用组织微阵列技术分析鼻咽癌变多阶段组织细胞周期蛋白D1过表达

为了探讨细胞周期蛋白D₁(Cyclin D₁)在鼻咽癌变多阶段病变组织中的蛋白质表达与鼻咽癌变的关系,应用组织微阵列（tissue microarray）技术,采用免疫组化方法检测Cyclin D₁在鼻咽癌旁粘膜上皮单纯性增生/化生(simple hyperplasia/ metaplasia,SH/SM)、异型增生/化生(atypical hyperplasia/metaplasia,AH/AM)和鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的蛋白质表达,阳性表达率分别为30.0%（3/10）、90.0%（18/20）和62.9%（39/62）,其中在异型增生/化生中呈“一过性增高”.表明Cyclin D₁高表达可能为鼻咽癌发生过程中的早期事件;异型增生/化生可能是鼻咽癌变的重要“关卡”.     

CDX2在胃癌及癌前病变组织中的表达及其临床意义

目的研究CDX2在胃癌及癌前病变组织中的表达及其与临床病理因素之间的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测CDX2在胃癌及癌前病变组织中的表达,采用阿新兰/过碘酸雪夫氏染色(AB/PAS)和高铁二铵/阿新兰(HID/AB)染色对胃黏膜肠化生进行分型。结果 (1)CDX2在正常胃黏膜组织、慢性浅表性胃炎中不表达,CDX2在肠化、异型增生及胃癌中的阳性率(81.7%、50%、48.2%)均明显高于正常胃黏膜组织(P0.05),在肠化组织中的表达明显高于异型增生和胃癌(P0.05),在异型增生和胃癌中的阳性率差异无显著性(P0.05)。CDX2的表达与肠化的分型和异型增生的分级之间均无关系。(2)CDX2在肠型胃癌中的阳性率(67.4%)明显高于弥漫型和混合型胃癌(25.7%、42.9%);CDX2的表达与胃癌分化程度呈正相关,而与淋巴结转移和临床分期呈负相关,差异均有统计学意义。CDX2阳性表达组的五年生存率明显高于阴性表达组(P=0.038);多种变量对胃癌患者术后生存时间影响的分析显示,CDX2的表达和淋巴结转移是影响胃癌预后的独立因素(P0.05)。结论 CDX2可能在胃粘膜肠化生的发生及胃癌的发生发展中起重要作用,可作为胃癌诊断、判断胃癌的恶性程度及患者预后的有用指标。     

乳腺癌中Rho A蛋白表达及其与Cyclin D1和P21WAF1/CIP1蛋白表达的相关性

目的探讨Rho A蛋白在人乳腺癌中的表达情况,Rho A蛋白与临床病理因素的关系,及其与细胞周期蛋白Cyclin D1,细胞周期抑制蛋白 P21 WAF1/CIP1表达的相关性.方法应用免疫组化S-P法,检测64例乳腺癌组织及20例正常乳腺组织中Rho A蛋白、Cyclin D1和P21 WAF1/CIP1蛋白的表达情况.结果 (1)Rho A、 Cyclin D1和P21 WAF1/CIP1蛋白在正常乳腺组织中的表达率分别为5.00%、25.00%、15.00%,在乳腺癌组织中的表达率分别为73.44%、59.38%、48.44%,三者在乳腺癌组织中的阳性表达分别与正常乳腺组织相比,均差异有显著性意义(P< 0.01).(2)Rho A蛋白表达与病理组织分级,淋巴结转移相关(P< 0.05),与患者年龄、肿瘤大小及临床分期无关.(3)RhoA蛋白与P21 WAF1/CIP1蛋白表达呈负相关(χ2=4.548,P<0.05),与Cyclin D1蛋白表达无关.结论乳腺癌患者RhoA蛋白过表达与预后不良有关.RhoA蛋白通过下调P21 WAF1/CIP1蛋白参与细胞周期调节,进而与乳腺癌发展及侵袭转移相关.     

