乙型肝炎病毒核心启动子下游克隆入Teto序列后其在不同细胞系中转录活性的变化

目的:探讨将Teto序列克隆入乙型肝炎病毒核心启动子(Cp)下游后对该启动子在不同细胞系中转录活性的影响。方法:利用PCR从质粒pTL-8中扩增7个Teto序列,并将其克隆入T载体pMD19-T/Simple中,测序正确后将7个Teto序列亚克隆入pGL3-Basic/Cp萤光素酶报告基因质粒中Cp启动子的下游,以构建质粒pGL3-Basic/Cp/x7t。将能表达TetR的质粒pTL-8的萤光素酶编码基因切除后,与pGL3-Basic/Cp/x7t共转染肝癌细胞系HepG2、宫颈癌细胞系HeLa、绿猴肾细胞系COS-7、乳腺癌细胞系MDA-MB-231和结肠癌细胞系HT-29,通过双萤光素酶检测系统检测萤光素酶在这些不同细胞系中的活性,以分析将Teto序列克隆入乙型肝炎病毒核心启动子下游后对Cp在不同细胞系中转录活性的影响。结果:构建了质粒pGL3-Basic/Cp/x7t,将其转染HeLa、COS-7、HepG2、MDA-MB-231和HT-29细胞后其相对萤光素酶活性分别为56.14、171.52、211.03、6.11和34.24。结论:将Teto序列克隆入Cp下游并不能明显提高Cp的转录活性,而且破坏了Cp的组织特异性转录活性。     

THE ANTAGONISTIC ACTIVITY OF ONE B．SUBTILIS MUTANT BS9920 IN VITRO

Staphlococcus.aureus,Pseudomonas aeruginosa and Es-cherichia.coli are three com mon infectious pathogens,espe-cially on wound infection[1 ] .Antibiotics play the predomi-nant role in treating infection After long- term use,the sub-sequent problem come forth,the strains with antibiotics-resistance could emerge as a result[2 ] ,to sever extent,kidneytoxicity and leucocytopenia appears[3] .With respect to these probiem s,biological measures de-serve serious consideration,as it is really a brand …     

围栏条件下花鼠找寻种子的途径和方式

2009年8月和2010年8月,在黑龙江省带岭区东方红林场半天然围栏内研究了花鼠(Eutamias sibiricus)对地表放置和埋藏种子的发现过程,摸清围栏条件下花鼠找寻种子信号的途径和方式.实验步骤如下:第1天在花鼠巢区对角每释放点地表放置1粒标记种子,共30粒;第2天在巢区对角每释放点埋藏1粒标记种子,共30粒...     

苹果四倍体品种天星的花粉形态及胚囊发育特征研究

利用扫描电子显微镜(SEM)和激光扫描共聚焦显微镜( LSCM)技术对二倍体富士苹果及其四倍体芽变品种天星的花粉性状及胚胎发育特征进行了观察与研究,结果表明:四倍体天星品种的畸形花粉率为10.27％,明显高于富士,花粉萌发率低,为62.42％.2个品种的花粉粒大部分侧面观为长椭圆形,具3沟型萌发孔沟,两极端形状宽而平整,极面观为三角形,但四倍体天星的花粉粒的极轴长和赤道轴长均大于二倍体富士,但P/E值小,差异显著,其花粉粒形状不及二倍体富士规则且饱满程度也低.四倍体天星的花粉表面为纵向条状纹饰,有少量分叉和穿孔,花粉外壁略显粗糙,不如二倍体富士的外壁光滑.天星和富士均为蓼型胚囊,二者均存在异常胚囊现象,天星的异常胚囊现象包括极核位置异常、极核数目异常、卵器结构异常、胚囊内有多个发育滞后的细胞等;而在富士中仅发现少数胚囊结构不完整的现象.     

TSA通过抑制STAT1磷酸化与核转位下调人肝癌细胞HepG2内 IDO的表达

目的:研究曲古抑菌素A (Trichostatin A, TSA)下调γ干扰素(interferon-gamma, IFN-γ)诱导的人肝癌细胞HepG2内吲哚胺2, 3-双加氧酶(indoleamine 2, 3-dioxygenase, IDO)表达的分子机制。方法: Western blot 检测TSA在IFN-γ诱导的HepG2细胞中IDO的表达、信号转导及转录激活子1(STAT1)的磷酸化和干扰素调节因子1(IRF-1)的诱导表达情况。用免疫细胞化学法检测TSA处理HepG2细胞后对IDO表达的影响。流式细胞术分析TSA处理后IFN-γ受体2表达量的变化,进一步在激光共聚焦显微镜下观察TSA对STAT1核转位的影响,利用双荧光素酶报告基因系统检测TSA对IFN-γ激活位点(γ-activated sites, GAS)、干扰素刺激应答元件(interferon stimulated response elements, ISRE)和核因子-κB (NF-κB)的激活的影响。结果:TSA以剂量依赖方式下调HepG2细胞内IFN-γ诱导的IDO表达、能明显抑制STAT1第701位酪氨酸的磷酸化和STAT1的核转位,但是上调IFN-γ受体2受体的表达。双荧光素酶报告基因分析和Western blot结果表明:TSA能显著抑制GAS和IRF-1 的激活却不能抑制NF-κB和ISRE的激活。 结论:TSA能下调IFN-γ诱导的HepG2细胞中IDO的表达,其机制可能是与其抑制STAT1的磷酸化和核转位,以及抑制STAT1与GAS的结合有关,而不是通过下调IFN-γ受体的表达来实现的。     

