拟南芥菜的核基因组研究

拟南芥菜的核基因组研究初立业，邵宏波，曲德业（四平师范学院生物工程所四平１３６０００）拟南芥菜（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ）具有许多不同于其它高等植物的特点，这些特点决定了它作为植物分子生物学的模式植物系统并得到了广泛的研究。目前已经在核...     

吸虫类线粒体基因组的特征及系统发生分析

本研究分析了吸虫纲下单殖亚纲的13个物种和复殖亚纲的37个物种,共50个物种的线粒体全基因组序列,旨在揭示吸虫类线粒体基因组的主要基本特征,探究吸虫纲物种的系统发生关系。吸虫类的线粒体基因组具有明显的A+T含量偏向性。吸虫类的12个蛋白质编码基因和两个核糖体RNA基因的变异程度很大,其变异比例在48.8%到92.0%之间。根据线粒体基因组的12个蛋白质编码基因和两个核糖体RNA基因的差异位点分析,建议采用ND5、CYTB和ND4基因作为16S、12S和COⅠ基因的辅助分子标记。吸虫类各物种的线粒体基因组出现了大量的基因重排现象,除鸮形目裂体科和多后盘目外,其余物种均遵循类似的基因排列顺序。线粒体基因组的系统发育结果强烈支持将单殖亚纲提升到单殖纲,并支持将目前分类地位未定的腹盘科野牛平腹吸虫归入斜睾目同盘总科。本研究将为吸虫类线粒体基因组的研究、分子进化和分子诊断等方面提供诸多信息,并在今后的实践应用中起到一定的指导作用。     

T7启动子作用下抗人TNF-α单链抗体的表达

基因工程技术构建的抗人TNF-α单链抗体克隆入表达载体pET15b-Etag中,在T7启动子的作用下,经0.1 mmol/L IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,其表达量占菌体总蛋白的38%.表达产物大部分以包涵体形式存在,而一小部分以有活性的可溶性形式出现于细菌的外周质中.这部分可溶性的表达产物占菌体总蛋白的6%,经双抗体夹心法和斑点印迹分析表明它具有抗原结合活性.     

台湾猴的初步研究(英文)

台湾猴(Macaca cyclopis)是一个较少为人所知的物种。直到本作者在1978年研究之前,尚未见系统的有关这种猴的野外观察报道。1978年以后,也无这方面的报道。作者在1978年的野外研究期间,用31天在不同的山区对台湾猴的种群(population) 进行了调查。而在这一年的6月和11月之间,又在台北动物园对台湾猴群进行了观察。与此同时,还访问了买卖动物的商人,当地的猎人。这篇论文论述了这次考察的结果,对台湾猴的种群结构、行为、生态、形态、动态,食物和采食行为,信息交往、领地和活动范围及其保护等问题进行了探讨。     

高频超声在乳腺微小结节良恶性鉴别诊断中的应用价值

目的:探究高频超声在乳腺微小结节良恶性鉴别诊断中的应用价值及其超声表现。方法:选取我院乳腺外科收治的确诊为乳腺微小结节的患者184例,术前采用高频超声技术对患者进行结节探测,将探测结果与病理切片比较,同时对良恶性微小结节之间的形态、血流、微钙化以及边缘轮廓等情况进行图像分析,总结两者之间存在的差异。结果:1经过高频超声,检测出184例乳腺微小结节患者,有238处微小结节,其中良性结节194处、恶性结节44处;病理切片显示,微小结节244处,其中良性结节197处、恶性结节47处。与病理切片比较,高频超声的结节检出率高达97.5%,良恶性结节的检出准确率分别为98.5%、93.6%;2结节形态规则度对比,良性结节较恶性结节更规则(P0.05);钙化情况比较,并非所有结节都出现钙化,两者钙化情况暂无可比性;结节边缘轮廓清晰度比较,良性结节多表现为边缘清晰,而恶性肿瘤多表现为边缘模糊;结节边缘良性结节较恶性结节更清晰;3血流检出率比较,恶性结节组显著高于良性结节组(P0.05)。结论:高频超声技术对乳腺微小结节的检出率较高,错误率较低,是鉴别乳腺微小结节良恶性的重要手段,具有较高的应用价值,对乳腺癌的早期诊断具有重大意义。     