慢性胃炎肠化生CD_(44)、CD_(44V6)及Cyclin D_1、Cyclin E的表达和意义

目的探讨慢性胃炎胃粘膜肠化生CD44、CD44V6及cyclin D1、Cyclin E表达的意义。方法利用免疫细胞化学技术对39例伴有肠化生的慢性胃炎和5例正常人胃窦粘膜的活检组织进行检查。结果正常人胃窦粘膜上皮,腺上皮对CD44、CD44V6、Cyclin D1和Cyclin E均为阴性,但在有神经内分泌样细胞的粘膜,CD44V6和cyclin D1为阳性。慢性胃炎肠化生区和不典型增生区除CD44为阴性外,CD44V6、cyclin D1和cyclin E均呈现不同的阳性反应,但未见有阳性的神经内分泌样细胞。间质细胞大都呈阳性反应。结论CD44V6、cyclin D1和cyclin E可能是胃癌前状态的早期事件,而CD44可能为胃癌晚期的标志物。     

慢性胃炎肠化生CD44、CD44V6及Cyclin D1、Cyclin E的表达和意义

目的探讨慢性胃炎胃粘膜肠化生CD44、CD44V6及cyclin D、Cyclin E表达的意义。方法利用免疫细胞化学技术对39例伴有肠化生的慢性胃炎和5例正常人胃窦粘膜的活检组织进行检查。结果正常人胃窦粘膜上皮,腺上皮对CD44、CD44V6、Cyclin D1和Cyclin E均为阴性,但在有神经内分泌样细胞的粘膜,CD44V6和cyclin D1为阳性。慢性胃炎肠化生区和不典型增生区除CD44为阴性外,CD44V6 mcyclin D1和cyclin E均呈现不同的阳性反应,但未见有阳性的神经内分泌样细胞。问质细胞大都呈阳性反应。结论CD44V6、cyclin D1和cyclin E可能是胃癌前状态的早期事件,而CD44可能为胃癌晚期的标志物。     

MMP-2 VEGF在肺腺癌细胞中的表达及其意义

目的研究探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)及血管内皮生长因子(VEGF)在胸腔积液、痰液中肺腺癌细胞的不同表达及二者在肺癌细胞侵袭转移过程中的相互关系。方法选择胸腔积液、痰液共计264例癌性及异型增生细胞标本经免疫细胞化学方法分别检测MMP-2 VEGF的表达情况。结果免疫细胞化学结果显示:MMP-2在胸腔积液中腺癌细胞、异型增生上皮细胞的表达率分别为71.7%(99/138)、16.7%(6/36),在胸膜炎和结核病变典型良性胸腔积液增生上皮细胞中不表达;在痰腺癌细胞中的表达率为39.1%(27/69),统计结果显示MMP-2在恶性胸腔积液腺癌细胞中的表达率明显高于在异型增生的上皮、增生的上皮及痰腺癌细胞的表达率(P均0.05)。VEGF在胸腔积液中腺癌细胞、异型增生上皮细胞的表达率分别为89.1%(123/138)、33.3%(12/36),在胸膜炎和结核病变典型良性胸腔积液增生上皮细胞中不表达;在痰腺癌细胞中的表达率为47.8%(33/69),VEGF在恶性胸腔积液腺癌细胞中表达率明显高于在异型增生的上皮细胞、增生的上皮细胞及痰腺癌细胞的表达率(P均0.05),且MMP-2同VEGF总阳性表达率之间成正相关(r=0.867,P=0.049)。结果 MMP-2 VEGF在胸水腺癌细胞中高表达,可能与肺腺癌的转移、侵袭有关;两者联合做免疫细胞化学检查对肺腺癌细胞病理诊断有辅助意义。     

