扰结果最强,转染后可诱导Huh-7细胞凋亡。结论:siRNA-l能对肝癌Huh7细胞Smo基因表达产生干涉作用,siRNA-1序列能有效地降解肝癌Huh7细胞内的SmomRNA,使Smo mRNA及Smo蛋白表达下调,从而达到沉默肝癌Huh7细胞中Smo mRNA表达的效果。     

小型猪血浆中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的LC-MS/MS 同时测定方法的建立及在药动学研究中的应用

目的：建立同时测定小型猪血浆中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的LC-MS/MS 法,并研究小型猪皮肤外用二丙酸倍他米松乳膏后,二丙酸倍他米松及倍他米松的药动学特征。方法：血浆样品经酸化后以乙醚- 环己烷（4 ∶ 1）提取,LC-MS/MS 分析,以Hedera ODS-2（150 mm×2.1 mm,5 μm）为分析柱,流动相为5 mmol?L-1 醋酸铵水溶液（含0.1% 乙酸）– 甲醇,梯度洗脱。二丙酸倍他米松、倍他米松及内标布地奈德的监测离子对分别为m /z 563.2（[M+CH3COO]-）→ 483.1、m /z 451.2（[M+CH3COO]-）→ 361.0 和m /z 489.3（[M+CH3COO]-）→ 357.1。对小型猪外用二丙酸倍他米松乳膏后其血浆中二丙酸倍他米松及代谢物倍他米松的浓度进行测定,并计算主要药动学参数。结果：二丙酸倍他米松血药浓度在26.85~644.4 ng?L-1 范围内线性关系良好,倍他米松血药浓度在10.62~637.2 ng?L-1 范围内线性关系良好。结论：本方法专属性强、简便、灵敏,可用于血浆样本中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的测定及药动学研究。