人呼吸道合胞病毒感染性克隆构建及其验证

人呼吸道合胞病毒（Human respiratory syncytial virus, HRSV）是引起全球婴幼儿急性下呼吸道感染的重要病原体。本研究旨在建立HRSV原型株Long毒株的反向遗传操作系统。通过利用细菌人工染色体（Bacterial artificial chromosome,BAC）为载体骨架构建HRSV的Long毒株全长质粒（Long-BAC），以pcDNA3.1为载体构建分别表达HRSV N、P、M2-1和L蛋白（pcDNA3.1-N,pcDNA3.1-P,pcDNA3.1-M2-1和pcDNA3.1-L）的四个辅助质粒，将五个质粒共转染于表达T7 RNA聚合酶的BSR T7/9细胞系进行病毒拯救。采用间接免疫荧光（Immune fluorescence assay,IFA）和测序方法对拯救的病毒进行鉴定，并评价其在细胞和动物水平的生物学特征。本研究首次成功构建以BAC载体为骨架的HRSV原型株Long感染性克隆，拯救的病毒在不同代数测序结果显示无突变，能够稳定传代，病毒滴度为3×106 PFU/mL；与实验室保存野生型Long株（Long-WT）相比具有相似的细胞...     

2009-2019年中国大陆柯萨奇病毒A14型基因特征分析

柯萨奇病毒A14型属于肠道病毒A组，可引起手足口病和无菌性脑膜炎等疾病，但目前全球对CVA14的分子流行病学研究较少，尚无对CVA14基于全长VP1区进行明确分型的相关研究。因得到中国手足口病监测网络的技术支持，本研究获得2009-2019年在中国大陆分离到的15株CVA14，应用RT-PCR对其全长VP1区进行扩增、测序和分析，并与GenBank中下载的22条CVA14全长VP1序列共同构建系统发育树。结果显示，2009-2019年中国大陆分离的15株CVA14与原型株G-14的核苷酸与氨基酸相似性分别为81.8%～82.9%与95.6%～96.9%,15株CVA14之间的核苷酸与氨基酸相似性分别为91.7%～99.7%与98.3%～100%。中国大陆所有的22条CVA14序列之间的核苷酸与氨基酸相似性分别为91.7%～100.0%与98.3%～100.0%。中国大陆所有的CVA14与国外8条CVA14序列之间的核苷酸与氨基酸相似性分别为80.7%～86.0%与94.9%～97.9%。基于全长VP1系统发育树，全球CVA14可划分为A-G七个基因型，目前全球范围内流行的CVA14的基...     

人工诱导泥鳅雌核发育的细胞学研究和诱导参数优化

为培育泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)全雌品种,研究通过细胞荧光染色后进行细胞学观察确定人工诱导泥鳅雌核发育的热休克起始时间,并进一步利用核型和流式细胞分析等方法对人工诱导雌核发育泥鳅进行鉴定。结果显示,二倍体泥鳅受到灭活的鲤(Cyprinus carpio)精子刺激后,第二极体与卵核分开的时间在人工授精后3—5min;卵子在人工授精后3.5min后再热休克2min的诱导孵化率达到10.26%。通过分析野生型泥鳅胚胎、人工诱导雌核发育泥鳅胚胎、泥鳅×鲤杂交胚胎和单倍体泥鳅胚胎的发育,发现部分雌核发育的胚胎可以正常发育,而杂交胚胎和单倍体胚胎会出现明显的发育障碍。核型和流式细胞检测分析表明利用本研究获得的热休克参数进行处理可得到二倍体雌核发育子代,二倍率达64.71%。研究从细胞学层面获得泥鳅雌核发育的诱导参数,可为利用人工诱导雌核发育开展全雌泥鳅育种提供指导。     

大叶芹大棚人工栽培技术

长白山区的大叶芹营养丰富，是风味独特的一种野生疏菜。它既可以鲜食，也可以腌制，还可以制罐。