Cyclin B1、P34cdc2在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的为了研究非小细胞肺癌组织中Cyclin B1及P34cdc2的表达,探讨Cyclin B1及P34cdc2的表达与非小细胞肺癌临床病理特征的关系.方法随机收集非小细胞肺癌(含癌旁细支气管和/或小支气管增生组织和正常肺组织)标本100例.采用免疫组织化学SP法.结果显示在癌组织与癌旁细支气管和/或小支气管上皮增生组织及正常肺组织中Cyclin B1及P34cdc2表达差异有显著性(P＜0.01).在癌组织中有过表达;在癌旁细支气管和/或小支气管上皮增生组织中的表达较正常肺组织中的表达增强.100例非小细胞肺癌组织中Cyclin B1及P34cdc2表达呈正相关(P＜0.01),相关系数为0.966.癌旁细支气管和/或小支气管上皮增生组织中,Cyclin B1及P34cdc2的表达也呈正相关(P＜0.01),相关系数为0.638.组织类型、分化程度和淋巴结转移与Cyclin B1及P34cdc2的表达均无统计学意义(P＞0.05).不同临床分期的非小细胞肺癌,其Cyclin B1及P34 cdc2的表达差异有显著性(P＜0.05).结论 Cyclin B1及P34cdc2在非小细胞肺癌中有过表达现象,二者在M期前形成过多的促成熟因子(maturation promoting factor, MPF)从而加速非小细胞肺癌细胞跨越G2/M期关卡进入分裂期.过表达的Cyclin B1及P34cdc2可作为反映非小细胞肺癌细胞分裂增殖能力和临床分期的指标之一.     

p27kip1、Cyclin D1在卵巢癌中的表达及临床意义

目的探讨p27kip1、Cyclin D1在卵巢癌发生方面的意义.方法应用免疫组织化学方法及半定量分析方法,检测50例卵巢癌、19例卵巢良性上皮肿瘤、 13例正常卵巢组织中的p27kip1和Cyclin D1表达,并分析它们与良恶性肿瘤、病理学分级、临床分期的相关性. 结果正常卵巢和卵巢良性肿瘤间,p27和Cyclin D1的各自表达无明显差异;p27在正常卵巢组织和卵巢良性上皮肿瘤中高表达,在卵巢癌中表达降低(P<0.05),且随着肿瘤分级、分期增高(恶性程度增高),阳性表达率逐渐下降;而Cyclin D1的表达则相反;两者在肿瘤中的表达呈负相关.结论 p27kip表达下降、Cyclin D1过表达可能在卵巢癌的发生中起重要作用,检测p27kip1、Cyclin D1在卵巢癌中的表达可预测肿瘤生物学行为特征,可以作为判断预后的指标.     

PIG11、Caspase-3蛋白在胃癌中的表达及临床意义

目的:探讨PIG11、Caspase-3蛋白在胃癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测80例胃癌组织、36例正常胃黏膜组织、30例肠上皮化生组织及31例异型增生组织中PIG11、Caspase-3蛋白的表达水平,并分析其表达与胃癌临床病理特征的关系及两者之间的相关性。结果:胃癌组织中PIG11、Caspase-3蛋白的阳性表达率均显著低于正常胃黏膜、肠上皮化生及异型增生组织(P0.01);PIG11、Caspase-3蛋白表达水平与胃癌的分化程度、临床分期、有无淋巴结转移及远处转移密切相关(P0.05),但与患者的年龄、性别及肿瘤的浸润深度无关(P0.05);PIG11、Caspase-3蛋白在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.859,P0.01)。结论:PIG11、Caspase-3蛋白在胃癌中明显表达下调,且与胃癌的分化程度、临床分期、有无淋巴结转移及远处转移密切相关,可能作为胃癌预后评估的参考指标。PIG11表达下调可能通过抑制Caspase-3的表达促进胃癌的发生和发展。     