脾切除对肝纤维化大鼠肝脏TGFβ 1的表达和血清TGFβ 1水平的影响

目的：研究脾切除对肝纤维化大鼠肝脏TGFβ1的表达和血清TGFβ1水平的影响,探讨脾切除在肝纤维化中的意义。方法：用CCL4建立50例肝纤维化大鼠模型。于建模第3周,6周,及8周分别取大鼠肝脏和脾脏标本。用免疫组化SP方法测定其TGFβ1的表达,HE和姬姆萨染色检测肝纤维化。应用双抗体夹心ELISA方法测定15例模型大鼠行脾脏切除前后的血清TGFβ1水平,以及15例对照组大鼠的血清TGFβ1水平,并于术后4周取两组大鼠的肝脏标本,用免疫组化SP方法测定其TGFβ1的表达。应用CMIAS8彩色图像系统对阳性目标进行分析和处理。结果：随着肝纤维化程度的进展,大鼠肝脏和脾脏TGFβ1的表达也随之增加（P〈0.01）。脾切除组大鼠其血清TGF-β1的水平显著低于对照组大鼠（P〈0.05）,且脾切除组大鼠肝脏TGFβ1的表达低于对照组大鼠（P〈0.05）。结论：脾切除术在一定程度上可延缓肝纤维化的发展。     

甲型流感病毒HA基因的简单重复序列分布分析

以GenBank公开的甲型流感病毒亚型的血凝素(hemagglutinin,HA)核苷酸序列为材料,从简单重复序列(simple se-quence repeat,SSR)分布的分析角度出发,分析了来自于亚洲、非洲、北美洲、南美洲、欧洲、大洋洲的49个地区的76株甲流病毒的HA片段。分析表明:所分析序列的SSRs的分布都很相似,其中单碱基重复的相对丰度值和相对密度值均高于其它五种碱基重复的相对丰度值和相对密度值;甲流病毒HA片段的SSRs与HIV-1[16]基因中的SSRs相比,前者的相对丰度值和相对密度值高于后者。这些结果表明甲流病毒基因中的SSRs可能与甲流病毒的快速变异相关。     

连续逆流提取机及其在绞股蓝皂苷提取工艺中的应用

简述了中草药连续逆流提取机的基本结构和工作原理.以水为溶媒、绞股蓝为原料,进行绞股蓝有效成分的提取试验.以绞股蓝水溶出物和总皂苷为目标物,考察提取温度、液料比和提取时间等因素对提取得率的影响,并通过L9(33)正交实验设计,对提取工艺进行优选.采用中草药连续逆流提取机提取绞股蓝有效成分的最佳工艺条件:提取溶剂温度80 ℃,料液比1:35(g/mL),提取时间50 min;所得提取物得率为33.95%,总皂苷得率为8.9%.     

miR-143 通过抑制PTN 促进人骨髓间充质干细胞成脂分化

目的:研究miR-143调控人骨髓间充质干细胞(hMSCs)成脂分化的新机理。方法:将NC、miR-143、siPTN、miR-143i转入hMSCs中,诱导成脂分化,检测miR-143对成脂分化的影响。经miRNA靶点分析软件Findtar预测出miR-143在人多效生长因子(hPTN)的3’-UTR端有靶点。RT-PCR、western blot研究miR-143与hPTN的关系。构建hPTN 3’-UTR靶位点荧光检测质粒prltk-PTN及其突变质粒prltk-m,验证miR-143是否在人PTN 3’-UTR上有靶点。结果:miR-143促进hMSCs成脂分化,抑制hPTN的mRNA和蛋白表达水平。荧光报告实验证实miR-143在人PTN的3’-UTR上有靶点。结论:miR-143通过与hPTN3’-UTR上的靶点相结合而抑制hPTN的表达,从而促进了hMSCs成脂分化进程。     

胃炎的针灸治疗近况及作用机理探讨

本文阐述了关于针灸治疗胃炎的研究概况,从治疗方法和机制两方面进行归纳总结,为今后的进一步研究提供参考依据.针灸治疗胃炎的方法比较多,如毫针刺法、艾灸、温针法、穴位注射等;研究认为针灸治疗胃炎是通过调节神经通路,提高免疫功能,调节胃肠激素和胃分泌功能,调节运动功能和保护胃黏膜等方面来实现的.目前针灸治疗胃炎的疗效确切,值得推广.