葡萄糖6-磷酸脱氢酶调控细胞周期蛋白E1和细胞周期蛋白依赖性激酶2促进细胞增殖及其在肾透明细胞癌中的预后价值

肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)是一种转移率高、预后差的细胞代谢性疾病,对其有效诊疗及预后分子标志物的研究十分重要。葡萄糖6-磷酸脱氢酶(glucose 6-phosphatedehydrogenase, G6PD)在ccRCC中高表达,并提示患者不良预后,其促进ccRCC细胞增殖的分子机制有待进一步揭示。本研究发现,降低G6PD可抑制细胞周期G₁/S期转化并显著抑制ccRCC细胞增殖。G6PD可在细胞水平调控G₁/S期转化及增殖相关因子Cyclin D1,CDK4,CDK6,Cyclin E1和CDK2基因表达。TCGA数据库分析结果表明,ccRCC 中Cyclin D1,Cyclin E1 和 CDK2的mRNA 水平显著升高,而CDK4表达无明显差异,CDK6表达却显著降低。相关性分析结果显示,G6PD与Cyclin D1呈显著负相关(P<0.0001),G6PD与CDK4,CDK6之间无显著相关性(P>0.05),G6PD与Cyclin E1(P<0.0001)以及CDK2(P<0.05)显著正相关。进一步免疫组化检测结果表明,Cyclin E1和 CDK2在ccRCC肿瘤组织中表达显著升高。生存预后分析结果显示,Cyclin D1高表达提示ccRCC患者整体预后更为良好,CDK4和CDK6表达水平在ccRCC患者总生存率预测中无意义;而Cyclin E1和CDK2高表达均可提示ccRCC患者预后不良。进一步细胞水平检测发现,Cyclin E1、CDK2表达降低可显著逆转G6PD促进ccRCC细胞增殖的能力。综上,与增殖相关因子Cyclin D1,CDK4和CDK6相比,G6PD有可能通过促进Cyclin E1和CDK2表达升高而发挥促进 ccRCC肿瘤细胞增殖的作用,并且这3者的异常高表达有望成为ccRCC患者不良预后的独立生存预测因素。     

Investigation of the mechanism of temperature sensitivity of the electroreceptors of ampullae of lorenzini

In experiments on Black Sea skates (Raja clavata), the potential of the receptor epithelium of the ampullae of Lorenzini and spike activity of single nerve fibers connected to them were investigated during electrical and temperature stimulation. Usually the potential within the canal was between 0 and –2 mV, and the input resistance of the ampulla 250–400 k. Heating of the region of the receptor epithelium was accompanied by a negative wave of potential, an increase in input resistance, and inhibition of spike activity. With worsening of the animal's condition the transepithelial potential became positive (up to +10 mV) but the input resistance of the ampulla during stimulation with a positive current was nonlinear in some cases: a regenerative spike of positive polarity appeared in the channel. During heating, the spike response was sometimes reversed in sign. It is suggested that fluctuations of the transepithelial potential and spike responses to temperature stimulation reflect changes in the potential difference on the basal membrane of the receptor cells, which is described by a relationship of the Nernst's or Goldman's equation type.I. P. Pavlov Institute of Physiology, Academy of Sciences of the USSR, Leningrad. I. M. Sechenov, Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry, Academy of Sciences of the USSR, Leningrad. Pacific Institute of Oceanology, Far Eastern Scientific Center, Academy of Sciences of the USSR, Vladivostok. Translated from Neirofiziologiya, Vol. 12, No. 1, pp. 67–74, January–February, 1980.     

Determination of stoichiometry of radioiodination of proteins

A sensitive method for the detection of small quantities of hydrophobic antioxidant free radical scavengers such as butylatedhydroxytoluene (BHT) and butylatedhydroxyanisole (BHA) in aqueous samples is described. The procedure involves extraction of the hydrophobic free radical scavenger into an organic solvent phase, followed by the subsequent reaction of an aliquot of this extract with the stable cation radical tris(p-bromophenyl)amminium hexachloroantimonate (TBACA). In experiments with BHT and BHA, the loss of TBACA absorbance at 730 nm was found to be linearly proportional to the amount of antioxidant added, with quantities of BHT as small as 200 pmol being easily detectable. In aqueous suspensions of dimyristoylphosphatidylcholine vesicles, assays of the aqueous BHT concentration showed that BHT partitioned strongly into the membrane phase, achieving very high BHT/phospholipid ratios. For a given concentration of BHT, partitioning into the membrane phase was greater in large, multilamellar liposomes than in either small, single-walled vesicles or in purified rat brain synaptic vesicle membranes. Direct assay of BHT and BHA in phospholipid membranes, however, was complicated by a nonspecific interaction between TBACA and the phospholipid.